目的 构建PR锌指区域蛋白（PRDM）5基因的过表达慢病毒载体，建立稳定转染的小鼠神经瘤母细胞Neuro-2a，为探讨PRDM5在缺血性脑卒中（IS）发病机制中的作用奠定基础。 方法 在NCBI上搜索PRDM5的序列并设计引物，PCR法扩增获取PRDM5基因序列，将其与BamHⅠ和AgeⅠ限制性内切酶双酶切后的慢病毒载体GV492进行连接，构建GV492-PRDM5过表达重组质粒，采用PCR法筛选并鉴定出的与目的基因片段长度相近的阳性克隆送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。将测序正确的GV492-control质粒和GV492-PRDM5过表达重组质粒分别转染至人胚胎肾细胞HEK293T中，转染48 h后离心收集慢病毒，分别为GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒，采用慢病毒滴度测定法检测上述2种慢病毒滴度。将Neuro-2a细胞分为GV492-control组和GV492-PRDM5组，分别使用GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒感染Neuro-2a细胞，慢病毒感染复数（MOI）为100，感染72 h后使用嘌呤霉素（10 mg·L^-1）对成功感染GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒的Neuro-2a细胞进行筛选，通过荧光显微镜观察GV492-control组和GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞的生长状态及绿色荧光蛋白的表达情况。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测2组Neuro-2a细胞中PRDM5 mRNA表达水平；Western blotting法检测2组Neuro-2a细胞中PRDM5蛋白表达水平。 结果 PCR法，GV492-PRDM5重组质粒阳性转化子的长度约为684 bp，GV492-PRDM5过表达重组质粒基因序列与设计合成的PRDM5过表达序列一致；GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒的滴度均为2.5×10⁸ TU·mL^-1。荧光显微镜，GV492-control组和GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞的生长状态均良好，且能观察到绿色荧光蛋白的表达。RT-qPCR法，与GV492-control组比较，GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞中PRDM5 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。Western blotting法，GV492-control组和GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞在相对分子质量为75 000附近出现特异性条带；与GV492-control组比较，GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞中PRDM5蛋白表达水平升高（P<0.01）。 结论 成功构建PRDM5过表达慢病毒载体，建立了稳定转染的GV492-PRDM5-Neuro-2a细胞。

应用隐形矫治器治疗成年人骨性错牙合畸形，特别是在拔牙病例中的应用，一直是隐形矫治技术的难点之一。本科室于2019年3月收治1例30岁女性患者，患者因“牙不齐，嘴凸”就诊，寻求矫治以改善面型。患者双侧尖磨牙远中关系，上下颌前牙唇倾，深覆盖；影像学检查，ANB角为6.2°，骨性Ⅱ类错牙合。通过减数4颗第一前磨牙，配合4枚微种植钉，经过20个月的治疗，患者拔牙间隙关闭完成，牙列整齐，咬合关系良好；前牙内收，下颌骨逆旋，软组织侧貌得到明显改善。应用隐形矫治器配合微种植体支抗可以在成年人拔牙病例中实现良好的牙齿三维方向控制，为临床医师治疗该类患者提供参考。

目的 探讨姜酮对氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）后小鼠海马神经元HT22细胞的保护作用，阐明其相关作用机制。 方法 培养HT22细胞，设置不同OGD/R时间梯度，建立OGD/R细胞损伤模型。HT22细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R＋1 μmol·L^－1姜酮组、OGD/R＋10 μmol·L^－1姜酮、OGD/R＋100 μmol·L^－1姜酮组和OGD/R+0.2%二甲亚枫（DMSO）组，CCK-8法检测各组细胞活性并计算各组细胞存活率，确定姜酮最适药物浓度。细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R+姜酮组和OGD/R+姜酮+核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制剂（ML385）组，OGD/R+姜酮组细胞经姜酮给药处理4 h后予以OGD 8 h和复糖复氧8 h 处理，OGD/R+姜酮+ML385组细胞在姜酮给药前予以10 μmol·L^－1 ML385预处理6 h，CCK-8法检测各组细胞活性，Western blotting法检测各组细胞中Nrf2、血红素加氧酶1（HO-1）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平。 结果 与对照组比较，HT22细胞经OGD 8 h和复糖复糖8 h处理后细胞存活率低于50%，以OGD 8 h和复糖复糖8 h建立HT22细胞OGD/R模型。与OGD/R组比较，OGD/R+不同剂量姜酮组细胞存活率均不同程度升高，其中OGD/R+100 μmol·L^－1姜酮组细胞存活率升高最明显（P<0.01），故选用100 μmol·L^－1姜酮用于后续实验。与对照组比较，OGD/R组细胞活性明显降低（P<0.01），细胞中Nrf2、HO-1和Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05），细胞培养上清中SOD活性明显降低（P<0.01），MDA水平明显升高（P<0.01）；与OGD/R组比较，OGD/R+姜酮组细胞活性明显升高（P<0.01），细胞中Nrf2、HO-1和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.05），细胞培养上清中SOD活性明显升高（P<0.01），MDA水平明显降低（P<0.01）；与OGD/R+姜酮组比较，OGD/R+姜酮+ML385组细胞活性明显降低（P<0.01），细胞中Nrf2、HO-1和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01），细胞培养上清中SOD活性明显降低（P<0.01），MDA水平明显升高（P<0.05）。 结论 姜酮可通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻OGD/R后氧化应激损伤对HT22细胞凋亡的抑制作用。

目的：探讨双酚A （BPA）对子宫内膜间充质干/基质细胞（eMSCs）增殖活性和干性特征的影响，阐明人脐带间充质干细胞源性上清（hUCMSC-Sup）对细胞损伤的改善作用。方法：体外培养eMSCs，以0、200、250、300、350、400μmol·L^-1 BPA处理。将eMSCs分为对照组（仅培养液培养）、BPA组(含200μmol·L^-1 BPA的等体积培养液培养)、 BPA+hUCMSC-Sup组(含200μmol·L^-1 BPA及50%体积比hUCMSC-Sup的等体积培养液培养)和BPA+CHIR-99021组(含200μmol·L^-1 BPA及10μmol·L^-1 CHIR-99021的等体积培养液培养)，使用干细胞成球培养液培养eMSCs干细胞球，其余细胞均使用DMEM/F12完全培养基培养。噻唑蓝（MTT）法检测各组eMSCs存活率，球体形成实验检测各组eMSCs干细胞球数和直径，CCK-8法检测各组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性，流式细胞术检测各组eMSCs中CD73+细胞百分率，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组eMSCs中性别决定区Y框蛋白2（Sox2）、八聚体结合转录因子4 （Oct4）和Nanog mRNA表达水平，Western blotting法检测各组eMSCs中β-连环蛋白（β-catenin）蛋白表达水平。结果：MTT法检测，BPA作用24和48 h，与0μmol·L^-1 BPA组比较，200、250、300、350和400μmol·L^-1 BPA组eMSCs存活率均明显降低（P<0.01）。药物作用24 h时，与对照组比较，BPA组eMSCs存活率明显降低（P<0.01）；药物作用48 h时，与对照组比较，BPA组eMSCs存活率明显降低（P<0.01）；与BPA组比较，BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs存活率明显升高（P<0.05）。球体形成实验检测，与培养3 d组比较，培养4和5 d组eMSCs干细胞球数和直径均明显增加（P<0.05或P<0.01）；与对照组比较，培养48 h时BPA组eMSCs干细胞球数和直径均明显减少（P<0.05或P<0.01）。CCK-8法检测，处理24和48 h时，与对照组比较，BPA组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性均明显降低（P<0.01）；与BPA组比较，BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性均明显升高（P<0.01）。流式细胞术检测，与对照组比较，BPA组eMSCs中CD73+细胞百分率明显降低（P<0.01）；与BPA组比较，BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs中CD73+细胞百分率明显升高（P<0.01）。RT-qPCR法检测，与对照组比较，BPA组eMSCs中Sox2、Oct4和Nanog mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）；与BPA组比较，BPA+hUCMSC-Sup组和BPA+CHIR-99021组eMSCs中Sox2、Oct4及Nanog mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）。Western blotting法检测，与对照组比较，BPA组eMSCs中β-catenin蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与BPA组比较，BPA+hUCMSC-Sup组和BPA+CHIR-99021组eMSCs中β-catenin蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）。结论：BPA能够抑制eMSCs的干性特征，损伤子宫内膜的自我更新及修复作用，其机制可能与下调细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性有关。hUCMSC-Sup可以促进受损eMSCs的增殖，并对BPA诱导的eMSCs干性损伤起到改善作用。

目的 探讨磷丙泊酚二钠（FP）在美国麻醉医师协会（ASA）分级Ⅰ或Ⅱ级的成人择期手术患者全麻诱导和维持阶段的疗效及安全性，为FP在全麻诱导和维持阶段应用提供理论依据。 方法 选择择期行手术治疗的ASAⅠ或Ⅱ级的成人患者，按就诊时间共有100例患者陆续进入观察，随机分为FP组（50例）和丙泊酚组（50例）。所有患者均完善术前准备，随后缓慢注射咪达唑仑2~3 mg及舒芬太尼0.3 μg·kg^-1，1~2 min后进行麻醉诱导。FP组患者静脉注射FP（10.0~12.5 mg·kg^-1），丙泊酚组患者静脉注射丙泊酚（1.5~2.0 mg·kg^-1），待患者改良警觉/镇静（MOAA/S）评分降至1分后给予肌松药完成诱导。麻醉维持中，FP组患者持续静脉泵注FP，给药速率为12.5~15.0 mg·kg^-1·h^-1；丙泊酚组患者持续泵注丙泊酚，以6 mg·kg^-1·h^-1为起始速率，2组患者均复合瑞芬太尼0.1~0.4 μg·kg^-1·min^-1协同镇痛，根据患者状态适当调整给药速率。记录并比较2组患者诱导前（T₁）、气管插管即刻（T₂）、诱导后5 min（T₃）、诱导后10 min（T₄）、诱导后20 min（T₅）、诱导后30 min（T₆）、诱导后40 min（T₇）和手术结束时（T₈）的收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压（MAP）、心率（HR）及脑电双频谱指数（BIS）值；记录2组患者镇静/麻醉起效（MOAA/S评分≤1分）时间及患者睁眼时间和苏醒时间（MOAA/S评分=5分）；观察2组患者术中SBP和BIS值的最低值及所需时间；比较2组患者出现躁动、呛咳、恶心、呕吐、心血管系统或呼吸系统等相关不良反应发生率。 结果 2组患者一般资料和手术时长比较差异无统计学意义（P>0.05）；FP组患者诱导时间明显长于丙泊酚组（P<0.05）；在全麻苏醒期，FP组患者睁眼时间和苏醒时间均明显长于丙泊酚组（P<0.05）；在不同时间点，2组患者的MAP比较差异无统计学意义（P>0.05）；FP组患者在T₄、T₅、T₆和T₇时间点的HR均低于丙泊酚组（P<0.05）；FP组患者BIS值的最低值明显小于丙泊酚组，并且FP组患者BIS值降至最低的时间也明显晚于丙泊酚组（P<0.05）；FP组患者的SBP降至最低值的时间晚于丙泊酚组（P<0.05），但2组患者SBP最低值比较差异无统计学意义（P>0.05）；2组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 与丙泊酚比较，注射用FP在ASAⅠ或Ⅱ级的成人择期手术患者的全麻诱导和维持过程中安全有效，不良反应发生率低，是一种新的麻醉选择。

目的 探讨载脂蛋白C1（APOC1）表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响，并初步阐明其相关分子机制。 方法 通过癌症基因组图谱（TCGA）数据库分析肝癌患者癌组织中APOC1 mRNA表达水平及其与患者预后的关系。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测不同肝癌细胞中APOC1 mRNA表达水平，筛选APOC1低表达的人肝癌HepG2细胞作为研究对象。将pcDNA3.1-APOC1质粒转染至HepG2细胞过表达APOC1（APOC1过表达组），以转染空载体pcDNA3.1的HepG2细胞为对照组，采用MTS法和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷（EdU）染色法检测2组细胞增殖活性和增殖率，Transwell小室实验检测2组细胞中迁移细胞数，流式细胞术和TUNEL法检测2组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率，Western blotting法检测2组细胞中细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化ERK（p-ERK）、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT（p-AKT）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）蛋白表达水平。 结果 TCGA数据库分析，肝癌患者癌组织中APOC1 mRNA表达水平低于正常肝组织（P<0.05），并且APOC1 mRNA低表达组肝癌患者预后较差。RT-qPCR法检测，HepG2细胞中APOC1 mRNA表达水平最低，选取该细胞作为后续研究对象。与对照组比较，APOC1过表达组细胞增殖活性和增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01），迁移细胞数明显减少（P<0.01）， S期细胞百分率和细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。与对照组比较，APOC1过表达组细胞中p-ERK、p-AKT和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05），cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。 结论 APOC1高表达能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖，并诱导细胞凋亡，其机制可能与其抑制 p-ERK、p-AKT、Bcl-2蛋白表达和促进cleaved caspase-3蛋白表达有关。

目的 探讨下调肝癌细胞中高迁移率族框蛋白2（HMGB2）表达对肝癌细胞生物学行为及上皮-间质转化（EMT）进程的影响，并阐明其作用机制。 方法 对数生长期的人肝癌LM3细胞分为阴性对照组和HMGB2 RNA干扰组（HMGB2 siRNA组），分别以Lipofectamin 2000为载体转染无关序列的RNA 寡核苷酸（RNA oligo）和敲除HMGB2序列的RNA oligo。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平，分别采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测2组细胞的迁移和侵袭能力，采用Western blotting法检测2组细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路相关蛋白表达水平。 结果 与阴性对照组比较，HMGB2 siRNA组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），HMGB2 siRNA 组细胞划痕愈合率明显降低（P<0.01），侵袭细胞数明显减少（P<0.01），细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高（P<0.01），N-cadherin、Vimentin、mTOR、AKT和磷酸化AKT（p-AKT）蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 下调HMGB2的表达可降低肝癌LM3细胞迁移和侵袭能力并抑制EMT，其作用机制可能与参与调节AKT/mTOR通路相关蛋白表达有关。

目的：探讨小白菊内酯（PTL）通过调控机械敏感性离子通道蛋白1 （Piezo1）表达对机械牵张应力作用下软骨细胞凋亡的影响，并阐明其相关作用机制。方法：按照拉伸性变量将软骨细胞分为0%、5%、10%、15%和20%拉伸组。另取软骨细胞，分为对照组、20%拉伸组、20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组。使用Piezo1短发夹RNA （shRNA）干扰慢病毒（sh-Piezo1）或shRNA-NC慢病毒感染软骨细胞，将软骨细胞分为sh-Piezo1组和sh-NC组，另设置空白对照组。另将软骨细胞分为20%拉伸组、20%拉伸+PTL组、20%拉伸+sh-Piezo1组和20%拉伸+sh-Piezo1+PTL组。Hoechst 33258荧光染色观察各组细胞核形态表现，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，分光光度法检测各组细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3活性，CCK-8法检测各组细胞增殖率，Fluo-4/AM荧光探针法检测各组细胞中钙离子(Ca²⁺)水平，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测各组细胞中Piezo1 mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中Piezo1蛋白表达水平。结果：Hoechst 33258荧光染色观察，随着拉伸量逐渐增加，0%、5%、10%、15%和20%拉伸组软骨细胞细胞核呈碎块状致密浓染的软骨细胞数量逐渐增加。流式细胞术检测，与0%拉伸组比较，5%、10%、15%和20%拉伸组软骨细胞凋亡率均明显升高（P<0.01）；与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、 20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞细胞凋亡率均明显降低（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+PTL组和20%拉伸+sh-Piezo1组软骨细胞凋亡率均明显降低（P<0.05）。分光光度法检测，与0%拉伸组表示，5%、10%、15%和20%拉伸组软骨细胞中Caspase-3活性均明显升高（P<0.01）；与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中Caspase-3活性明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞中Caspase-3活性均明显降低（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+PTL组和20%拉伸+sh-Piezo1组软骨细胞中Caspase-3活性均明显降低（P<0.05）。CCK-8法检测，与0μmol·L^-1 PTL组比较，40.00、 80.00和160.00μmol·L^-1 PTL组软骨细胞增殖率均明显降低（P<0.05），提示20.00μmol·L^-1 PTL为最高无毒性作用浓度。Fluo-4/AM荧光探针法检测，与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中Ca²⁺水平明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞中Ca²⁺水平均明显降低（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+PTL组和20%拉伸+sh-Piezo1组软骨细胞中Ca²⁺水平均明显降低（P<0.05）。RT-qPCR法检测，与空白对照组和sh-NC组比较，sh-Piezo1组软骨细胞中Piezo1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05）。Western blotting法检测，与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中Piezo1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞中Piezo1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）；与空白对照组和sh-NC组比较，sh-Piezo1组软骨细胞中Piezo1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论：PTL可抑制高强度周期性机械牵张应力诱导的软骨细胞凋亡，其作用机制可能与抑制Piezo1介导Ca²⁺内流引起的细胞凋亡有关。

目的：探讨扶正软坚抗癌方调控蛋白激酶B （Akt）/鼠双微体2 （MDM2）/P53信号通路对肝癌HepG2细胞恶性生物学行为的影响。方法：采用0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60、3.20和6.40 g·mL^-1扶正软坚抗癌方分别处理HepG2细胞48 h,CCK-8法检测HepG2细胞存活率，筛选扶正软坚抗癌方浓度用于后续实验。将HepG2细胞分为对照组、低剂量扶正软坚抗癌方组(0.2 g·mL^-1)、中剂量扶正软坚抗癌方组(0.4 g·mL^-1)、高剂量扶正软坚抗癌方组(0.8 g·mL^-1)、SC79组(8 mg·L^-1 SC79)和高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组(0.8 g·mL^-1扶正软坚抗癌方+8 mg·L^-1 SC79)。CCK-8法检测各组HepG2细胞增殖活性，克隆形成实验检测各组HepG2细胞克隆形成率，流式细胞术检测各组HepG2细胞凋亡率，Transwell小室实验检测各组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数，Western blotting法检测各组HepG2细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3 （Caspase-3）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、磷酸化Akt （p-Akt）、磷酸化MDM2（p-MDM2）和P53蛋白表达水平。结果：随着扶正软坚抗癌方浓度(0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、 1.60、 3.20和6.40 g·mL^-1)的升高，HepG2细胞存活率逐渐降低（P<0.05），选取0.2、0.4和0.8 g·mL^-1扶正软坚抗癌方用于后续实验。CCK-8法检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞增殖活性均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞增殖活性明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞增殖活性明显升高（P<0.05）。克隆形成实验检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞克隆形成率均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞克隆形成率明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞克隆形成率明显升高（P<0.05）。流式细胞术检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞凋亡率均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。Transwell小室实验检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数均明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数均明显升高（P<0.05）。Western blotting法检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-MDM2蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性；Caspase-3和P53蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），并呈剂量依赖性；SC79组HepG2细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-MDM2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）, Caspase-3和P53蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-MDM2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,Caspase-3和P53蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。结论：扶正软坚抗癌方抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡，其作用机制与抑制Akt/MDM2信号通路、上调P53蛋白表达有关。

目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白３（NLRP3）炎性小体在大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型肾间质纤维化中的作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 健康雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组（n=6）和UUO组（n=24），假手术组大鼠仅分离输尿管不结扎，UUO组分别于术后3、7和14 d处死大鼠，并按照处理时间分为UUO 3 d组（n=8）、UUO 7 d组（n=8）和UUO 14 d组（n=8）。HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理形态表现，试剂盒检测各组大鼠肾组织中丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）活性和羟脯氨酸（HYP）水平，免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白表达水平，Western blotting法检测各组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平。 结果 HE染色，UUO组大鼠出现明显肾小管扩张，肾间质水肿和增宽，可见较多炎症细胞浸润，部分肾小管腔内可见脱落的上皮细胞。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分均明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较，UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分明显升高（P<0.05）。Masson染色，UUO组大鼠肾间质炎症细胞浸润明显，可见明显纤维组织增生；随UUO作用时间增加，大鼠部分肾小管消失，肾间质明显增宽，胶原沉积逐渐增多，皮髓交界处胶原沉积程度更加明显。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分均明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较，UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分明显升高（P<0.05）。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中MDA水平均明显升高（P<0.05），SOD活性明显降低（P<0.05）。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中HYP水平均明显升高（P<0.05）；与 UUO 3 d 组比较， UUO 14 d 组大鼠梗阻侧肾组织中 HYP 水平明显升高（P<0.05）。免疫组织化学法，与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较，UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组比较，UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。Western blotting法，与假手术组比较，UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。 结论 NLRP3炎症小体在UUO大鼠肾纤维化过程中发挥重要作用，其作用机制与氧化应激增加和TGF-β1蛋白表达水平升高有关。

目的 探讨积雪草酸（AA）对脂多糖（LPS）诱导大鼠原代海马神经元炎症和氧化应激损伤的作用，并阐明其作用机制。 方法 原代培养大鼠海马神经元（免疫荧光染色法鉴定细胞纯度）分为对照组、LPS组（10 mg·L^-1 LPS）、LPS+AA组（10 mg·L^-1 LPS+10、20和40 µmol·L^-1 AA）、AA组（20 µmol·L^-1 AA）、ML385组［10 µmol·L^-1核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制剂］和LPS+ML385+AA组（10 mg·L^-1 LPS+10 µmol·L^-1 ML385+20 µmol·L^-1 AA）；给药处理后，噻唑蓝（MTT）法检测各组大鼠海马神经元的存活率，乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测各组大鼠海马神经元LDH漏出率，酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测各组大鼠海马神经元上清液中炎症因子［白细胞介素（IL）-1β和肿瘤坏死因子（TNF）-α］水平以及各组大鼠海马神经元中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平，Griess法测定各组大鼠海马神经元上清液中一氧化氮（NO）水平，免疫荧光法检测各组大鼠海马神经元中Nrf2和血红素氧合酶1（HO-1）蛋白表达情况；Western blotting法检测各组大鼠海马神经元中Nrf2、HO-1、核因子κB（NF-κB）和B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较，LPS组大鼠海马神经元中的海马神经元存活率、SOD活性和Bcl-2表达水平明显降低（P<0.01），LDH漏出率、IL-1β和TNF-α水平、MDA水平、NO水平以及NF-κB蛋白表达水平均明显升高（P<0.01），Nrf2和HO-1的荧光强度明显减弱，Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与LPS组比较，LPS+10 µmol∙L^-1 AA组和LPS+20 µmol∙L^-1 AA组大鼠海马神经元存活率、SOD活性和Bcl-2表达水平明显升高（P<0.01），LDH漏出率、IL-1β和TNF-α水平、MDA水平、NO水平以及NF-κB蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），Nrf2和HO-1的荧光强度明显升高（P<0.01），Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；与LPS+20 µmol∙L^-1 AA组比较，LPS+ML385+AA组海马神经元中Nrf2和HO-1荧光强度明显减弱（P<0.01），细胞核和细胞质中Nrf2、细胞中HO-1和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01），NF-κB蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。 结论 AA可改善LPS诱导的原代培养大鼠海马神经元炎症和氧化应激损伤，其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。

目的 克隆幽门螺杆菌（Hp）hp0169基因并进行晶体学研究，分析其二级结构和三维结构。 方法 由UniProt数据库中检索Hp NCTC26695菌株hp0169基因及其编码蛋白序列，采用生物信息学方法分析Hp重组胶原蛋白酶（HpPrtC）蛋白理化性质，SOPMA和DNAStrar软件预测HpPrtC蛋白二级结构特征，SWISS-MOPEL软件构建HpPrtC蛋白三维结构，IEDB和ABCpred软件预测HpPrtC蛋白B淋巴细胞抗原表位，SYFPEITHI网站预测T淋巴细胞抗原表位，专家库（EP）算法和随机森林（RF）算法预测HpPrtC蛋白可结晶性。原核表达HpPrtC重组蛋白，经Ni²⁺亲和层析和分子筛技术纯化蛋白，结晶试剂盒筛选HpPrtC的结晶条件。 结果 hp0169基因共包含1 269个碱基配对，编码蛋白全长422个氨基酸，理论等电点为7.64，相对分子质量为47 300。HpPrtC蛋白为亲水性、可溶性蛋白。HpPrtC蛋白α螺旋的氨基酸数量占全部氨基酸数量百分率为35.78%，β片层为18.72%，β转角为6.87%，无规则卷曲为38.63%。抗原表位分析，HpPrtC蛋白含有B淋巴细胞的5个优势线性表位和3个构象表位及多个T淋巴细胞潜在优势抗原表位。同源建模，HpPrtC蛋白呈二聚体，单体由β折叠围成桶状结构，周围被α螺旋和无规则卷曲围绕。HpPrtC蛋白为中等难度结晶，且无信号肽和跨膜螺旋，在0.2 mol·L^－1 氯化镁、0.1 mol·L^－1 三羟甲基氨基甲烷（Tris）、3.4 mol·L^－1 己二醇和pH 8.5条件下出现细小成簇的针状晶体。 结论 HpPrtC是一种亲水型蛋白，呈二聚体构造，在适宜条件下呈细小成簇针状晶体，其具有T淋巴细胞和B淋巴细胞优势抗原表位，可作为Hp疫苗设计的抗原，用于构建多价融合疫苗或多表位疫苗，本研究结果为Hp的防治提供了实验基础。

目的：探讨罗伊氏乳杆菌对轮状病毒（RV） SA11株体内外复制的抑制作用，并阐明其对相关免疫因子表达的影响。方法：体外实验，培养并鉴定罗伊氏乳杆菌，绘制罗伊氏乳杆菌标准曲线和生长曲线，筛选罗伊氏乳杆菌培养最佳时间和最适浓度。采用5×10～8、10×10～8、50×10～8、100×10～8、200×10～8和500×10～8 CFU·mL^-1罗伊氏乳杆菌感染细胞，台盼蓝染色法检测Caco-2细胞存活率。将不同浓度罗伊氏乳杆菌与RV体外共孵育并作用于Caco-2细胞，Caco-2细胞分为阴性对照组（NC组）、阳性对照组（PC组）和10～7、10～8、10～9及10¹⁰ CFU·mL^-1罗伊氏乳杆菌组，免疫荧光灶法检测罗伊氏乳杆菌作用后Caco-2细胞中病毒滴度，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测不同浓度罗伊氏乳杆菌作用后Caco-2细胞中RV VP6基因拷贝数。体内实验，将25窝SPF级乳鼠分为对照组、RV组（感染SA11毒株）、Ab-NC组（抗生素处理耗竭肠道菌群）、Ab-RV组（耗竭肠道菌群后感染SA11毒株）和Ab-Lac-RV组（耗竭肠道菌群，并感染罗伊氏乳杆菌后感染SA11毒株）。收取各组乳鼠灌胃第2、4、6、8和10天的粪便样本和灌胃第4天结肠组织样本，RT-qPCR法检测各组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数和结肠组织中白细胞介素（IL）-1β、IL-8、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子（TNF）-αmRNA表达水平。结果：罗伊氏乳杆菌生长良好，形态圆润，呈圆形、光滑和乳白色的凸起样菌落，且边缘较整齐；革兰染色后菌体呈紫色、不规则和方形杆状；经16SrDNA测序后序列同源性为99%，提示罗伊氏乳杆菌活化成功；罗伊氏乳杆菌活菌数与吸光度（A）值呈线性关系，回归分析标准曲线为Y=0.437 5X+0.000 6,R2=0.999 4。培养0～2 h，细菌处于对数生长期，细菌生长迟缓；培养2～14 h，细菌快速生长，并于培养14～16 h时细菌生长趋于稳定，培养16 h时达到细菌生长速率顶峰，随后进入衰亡期。5×10～8、10×10～8、50×10～8、100×10～8和200×10～8 CFU·mL^-1罗氏乳杆菌感染后，Caco-2细胞存活率均>90%，因此选用上述浓度罗氏乳杆菌感染细胞。与PC组比较，5×10～8、10×10～8、50×10～8、100×10～8和200×10～8 CFU·mL^-1罗氏乳杆菌组Caco-2细胞中RV VP6基因拷贝数均明显降低（P<0.01）。与PC组比较，10～7、10～8、10～9和10¹⁰ CFU·mL^-1罗伊氏乳杆菌组Caco-2细胞中病毒滴度均明显降低（P<0.01）。与对照组比较，Ab-NC组、Ab-RV组和Ab-Lac-RV组乳鼠肠道菌群菌落数量均明显减少，乳鼠肠道菌群耗竭成功。灌胃第2和4天，与RV组比较，Ab-RV组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数明显降低（P<0.05）；灌胃第4、6、8和10天，与Ab-RV组比较，Ab-Lac-RV组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数明显降低（P<0.05）。与对照组比较，Ab-RV组和Ab-Lac-RV组乳鼠结肠组织中IL-1β、IL-10、IFN-γ及TNF-α mRNA表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）,IL-8 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）,Ab-Lac-RV组乳鼠结肠组织中IL-10 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。结论：罗伊氏乳杆菌可能通过上调IL-1β、IL-10、IFN-γ和TNF-α mRNA表达及下调IL-8 mRNA表达，抑制RV复制。

目的：探讨过表达溶质载体家族7成员5 (SLC7A5)基因对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响，并阐明其相关机制。方法：4只3周龄SPF级SD雌性大鼠，提取原代大鼠卵巢颗粒细胞，分为阴性对照组（NC组）和促卵泡激素受体（FSHR）染色组（FSHR组）。免疫荧光染色法观察大鼠卵巢颗粒细胞中FSHR蛋白表达情况，鉴定原代大鼠卵巢颗粒细胞是否成功分离。将大鼠卵巢颗粒细胞分为对照组（转染空载体质粒）和OE-SLC7A5组（转染SLC7A5过表达质粒），采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western blotting法验证细胞转染效率。流式细胞术检测2组卵巢颗粒细胞凋亡率，流式细胞术检测2组不同细胞周期卵巢颗粒细胞百分率，RT-qPCR法检测2组卵巢颗粒细胞中SLC7A5、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3、Caspase-8和肿瘤坏死因子α (TNF-α) mRNA表达水平，Western blotting法检测2组卵巢颗粒细胞中SLC7A5、Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-8、cleaved Caspase-8和TNF-α蛋白表达水平。结果：荧光显微镜下卵巢颗粒细胞呈长梭形或者不规则形，特异性表达FSHR,NC组未见FSHR绿色荧光表达，FSHR组可见FSHR绿色荧光表达，提示大鼠原代卵巢颗粒细胞成功分离。与对照组比较，OE-SLC7A5组卵巢颗粒细胞中SLC7A5 mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），提示SLC7A5过表达质粒成功转染卵巢颗粒细胞。流式细胞术检测，与对照组比较，OE-SLC7A5组细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。与对照组比较，OE-SLC7A5组S期卵巢颗粒细胞百分率明显降低（P<0.05）。RT-qPCR法检测，与对照组比较，OE-SLC7A5组卵巢颗粒细胞中TNF-α、 Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）。Western blotting法检测，与对照组比较，OE-SLC7A5组卵巢颗粒细胞中TNF-α、Caspase-8、cleaved Caspase-8、Caspase-3、cleaved Caspase-3和SLC7A5蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。结论：SLC7A5蛋白表达增加能够通过上调TNF-α、Caspase-8和Caspase-3凋亡通路表达，促进颗粒细胞凋亡。

目的：探讨姜黄素对人前列腺癌C4-2细胞和LNCaP细胞增殖、迁移及侵袭的影响，并阐明其可能的作用机制。方法：采用慢病毒转染系统分别转染C4-2细胞和LNCaP细胞，作为shCD147-C4-2组和shCD147-LNCaP组。采用RNA干扰技术制备沉默CD147基因细胞，以转入空载体的细胞作为阴性对照，分为shNC-C4-2组（shNC-C4-2细胞）和shNC-LNCaP组（shNC-LNCaP细胞）。取生长对数期C4-2、LNCap、shCD147-C4-2和shCD147-LNCaP细胞，加入20μmol·L^-1姜黄素，处理0和24 h时，显微镜观察各组细胞形态表现。噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖活性，细胞划痕实验检测各组细胞迁移率，Western blotting法检测各组细胞中凋亡、侵袭和迁移相关蛋白表达水平。结果：与C4-2组比较，沉默CD147基因后shCD147-C4-2组细胞中CD147蛋白表达量明显减少；与LNCaP组比较，沉默CD147基因后shCD147-LNCaP组细胞中CD147蛋白表达量明显减少。与处理0 h比较，20μmol·L^-1姜黄素处理24 h后C4-2组和LNCaP组部分细胞出现凋亡征象，且有典型凋亡小体存在；shCD147-C4-2组和shCD147-LNCaP组细胞凋亡现象减弱。MTT法检测，与C4-2+0μmol·L^-1姜黄素组比较，C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组、C4-2+40μmol·L^-1姜黄素组、C4-2+60μmol·L^-1姜黄素组和C4-2+80μmol·L^-1姜黄素组细胞增殖活性均明显降低（P<0.01）；与LNCaP+0μmol·L^-1姜黄素组比较，LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组、LNCaP+40μmol·L^-1姜黄素组、LNCaP+60μmol·L^-1姜黄素组和LNCaP+80μmol·L^-1姜黄素组细胞增殖活性均明显降低（P<0.01）；与shNC-C4-2组比较，shNC-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞增殖活性明显降低（P<0.01）；与shNC-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞增殖活性明显升高（P<0.01）；与shNC-LNCaP组比较，shNC-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞增殖活性明显降低（P<0.01）；与shNC-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞增殖活性明显升高（P<0.01）。细胞划痕愈合实验检测，姜黄素处理24 h，与C4-2组比较，C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组和C4-2+40μmol·L^-1姜黄素组细胞迁移率均明显降低（P<0.01）；与LNCaP组比较，LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组和LNCaP+40μmol·L^-1姜黄素组细胞迁移率均明显降低（P<0.01）；与shNC-C4-2组比较，shNC-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞迁移率明显降低（P<0.01）；与shNC-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞迁移率明显升高（P<0.05）；与shNC-LNCaP组比较，shNC-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞迁移率明显降低（P<0.01）；与shNC-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞迁移率明显升高（P<0.05）。Western blotting法检测，与C4-2组比较，C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组和C4-2+40μmol·L^-1姜黄素组细胞中B细胞淋巴瘤2 （Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3 （cleaved Caspase-3）和聚二磷酸腺苷（ADP）-核糖聚合酶1 （PARP1）蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）；与LNCaP组比较，LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组和LNCaP+40μmol·L^-1姜黄素组细胞中Bax、cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）,LNCaP+40μmol·L^-1姜黄素组Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与shNC-C4-2组比较，shNC-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中Bax、cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与shNC-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中Bax和cleavedCaspase-3蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。与shNC-LNCaP组比较，shNCLNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中Bax、 cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）,Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与shNC-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中Bax、cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）,Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与C4-2组比较，C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组和C4-2+40μmol·L^-1姜黄素组细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白表达水平均明显升高（P<0.01），神经钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）；与LNCaP组比较，LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组和LNCaP+40μmol·L^-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）,LNCaP+40μmol·L^-1姜黄素组细胞中N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）；与shNC-C4-2组比较，shNC-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）；与shNCC4-2+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-C4-2+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）；与shNC-LNCaP组比较，shNC-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）；与shNC-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组比较，shCD147-LNCaP+20μmol·L^-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,N-cadherin表达水平明显升高（P<0.05）。结论：姜黄素对体外前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭有抑制作用，并诱导细胞凋亡，沉默CD147基因可在一定程度上降低其抑制作用和诱导细胞凋亡能力。

牙髓干细胞（DPSCs）是一类具有广泛应用潜力的间充质干细胞。DPSCs因其多向分化潜能和易获取的特点成为眼科领域研究的热点。近年来，DPSCs在角膜上皮损伤和视网膜退行性病变的治疗中表现出潜在的临床应用前景。DPSCs可以通过分化为角膜上皮细胞和抑制M1巨噬细胞，促进角膜上皮再生和重建。此外，DPSCs也可以分化为视网膜光感受器样细胞和视网膜神经节样细胞，替换原有视神经元，分泌神经营养因子介导损伤修复，促进视网膜的再生，改善视网膜原有功能。现系统地回顾近年来国内外相关文献，就DPSCs的生物学特性及其在角膜和视网膜疾病治疗中应用的研究进展进行综述，以期为DPSCs在转化医学和眼科相关疾病治疗中应用的研究提供思路及策略。

目的 探讨程序性细胞死亡配体1（PD-L1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞中的表达及其对OSCC CAL27细胞生物学行为的影响，阐明其可能的作用机制。 方法 采用Western blotting法检测口腔上皮HOK细胞和OSCC CAL27、TCA8113和SCC15细胞中PD-L1蛋白表达水平。免疫荧光染色法检测CAL27细胞中PD-L1蛋白表达和定位情况。将CAL27细胞分为对照组（转染si-NC）和si-PD-L1组（转染si-PD-L1），Western blotting法检测2组细胞干扰效率，CCK-8法检测不同时间点2组细胞增殖活性，平板克隆实验检测2组细胞克隆形成数，细胞划痕愈合实验检测2组细胞划痕愈合率，Transwell小室实验检测2组细胞中迁移和侵袭细胞数。 结果 OSCC细胞中PD-L1蛋白表达水平均高于HOK细胞（P<0.05或P<0.01），PD-L1在CAL27细胞的细胞质和细胞核中均有表达。CCK-8法和平板克隆实验，与对照组比较，不同时间点si-PD-L1组CAL27细胞增殖活性明显降低（P<0.05或P<0.01），克隆形成数明显减少（P<0.01）。细胞划痕愈合实验，与对照组比较，si-PD-L1组CAL27细胞划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01）。Transwell小室实验，与对照组比较，si-PD-L1组CAL27细胞中迁移和侵袭细胞明显减少（P<0.01）。 结论 PD-L1在OSCC细胞中的表达高于口腔正常上皮细胞，敲低PD-L1表达可抑制OSCC细胞增殖、克隆形成及迁移和侵袭能力。

目的 探讨致热介质前列腺素E2（PGE₂）对雌性小鼠下丘脑视前区正中核（MnPO）热敏神经元（WSNs）放电活动的影响，并阐明其作用机制。 方法 制作雌性小鼠MnPO冠状脑片，灌流含有突触阻断剂（STBs）的人工脑脊液（ACSF），改变灌流液温度的同时应用膜片钳技术检测神经元的放电频率，鉴定WSNs。32个MnPO WSNs分为基础放电组（n=32）和PGE₂组（n=32），采用膜片钳技术检测MnPO WSNs分别灌流ACSF和1 μmol·L^-1 PGE₂后的放电频率。选择灌流PGE₂后放电频率明显改变且活性良好的MnPO WSNs（n=21），分为PGE₂受体E系列前列腺素受体（EP）1拮抗剂（EP1 ant）+PGE₂组（n=7）、EP3 ant+PGE₂组（n=7）和EP4 ant+PGE₂组（n=7），采用膜片钳技术检测MnPO WSNs分别灌流3 μmol·L^-1 EP1 ant和1 μmol·L^-1 PGE₂混合液、10 μmol·L^-1 EP3 ant和1 μmol·L^-1 PGE₂混合液及10 μmol·L^-1 EP4 ant和1 μmol·L^-1 PGE₂混合液后的放电频率。 结果 灌流含有STBs的ACSF后，共有188个雌性小鼠的MnPO神经元进行了内在温度敏感系数（以m值表示）的鉴定，其中32个神经元的m值≥0.8，被鉴定为MnPO WSNs，占所有记录神经元的17%。与基础放电频率比较，加入PGE₂后MnPO的放电频率明显降低（P<0.05）；与PGE₂组比较，EP3 ant+PGE₂组MnPO WSNs的放电频率百分比改变降低（P<0.05）；与PGE₂组比较，EP1 ant+PGE₂组MnPO WSNs的放电频率的百分比改变差异无统计学意义（P>0.05）；与PGE₂组比较，EP4 ant+PGE₂组MnPO WSNs的放电频率的百分比改变差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 雌性小鼠MnPO存在约17%的WSNs；PGE₂可通过突触后的机制经EP3受体直接抑制雌性小鼠MnPO WSNs的放电活动。

目的：探讨微小RNA (miR)-30c-5p对人前列腺癌细胞（LNCap）增殖、迁移和侵袭的影响，并阐明其可能的机制。方法：LNCap细胞根据转染质粒不同分为LNCap组（无转染质粒）、miR-30c-5p mimic组（转染miR-30c-5p mimic）、mimic NC组（转染miR-30c-5p mimic NC）、sh-DNA损伤诱导转录因子4 (DDIT4)组（转染sh-DDIT4）、sh-NC组（转染sh-DDIT4 NC）、miR-30c-5p mimic+pc-DNA3.1-NC组（共转染miR-30c-5p mimic和pc DNA3.1-DDIT4空载质粒）和miR-30c-5p mimic+pc-DNA3.1-DDIT4组（共转染miR-30c-5pmimic和pc-DNA3.1-DDIT4过表达质粒），RWPE-1细胞正常培养。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中miR-30c-5p和DDIT4mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中DDIT4蛋白表达水平，CCK-8法检测各组LNCap细胞增殖率，Transwell小室实验检测各组LNCap细胞侵袭细胞数，划痕实验检测各组LNCap细胞划痕愈合率，双荧光素酶报告基因实验验证miR-30c-5p与DDIT4的靶向关系。体内裸鼠成瘤实验，18只雄性BALB/c裸鼠随机分为空白组、agomiR-NC组（转染agomiR-30c-5p NC）和agomiR-30c-5p组（转染agomiR-30c-5p），每组6只。agomiR-NC组和agomiR-30c-5p组裸鼠皮下注射LNCap细胞，空白组裸鼠注射等量生理盐水，检测各组小鼠肿瘤体积。HE染色观察各组小鼠前列腺癌组织形态表现，RT-qPCR法和免疫荧光染色法检测各组小鼠前列腺癌组织中miR-30c-5p和DDIT4 mRNA表达水平及DDIT4蛋白荧光强度。结果：体外前列腺癌细胞实验，与人正常前列腺上皮RWPE-1细胞比较，前列腺癌LNCap细胞中miR-30c-5p表达水平明显降低（P<0.01）,DDIT4 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）；转染48 h后，与LNCap组和mimic NC组比较，miR-30c-5p mimic组LNCap细胞中miR-30c-5p表达水平明显升高（P<0.01）。与LNCap组和sh-NC组比较，sh-DDIT4组LNCap细胞中DDIT4 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）；与miR-30c-5p mimic组和miR-30c-5p mimic+pcDNA3.1 NC组比较，miR-30c-5p mimic+pc-DNA3.1-DDIT4组LNCap细胞中miR-30c-5p表达水平明显降低（P<0.01）；与miR-30c-5p mimic组和miR-30c-5p mimic+pcDNA3.1 NC组比较，miR-30c-5p mimic+pc-DNA3.1-DDIT4组LNCap细胞中DDIT4 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）；与miR-30c-5pmimic组和miR-30c-5pmimic+pcDNA3.1NC组比较，miR-30c-5pmimic+pc-DNA3.1-DDIT4组LNCap细胞中DDIT4蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。CCK-8法检测，与LNCap组和mimic NC组比较，miR-30c-5p mimic组LNCap细胞增殖率明显降低（P<0.01）；与LNCap组和sh-NC组比较，sh-DDIT4组LNCap细胞增殖率明显降低（P<0.01）；与miR-30c-5p mimic组和miR-30c-5pmimic+pcDNA3.1NC组比较，miR-30c-5pmimic+pc-DNA3.1-DDIT4组LNCap细胞增殖率明显升高（P<0.01）。Transwell小室实验检测，与LNCap组和mimic NC组比较，miR-30c-5p mimic组LNCap细胞侵袭细胞数明显减少（P<0.01）；与LNCap组和sh-NC组比较，sh-DDIT4组LNCap细胞侵袭细胞数明显减少（P<0.01）；与miR-30c-5pmimic组和miR-30c-5p mimic+pcDNA3.1 NC组比较，miR-30c-5p mimic+pc-DNA3.1-DDIT4组LNCap细胞侵袭细胞数明显增加（P<0.01）。划痕实验检测，与LNCap组和mimic NC组比较，miR-30c-5p mimic组LNCap细胞划痕愈合率明显降低（P<0.01）；与LNCap组和sh-NC组比较，sh-DDIT4组细胞划痕愈合率明显降低（P<0.01）；与miR-30c-5p mimic组和miR-30c-5p mimic+pcDNA3.1 NC组比较，miR-30c-5p mimic+pc-DNA3.1-DDIT4组细胞划痕愈合率明显升高（P<0.01）。双荧光素酶实验检测，与共转染WT-DDIT4和mimic NC的LNCap细胞比较，共转染WT-DDIT4和miR-30c-5p mimic的LNCap细胞中荧光素酶活性明显降低（P<0.01）。体内裸鼠成瘤实验，细胞注射后第3、6、9、12和15天，与空白组和agomiR-NC组比较，agomiR-30c-5p组裸鼠肿瘤体积明显减小（P<0.05）。HE染色观察，空白组和agomiR-NC组小鼠前列腺癌组织中细胞核增大，核仁突出且畸形；agomiR-30c-5p组小鼠前列腺癌组织部分区域细胞排列整齐，细胞核恢复正常形态。RT-qPCR法和免疫荧光染色法检测，与agomiR-NC组比较，agomiR-30c-5p组小鼠前列腺癌组织中miR-30c-5p表达水平明显升高（P<0.01）；与空白组和agomiR-NC组比较，agomiR-30c-5p组小鼠前列腺癌组织中DDIT4 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）;DDIT4蛋白主要在细胞质表达，与空白组和agomiR-NC组比较，agomiR-30c-5p组小鼠前列腺癌组织中DDIT4蛋白荧光强度明显降低（P<0.01）。结论：miR-30c-5p在前列腺癌LNCap细胞中表达水平明显降低，其可通过靶向下调DDIT4抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭，从而参与前列腺癌的发生发展。

目的 探讨CD40配体（CD40L）通过长链非编码RNA（lncRNA） linc00239对人单核细胞白血病THP-1细胞生物学行为的影响，阐明其可能的作用机制。 方法 构建linc00239过表达载体（pcDNA-linc00239）和干扰载体（sh-linc00239），转染至THP-1细胞，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测转染效率。THP-1细胞分为对照组、空载体（vector）组、pcDNA-linc00239组、sh-linc00239组、vector+CD40L组、pcDNA-linc00239+CD40L组和sh-linc00239+CD40L组。RT-qPCR法检测各组细胞中linc00239表达水平，CCK-8法检测各组细胞增殖活性，流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率，RT-qPCR法和Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和Bcl-2关联X蛋白（Bax）mRNA和蛋白表达水平，Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B（AKT）和磷酸化AKT（p-AKT）蛋白表达水平并计算p-AKT/AKT比值。 结果 与vector组比较，pcDNA-linc00239组细胞增殖活性和G₂期细胞百分率明显升高（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平和p-AKT/AKT比值明显升高（P<0.05或P<0.01），G₁期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与vector组比较，sh-linc00239组和vector+CD40L组细胞增殖活性和G₂期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平及p-AKT/AKT比值明显降低（P<0.05或P<0.01），G₁期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。与pcDNA-linc00239组比较，pcDNA-linc00239+CD40L组细胞增殖活性和G₂期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平及p-AKT/AKT比值明显降低（P<0.05或P<0.01），G₁期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）；与sh-linc00239组比较，sh-linc00239+CD40L组细胞增殖活性和G₂期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平及p-AKT/AKT比值明显降低（P<0.05或P<0.01），G₁期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。 结论 CD40L可通过linc00239抑制THP-1细胞增殖和细胞周期进展，并诱导细胞凋亡。

目的 基于网络药理学、分子对接和体内外高尿酸模型实验探讨筒鞘蛇菰治疗高尿酸血症（HUA）的作用，阐明其活性成分的主要作用靶点和信号通路相关机制。 方法 通过台湾中医药资料库、本草组鉴数据库、化学专业数据库、TargetNet数据库、SwissTargetPrediction数据库、GeneCards数据库、药物靶点数据库（TTD）、DrugBank数据库、DisGeNET数据库、人类在线孟德尔遗传（OMIM）数据库和Venny数据库获取筒鞘蛇菰治疗HUA的潜在靶点；利用STRING数据库和Cytoscape软件构建筒鞘蛇菰活性成分-预测靶点网络和蛋白-蛋白互作（PPI）网络，并进行拓扑分析筛选筒鞘蛇菰主要活性成分和核心靶点，采用R软件进行基因本体论（GO）功能和京都基因组与基因百科全书（KEGG）信号通路富集分析，采用AutoDock Vina软件进行分子对接验证。NRK-52E细胞分为空白对照组、空白给药组、模型组和不同浓度（2.0、10.0及50.0 μmol·L^－1）圣草酚（EDT）组，模型组和不同浓度EDT组细胞采用腺苷诱导制备高尿酸细胞模型，采用高效液相色谱（HPLC）法检测各组细胞培养上清液中尿酸（UA）水平。雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、空白给药组、模型组和EDT组，后2组小鼠制备HUA模型，采用试剂盒检测各组小鼠血清中UA、肌酐（Cr）和血尿素氮（BUN）水平；取小鼠两侧肾组织，称质量，计算各组小鼠肾脏指数；TUNEL染色法观察各组小鼠肾组织中细胞凋亡情况；Western blotting法检测各组小鼠肾组织中蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达水平。 结果 筛选得到筒鞘蛇菰6种活性成分，涉及116个交集靶点，14个核心靶点。富集分析得到1 828个GO条目和145条信号通路。分子对接结果，EDT与MMP-9具有较好的结合活性。高尿酸细胞实验，与空白对照组比较，模型组细胞中UA水平明显升高（P<0.01）；与模型组比较，2.0、10.0和50.0 μmol·L^－1 EDT组细胞中UA水平明显降低（P<0.01）。与空白对照组比较，模型组小鼠血清中UA、Cr和BUN水平及肾脏指数明显升高（P<0.01）；与模型组比较，EDT组小鼠血清中UA、Cr和BUN水平及肾脏指数明显降低（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较，模型组小鼠肾组织中可见大量凋亡细胞；与模型组比较，EDT组小鼠肾组织中凋亡细胞数明显减少。与空白对照组比较，模型组小鼠肾组织中p-AKT/AKT及p-PI3K/PI3K比值和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），Bax和MMP-9蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；与模型组比较，EDT组小鼠肾组织中p-AKT/AKT及p-PI3K/PI3K比值和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），Bax和MMP-9蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。 结论 筒鞘蛇菰活性成分EDT具有降UA作用，且可能通过激活PI3K/AKT信号通路抑制细胞凋亡并缓解肾损伤。

目的 探讨载脂蛋白E（APOE）基因多态性在神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用，为阿尔茨海默病（AD）发病机制的研究提供理论依据。 方法 体外分离培养APOE基因敲除小鼠（APOE ^-/- ）原代皮层星形胶质细胞，免疫荧光染色法鉴定细胞纯度。构建人APOE3和APOE4重组过表达质粒，分别转染至原代APOE ^-/- 星形胶质细胞中，以APOE ^-/- 原代细胞为对照，采用Western blotting法检测细胞中APOE和神经胶质酸性蛋白（GFAP）蛋白表达水平，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞培养上清中APOE水平。采用白细胞介素1α（IL-1α）、肿瘤坏死因子（TNF）和补体C1q联合刺激转染APOE3和转染APOE4的原代星形胶质细胞制备炎症模型，分为APOE3+PBS组、APOE4+PBS组、APOE3+IL-1α+TNF+CC1q组和APOE4+IL-1α+ TNF+C1q组，采用细胞免疫荧光染色法观察各组细胞形态表现，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中磷脂酰肌醇蛋白聚糖4（Gpc4）、磷脂酰肌醇蛋白聚糖6（Gpc6）、血小板反应蛋白1（Thbs1）、血小板反应蛋白 2（Thbs2）、酸性分泌蛋白类似蛋白1（Sparcl1）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）、C3和 S100钙结合蛋白B（S100B）mRNA表达水平，微球吞噬实验检测各组细胞吞噬能力，Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）蛋白表达水平。 结果 与APOE ^-/- 组比较，转染APOE3和APOE4组细胞中APOE和GFAP蛋白表达水平及细胞培养上清中APOE水平明显升高（P<0.01）。荧光显微镜下观察，分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较，APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组星形胶质细胞突起变短，胞体变大；与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较，APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组星形胶质细胞突起更短。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较，APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）；与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较，APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较，APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中GDNF mRNA表达水平明显降低（P<0.01），C3和S100B mRNA表达水平明显升高（P<0.01）；与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较，APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中GDNF mRNA表达水平明显降低（P<0.05），C3和S100B mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较，APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞吞噬微珠数量明显减少；与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较，APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞吞噬微珠数量明显减少。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较，APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+　TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较，APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 APOE4基因型比APOE3诱导炎症因子能力更强，可诱导神经毒性反应性星形胶质细胞表型，增加神经毒性，影响星形胶质细胞凋亡，从而加剧神经元损伤。

目的 探讨白屈菜红碱（CHE）对人卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化（EMT）的抑制作用，阐明其相关作用机制。 方法 体外培养SKOV3细胞，分为对照组和2.5、5.0、10.0、20.0及40.0 μmol·L^－1 CHE组，采用噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖抑制率。体外培养SKOV3细胞，分为对照组、转移生长因子β1（TGF-β1）组、TGF-β1+5 μmol·L^－1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L^－1 CHE组，采用细胞划痕实验检测各组细胞迁移率，Transwell小室实验检测各组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数，Westren blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）蛋白表达水平，免疫荧光染色法检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin荧光强度。 结果 MTT法，与对照组比较，5.0、10.0、20.0和40.0 μmol·L^－1 CHE组细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05或P<0.01）。细胞划痕实验，与对照组比较，TGF-β1组细胞迁移率明显升高（P<0.01）；与TGF-β1组比较，TGF-β1+5 μmol·L^－1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L^－1 CHE组细胞迁移率明显降低（P<0.01）。Transwell小室实验，与对照组比较，TGF-β1组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加（P<0.05）；与TGF-β1组比较，TGF-β1+5 μmol·L^－1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L^－1 CHE组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少（P<0.01）。Westren blotting法，与对照组比较，TGF-β1组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低（P<0.01），N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）；与TGF-β1组比较，TGF-β1+5 μmol·L^－1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L^－1 CHE组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高（P<0.01），N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。免疫荧光染色，与对照组比较，TGF-β1组细胞中E-cadherin荧光强度明显降低，N-cadherin荧光强度明显升高；与TGF-β1组比较，TGF-β1+5 μmol·L^－1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L^－1 CHE组细胞中E-cadherin荧光强度明显升高，N-cadherin荧光强度明显降低。 结论 CHE能够抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。

目的：探讨白藜芦醇对颞下颌关节骨关节炎（TMJOA）的治疗作用，并阐明相关作用机制。方法：45只SD大鼠随机分为对照组、模型组和白藜芦醇组，每组15只。模型组和白藜芦醇组大鼠关节腔内注射20 g·L-1碘乙酸钠（MIA） 50μL，构建TMJOA大鼠模型；对照组大鼠注射等量生理盐水。造模3周后，白藜芦醇组大鼠注射80μL白藜芦醇溶液，每周1次，连续3周，对照组和模型组大鼠注射等量生理盐水。微型计算机断层扫描技术（Micro-CT）系统检测各组大鼠髁突结构，计算感兴趣区的骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb. Th）、骨小梁间距（Tb. p）和骨小梁数（Tb. N）。HE染色和甲苯胺蓝染色观察各组大鼠颞下颌关节（TMJ）组织病理形态表现，免疫组织化学法检测各组大鼠TMJ组织中性别决定区Y框蛋白（SOX）-9、基质金属蛋白酶（MMP）-13、沉默信息调节因子（Sirt）1、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达水平，实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组大鼠TMJ组织中SOX-9、MMP-13、Sirt1、PI3K、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和蛋白激酶B (Akt) mRNA表达水平。结果：造模3周后，大鼠髁突骨质破坏明显，表面粗糙不平，延续性中断，表明TMJOA大鼠模型造模成功。Micro-CT系统检测，对照组大鼠髁突表面光滑，形态规则，骨质连续完整；模型组大鼠髁突破坏明显，骨质连续性受到不同程度破坏，表面粗糙可伴有不同程度骨质缺损；白藜芦醇组大鼠髁突病变减轻，髁突形态外观得到一定的改善。与对照组比较，模型组大鼠BV/TV和Tb. Th均明显降低（P<0.05）,Tb. Sp明显增加（P<0.05）；与模型组比较，白藜芦醇组大鼠BV/TV和Tb. Th均明显升高（P<0.05）,Tb. Sp明显减少（P<0.05）。HE染色观察，对照组大鼠髁突层次清晰，软骨细胞排列规则，整齐有序；模型组大鼠髁突表面粗糙不平，缺损明显，呈现典型的TMJOA表现；白藜芦醇组大鼠髁突表面略微粗糙，整体分层大致清晰，细胞排列较为有序。甲苯胺蓝染色观察，对照组大鼠髁突肥大层软骨细胞呈蓝紫色，染色明显且均匀；模型组大鼠髁突肥大层软骨细胞淡染，部分区域甚至失染；白藜芦醇组大鼠髁突肥大细胞层染色基本明显且较为均匀。免疫组织化学法检测，与对照组比较，模型组大鼠TMJ组织中MMP-13、PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,SOX-9和Sirt1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）；与模型组比较，白藜芦醇组大鼠TMJ组织中SOX-9和Sirt1蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,MMP-13、PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。RT-qPCR法检测，与对照组比较，模型组大鼠TMJ组织中MMP-13、PI3K、Akt和mTOR mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）,SOX-9和Sirt1 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）；与模型组比较，白藜芦醇组大鼠TMJ组织中SOX-9和Sirt1 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）,MMP-13、PI3K、Akt和mTOR mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）。结论：白藜芦醇对TMJOA有治疗作用，其作用机制可能是通过激活Sirt1、抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路实现的。

脂蛋白a [Lp (a)]是由载脂蛋白A (apo A)、apo B100和胆固醇酯核心共同组成的高度多态性脂蛋白分子；钙化性主动脉瓣狭窄（CAVS）是由环境和遗传因素共同参与的多因素心脏瓣膜病，Lp (a)是CAVS发病的独立危险因素，可增加CAVS的发病风险。Lp (a)在CAVS的治疗过程中发挥重要作用，尽管目前临床上仍以手术作为CAVS的主要治疗手段，但随着对其病理机制的深入探索，以Lp (a)为潜在治疗靶点的药物治疗也成为一种新的方法。现就Lp (a)的结构、特点及其在CAVS发生发展中的作用、高脂蛋白a血症相关治疗和通过抵抗炎症对CAVS进行预防及治疗的研究进行综述，提高临床医生对高脂蛋白a血症的了解和重视，为CAVS的预防及靶向药物治疗提供新的思路。

目的：分析1例腹股沟精原细胞瘤睾丸精原细胞瘤患者的临床资料，为该类患者诊断和治疗提供参考。方法：收集1例原发性腹股沟精原细胞瘤患者的临床症状、影像学特征、病理学表现和诊断及治疗方法，并进行文献复习。结果：患者，男性，43岁，因偶然发现左侧腹股沟肿物入院，专科查体肿块、边界尚清，表面欠光整，可触及结节和局部波动感，活动欠佳，无表皮溃疡，肤温略高，双侧睾丸形态和大小正常且无压痛。辅助检查，甲胎蛋白（AFP） 2.3 mg·L^-1、β-绒毛膜促性腺激素（HCG）<0.1 IU·L^-1、乳酸脱氢酶（LDH） 254.31 IU·L^-1，肝功、肾功、血常规和凝血常规均正常，胸部CT、心电图、心脏彩超、肝胆脾胰彩超和后腹膜彩超均未见异常。肿瘤科术前穿刺病理结果提示精原细胞瘤，经临床综合分析后决定行腹股沟肿物切除术和腹股沟淋巴结清扫术，术后病理与术前病理结果一致，均为精原细胞瘤且伴腹股沟淋巴结转移，术后1、3、6和8个月随访，患者恢复良好，无任何不适，能从事轻度体力活动，且病情稳定，无进展表现，目前已于肿瘤科行3次放化疗。结论：原发性腹股沟精原细胞瘤治愈率高，恶性度普遍较低，对放疗和化疗敏感，预后良好。

目的：探讨嗜酸性粒细胞（EOS）在宫颈组织中的浸润差异及其与宫颈相关疾病之间的关系，阐明EOS对宫颈上皮不典型增生（CIN）和宫颈癌发生发展的影响。方法：收集256例宫颈疾病患者的临床资料，根据其发病情况分为宫颈癌组（n=46，其中宫颈鳞状细胞癌26例、宫颈腺癌15例和宫颈腺鳞癌5例）、慢性宫颈炎组（n=50）、CINⅠ期组（n=50）、CINⅡ期组（n=50）、CINⅢ期组（n=30）和正常组（癌旁正常宫颈组织，n=30）。阴道镜观察各组患者宫颈组织形态表现，薄层液基细胞学测试（TCT）法观察各组患者宫颈脱落细胞形态表现，杂交捕获-化学发光法检测各组患者宫颈组织人乳头瘤病毒（HPV）感染情况，HE染色观察各组患者宫颈组织病理形态表现，刚果红染色检测各组患者宫颈组织中EOS浸润数，Pearson相关性分析EOS浸润数与宫颈癌恶性程度的相关性。结果：正常组患者宫颈表面光滑，呈粉红色，毛细血管均匀分布；慢性宫颈炎组患者宫颈表面呈红色炎性改变，部分伴有纳氏囊肿形成，可见不同程度的糜烂和溃疡等；CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期组患者宫颈可见上皮溃疡、增厚和形态不规则，细镶嵌及点状血管明显；宫颈癌组患者宫颈表面隆起，可见新生肿物及坏死性溃疡，质脆易出血。醋酸染色后，正常组患者宫颈无明显改变；慢性宫颈炎组患者宫颈呈少量白色改变，持续时间较短；CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期组患者宫颈薄醋白上皮不规则、呈地图样边界，其中CINⅠ期组患者宫颈部分组织呈醋白反应，CINⅡ期组患者宫颈出现明显醋白反应，CINⅢ期组患者宫颈醋白反应非常明显，面积较大，且持续时间较长；宫颈癌组患者宫颈醋白反应明显，白色上皮厚，持续时间久，轮廓硬直，边界清晰。正常组患者宫颈碘染色后呈棕褐色，着色均匀；慢性宫颈炎组患者宫颈炎性病变区着色差；CINⅠ期组患者宫颈上皮化生区碘着色不明显；CINⅢ期组患者宫颈病变区着色差，转化区周围面积较大；宫颈癌组患者宫颈表面不规则，呈菜花样生长，碘染色后不着色，呈现为橘黄或芥末黄色。TCT法观察，正常组患者宫颈脱落细胞中无异型性细胞，炎症细胞浸润少；慢性宫颈炎组患者宫颈脱落细胞中可见大量的中性粒细胞和EOS等炎症细胞，无异型性细胞；CINⅠ期和CINⅡ期组患者宫颈脱落细胞中可见双核异型性细胞，核质比较高，细胞核较深染，周围见空晕；CINⅢ期组患者脱落细胞中可见较多异型性细胞，核质比较高，核膜不规则；宫颈癌组患者宫颈脱落细胞中可见大而显著的核仁，聚集成片，合胞体样改变明显；与正常组比较，CINⅠ期组、CINⅡ期组、CINⅢ期组和宫颈癌组患者宫颈脱落细胞异型性均明显增加。杂交捕获-化学发光法检测，与正常组和慢性宫颈炎组比较，CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期组患者HPV感染数和TCT异型性细胞数均明显增加（P<0.05）；与CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期组比较，宫颈癌组患者HPV感染数和TCT异型性细胞数均明显增加（P<0.05）。HE染色观察，正常组宫颈组织细胞形态正常，结构清晰，可见中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、EOS和淋巴细胞等炎症细胞浸润；慢性宫颈炎组患者炎症细胞浸润增加；CIN组患者宫颈细胞核核仁稍大，可见异型性细胞，炎症细胞主要分布于异型性细胞周围；宫颈癌组患者宫颈细胞核仁大而深染，细胞异型性明显，癌细胞周围炎症细胞浸润增加。与正常组比较，慢性宫颈炎组患者宫颈组织中炎症细胞数和EOS浸润数均明显增加（P<0.05）,CIN组患者炎症细胞数和EOS浸润数均明显增加（P<0.05）；与慢性宫颈炎组比较，CIN组患者炎症细胞数和EOS浸润数均明显减少（P<0.05）；与慢性宫颈炎组和CIN组比较，宫颈癌组患者炎症细胞数和EOS浸润数均明显增加（P<0.05）。宫颈癌组织中EOS主要分布于癌巢周围，与CINⅠ期组比较，CINⅡ期组和CINⅢ期组患者宫颈组织中EOS浸润数均明显增加（P<0.05）；与CINⅡ期组比较，CINⅢ期组患者宫颈组织中EOS浸润数明显增加（P<0.05）。肿瘤恶性程度越高，EOS浸润越多，EOS浸润数与宫颈癌浸润深度呈正相关关系（r=0.533 0,P<0.01）。结论：HPV感染和EOS浸润具有促进宫颈癌癌前病变及宫颈癌发生发展的作用。

目的：评价司库奇尤单抗治疗成人中重度斑块状银屑病的临床疗效和安全性。方法：收集183例接受司库奇尤单抗治疗的成人中重度斑块状银屑病患者的临床资料，第0、1、2、3和4周每周皮下注射司库奇尤单抗1次，其后每4周注射1次，每次300 mg，随访52周。计算银屑病患者的银屑病面积及严重指数（PASI）、体表受累面积（BSA）、基线研究者整体评估（IGA）及平均皮肤病生活质量指数（DLQI）评分，以银屑病患者是否达到PASI 100，分为痊愈组和非痊愈组，评价司库奇尤单抗治疗中重度斑块状银屑病的临床疗效和安全性，并分析其影响因素。结果：与治疗0周时比较，司库奇尤单抗治疗第4、12、24和52周患者PASI、BAS、IGA及DLQI评分均明显降低（P<0.05）。司库奇尤单抗治疗后PASI 75、PASI 90和PASI 100患者百分率于第4周分别为95.6%、84.2%和47.5%，第12周分别为97.3%、95.6%和78.7%，第24周分别为97.8%、96.7%和84.2%，第52周分别为98.4%、 97.8%和83.6%; BSA≤1%患者百分率于第4、 12、 24和52周分别为80.9%、94.5%、95.6%及94.0%;IGA 0/1患者百分率于第4、12、24和52周分别为86.3%、97.3%、96.7%及95.6%;DLQI 0/1患者百分率于第4、12、24和52周分别为76.6%、89.1%、92.9%及91.8%。司库奇尤单抗治疗第4周，2组患者年龄、体质量指数（BMI）、病程、基线PASI评分和既往生物制剂治疗史患者百分率比较差异均有统计学意义（P<0.05）；司库奇尤单抗治疗第24周，2组患者年龄和BMI比较差异有统计学意义（P<0.05）。司库奇尤单抗治疗第4周，BMI≥25 kg·m^-2、病程≥10年、基线PASI评分≥10和有既往生物制剂治疗史是影响患者痊愈的危险因素（P<0.05）；司库奇尤单抗治疗第24周，年龄≥40岁是影响患者痊愈的危险因素（P<0.05）。183例银屑病患者在治疗期间共44例患者报告49次不良反应，出现不良反应患者百分率为24.0%，无严重不良事件和致死性不良反应发生。不良反应包括上呼吸道感染23例、湿疹样皮损10例、皮肤真菌感染6例、荨麻疹3例、肝功能轻度异常2例、毛囊炎2例、结膜炎2例和中耳炎1例。结论：司库奇尤单抗治疗成人中重度斑块状银屑病起效迅速且疗效持久，BMI、病程、基线PASI评分、既往生物制剂治疗史和年龄是司库奇尤单抗临床疗效的影响因素，其总体安全性良好，可作为中重度斑块状银屑病的一线治疗药物。

目的：探讨敲低受体相互作用蛋白激酶3 （RIP3）对缺氧复氧（H/R）诱导下人肾小管上皮HK2细胞自噬、焦亡和铁死亡的影响。方法：将慢病毒干扰载体质粒shRIP3和阴性对照慢病毒干扰载体质粒shNC分别转染至HK2细胞中，分为shRIP3组和shNC组，另以正常培养未转染的HK2细胞作为空白组，转染48 h后，采用实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法和Western blotting法验证慢病毒转染效果。将HK2细胞分为对照组、H/R组、shNC+H/R组和shRIP3+H/R组。CCK-8法检测各组HK2细胞存活率，免疫荧光染色法检测各组细胞中微管结合蛋白1轻链（LC） 3B和含核苷酸结合结构域富亮氨酸重复序列（NLR）家族Pyrin域蛋白3 （NLRP3）蛋白荧光强度，Western blotting法检测各组HK2细胞中LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Beclin1、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-1、膜穿孔蛋白D （GSDMD）、白细胞介素（IL）-1β和IL-18蛋白表达水平，试剂盒检测各组细胞中铁离子(Fe²⁺)水平。结果：与空白组和shNC组比较，shRIP3组HK2细胞中RIP3 mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。CCK-8法检测，与对照组比较，H/R组HK2细胞存活率明显降低（P<0.05）；与H/R组比较，shRIP3+H/R组HK2细胞存活率明显升高（P<0.05）。免疫荧光染色法检测，与对照组比较，H/R组HK2细胞中LC3B蛋白荧光强度明显降低（P<0.05）,NLRP3蛋白荧光强度明显升高（P<0.05）；与H/R组比较，shRIP3+H/R组HK2细胞中LC3B蛋白荧光强度明显升高（P<0.05）,NLRP3蛋白荧光强度明显降低（P<0.05）。Western blotting法检测，与对照组比较，H/R组HK2细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低（P<0.05）,Beclin1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与H/R组比较，shRIP3+H/R组HK2细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高（P<0.05）,Beclin1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与对照组比较，H/R组HK2细胞中Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与H/R组比较，shRIP3+H/R组HK2细胞中Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与对照组比较，H/R组HK2细胞中GPX4和SLC7A11蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）；与H/R组比较，shRIP3+H/R组HK2细胞中GPX4和SLC7A11蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。与对照组比较，H/R组HK2中细胞Fe²⁺水平明显升高（P<0.05）；与H/R组比较，shRIP3+H/R组HK2细胞中Fe²⁺水平明显降低（P<0.05）。结论：靶向敲低RIP3可诱导H/R诱导人肾小管上皮HK2细胞自噬，抑制细胞焦亡和减轻铁死亡。

Gag-Pol蛋白是人类免疫缺陷病毒（HIV）重要结构蛋白之一，其组成成分包含了HIV的基本骨架蛋白和生命周期中所需要的功能酶，目前以Gag-Pol上不同的功能区为靶点开发的抑制剂包括衣壳（CA）抑制剂、蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂和整合酶抑制剂等。CA抑制剂通过抑制CA的成熟或者破坏CA的组装进而影响HIV复制。蛋白酶抑制剂主要的作用机制是抑制蛋白酶对切割位点CA-间隔多肽1（SP1）的切割，逆转录酶抑制剂通过模仿逆转录底物，阻断HIV的逆转录过程，整合酶抑制剂通过靶向整合酶活性中心—锌指结构影响整合酶活性。本文总结了针对HIV Gag-Pol蛋白的抑制剂及其作用机制，并对已批准上市成药的用法用量进行综述，为今后临床联合用药和针对HIV Gag-pol蛋白的新型抑制剂开发提供参考。

目的 探讨Fournier坏疽患者临床表现、诊断和治疗方法，以提高临床医生对该病的认识。 方法 收集1例Fournier坏疽患者的临床症状、体征、影像学表现和手术结果等临床资料，并复习相关文献，总结Fournier坏疽患者的临床特点、诊断和治疗方法。 结果 患者，男，42岁，因会阴、阴囊和肛周感染13 d入院。既往史，急性髓系白血病10个月，于当地医院行化疗8个疗程。腹部CT提示，左侧腹股沟区软组织增厚，密度增高浑浊。血常规，白细胞23.99×10⁹ L^-1。创面分泌物培养为大肠埃希菌和阴沟肠杆菌。专科检查，患者阴囊和左臀部近肛门处皮肤坏死，色黑，质硬，坏死皮肤周围溶解，与基底及周围正常皮肤分离，可见少量脓性渗出，无明显异味，创面周围皮肤红肿明显；肛门指诊无出血，未探及窦道。患者入院后当天行急诊清创手术，术后予以换药和多次留置简易负压后行会阴部皮瓣修复及皮肤移植手术，术后患者恢复良好，功能正常，无并发症。 结论 Fournier坏疽起病急且进展快，患者临床表现无特异性，感染范围与疾病进展不一致。确诊主要依靠术中探查。反复多次的根治性手术是其主要治疗手段。该病预后较好，复发率低，术后仍需长期随访。

目的 分析富亮氨酸胶质瘤失活蛋白1（LGI-1）抗体阳性自身免疫性脑炎（AE）（LGI-1 AE）并发睡眠障碍和认知障碍患者的临床资料，探讨其可能的病理机制。 方法 患者，男性，68岁。因记忆力减退2个月，抽搐1个月入院，临床诊断LGI-1 AE，给予人免疫球蛋白联合甲泼尼龙琥珀酸钠治疗后症状好转。在排除任何药物影响下，分别于急性期及恢复期对患者进行神经心理学评估及包括睡眠多导图（PSG）检查的睡眠评估。 结果 急性期评估提示患者存在严重认知障碍，简易精神状态检查量表（MMSE）评分22分，蒙特利尔认知评价量表（MoCA）评分19分。PSG检查，总睡眠时间明显缩短（265 min），睡眠全程碎片化，睡眠效率降低，N3和快速眼动期（REM）睡眠完全缺失。恢复期评估，患者认知功能改善（MMSE评分30分，MoCA评分26分），PSG检查总睡眠时间正常，睡眠潜伏期13.5 min，睡眠碎片化明显改善，睡眠效率提高（84.3%），N3期睡眠26 min（5.1%），REM期睡眠69 min（13.6%）。 结论 LGI-1 AE患者睡眠结构的异常与认知障碍在发病和转归方面同步，可能是LGI-1 AE患者认知障碍的病因之一。睡眠障碍的病理起源可能为下丘脑。下丘脑分泌素和LIM同源框（lhx6）通路可能成为纠正睡眠结构同时治疗认知障碍的新靶点。

目的 分析在机器人辅助腹腔镜膀胱切除术患者应用低血压预测指数（HPI）进行术中血流动力学管理的经过，为同类型大手术的麻醉监测和血流动力学管理提供参考。 方法 回顾性分析1例采用HPI进行术中血流动力学管理的接受机器人辅助腹腔镜膀胱切除术患者的临床资料、术中血流动力学资料、血管活性药物用法用量和临床效果，并结合相关文献进行分析。 结果 患者，女性，72岁，因肉眼血尿5个月伴尿痛3个月入院。膀胱镜检查，膀胱三角区右侧可见7 cm×7 cm×5 cm肿物，近膀胱颈可见大小约4 cm×3 cm×3 cm肿物。正电子发射/计算机断层扫描（PET/CT）检查，膀胱右后壁增厚伴高代谢，初步诊断为膀胱恶性肿瘤。进行麻醉前评估后拟行机器人辅助腹腔镜膀胱切除术。患者入室后常规监测，同时采用搭载HPI软件的监护仪指导术中血流动力学管理。常规麻醉诱导后，使用可视喉镜进行气管插管。患者术中共发生低血压事件（IOH）6次，平均动脉压（MAP）<65 mmHg累计时间为13.7 min，占麻醉时长的4.4%，MAP<65 mmHg时间加权平均数为0.28 mmHg。HPI≥85的时间范围与MAP<65 mmHg大致重叠且包含后者。146个HPI≥85的时间点，68.5%（100/146）MAP>65 mmHg；47个MAP<65 mmHg的时间点，97.9%（46/47）均出现HPI≥85。患者术后第1天超敏肌钙蛋白I<0.01 μg·L^-1，未发生围术期不良事件，第8天顺利出院。 结论 HPI可及时并准确地预警机器人辅助腹腔镜膀胱切除术患者IOH的发生。术中使用基于HPI的低血压纠正策略可将患者MAP<65 mmHg的时间加权平均数维持在较低水平。

目的 研究长链非编码RNA（lncRNA） H19和胰岛素样生长因子2（IGF2）基因在乳腺癌组织中的表达水平，分析其印记状态。 方法 采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测乳腺癌组织及癌旁组织中H19和IGF2 mRNA表达水平，分析H19和IGF2 mRNA在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达差异，利用单核苷酸多态性（SNP）区分等位基因表达情况（纯合或杂合），基因组DNA中IGF2（ApaⅠ位点）或H19（AluⅠ位点）为杂合则进行印记分析，确定H19和IGF2在乳腺癌组织中的印记状态，即印记保持（MOI）或印记丢失（LOI）。分析乳腺癌组织中H19和IGF2表达与分子分型的关系。 结果 RT-qPCR法检测，乳腺癌组织中H19和IGF2 mRNA表达水平高于癌旁组织（P<0.01），H19 mRNA表达水平与IGF2 mRNA表达水平呈正相关关系（r=0.567，P<0.01）。不同分子分型乳腺癌患者癌组织中H19 mRNA表达水平均高于癌旁组织（P<0.05或P<0.01）。H19和IGF2在乳腺癌组织中均存在LOI，IGF2 的LOI发生率为36.7%，高于H19的LOI发生率（4.3%）。RT-qPCR法检测，IGF2 LOI组乳腺癌组织中IGF2 mRNA表达水平明显高于IGF2 MOI组（P<0.01）。 结论 乳腺癌组织中H19和IGF2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织，IGF2的LOI发生率高于H19的LOI发生率，IGF2的LOI可能是乳腺癌发病的关键因素之一。

目的 分析基因表达综合（GEO）数据库和癌症基因组图谱（TCGA）数据库中食管腺癌（EAC）基因表达数据，阐明EAC发病的潜在核心基因与肿瘤淋巴细胞浸润的关系，为EAC的诊断和治疗提供分子靶标。 方法 在GEO数据库检索“esophageal adenocarcinoma”，下载包括EAC和食管正常组织的高通量芯片数据集GSE13898、GSE26886、GSE74553和GSE92396。采用R软件的limma包筛选EAC组织和食管正常组织的差异表达基因（DEGs），并通过韦恩图获取共同DEGs，采用STRING数据库分析后导入Cytoscape软件筛选核心基因并构建蛋白-蛋白互作（PPI）网络，采用基因表达谱交互分析（GEPIA）数据库验证核心基因表达水平， 采用阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析门户（UALCAN）和Kaplan-Meier Plotter数据库分析核心基因与EAC患者预后和临床资料的关联性，采用肿瘤免疫评价资源（TIMER）数据库分析核心基因与肿瘤免疫浸润的关系，采用基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）对LinkedOmics数据库获得的核心基因中正相关表达基因进行功能和信号通路富集分析。 结果 对GEO获得的4个数据集的DEGs取交集，共获得340个DEGs，其中上调基因127个，下调基因213个。经STRING数据库和 Cytoscape 软件筛选后，最终获得评分最高的关键核心基因分泌型磷蛋白1（SPP1）和转化生长因子β1（TGFB1）。GEPIA数据库分析，与食管正常组织比较，癌组织中SPP1和TGFB1 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）；SPP1低表达组EAC患者1、3和5年总体生存期均高于SPP1高表达组（HR=10.1，P<0.05；HR=3.09，P<0.05；HR=2.32，P<0.05），TGFB1低表达组EAC患者5年总体生存期高于TGFB1高表达组（HR=2.36，P<0.05）。UALCAN数据库分析，与食管正常组织比较，Ⅱ-Ⅲ期及N1-N2期淋巴结转移的EAC患者癌组织中SPP1和TGFB1 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。TIMER分析，SPP1和TGFB1 mRNA表达水平与EAC患者癌组织中巨噬细胞（r=0.353，P<0.01；r=0.187，P<0.05）和树突状细胞（r=0.236，P<0.01；r=0.221，P<0.01）浸润呈正相关关系。GO功能和KEGG信号通路富集分析，SPP1和TGFB1及其排名前50位正相关基因主要参与细胞迁移、细胞活性和血管发育等生物学过程及肿瘤蛋白多糖、细胞外基质（ECM）-受体互作和磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）等信号通路。 结论 SPP1和TGFB1与EAC患者临床分期、淋巴结转移和总体生存期有密切关联。SPP1和TGFB1高表达可能导致巨噬细胞和树突状细胞浸润，从而改变肿瘤微环境。SPP1和TGFB1可能成为EAC诊断和治疗的新靶点。

目的 探讨小泛素样修饰特异性蛋白酶1（SENP-1）/低氧诱导因子1α（HIF-1α）通路对慢性间歇性低氧（CIH）诱导大鼠血管内皮损伤的影响，阐明其相关作用机制。 方法 SD大鼠随机分为对照组和CIH组，再将每组分为2、4和6周3个时间点亚组，每亚组8只。CIH组大鼠暴露于CIH舱中进行CIH诱导，制备阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）模型，对照组大鼠暴露于常氧环境中。于各时间点收集各组大鼠血清和胸主动脉组织。HE染色观察各组大鼠胸主动脉血管损伤情况，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）、血管性血友病因子（vWF）和血栓调节蛋白（TM）水平，Western blotting法检测各组大鼠胸主动脉组织中SENP-1、HIF-1α和血管内皮生长因子A（VEGFA）蛋白表达水平。体外培养大鼠主动脉内皮细胞（rAECs），经SENP-1 shRNA腺病毒（sh-SENP-1）感染构建SENP-1基因低表达的rAECs 细胞株，采用 CIH 诱导建立血管内皮细胞损伤模型，分为 CIH 组、CIH+sh-NC 组和 CIH+sh-SENP-1组，另设对照组。CCK-8检测各组细胞增殖活性，ELISA法检测各组细胞培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）活性及细胞中NO、ET-1、丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Western blotting法检测各组细胞中SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平。 结果 随着CIH诱导时间的延长，与对照组比较，CIH组大鼠胸主动脉内膜逐渐粗糙并明显增厚，血清中NO水平逐渐减低（P<0.05），血清中ET-1、vWF和TM水平及胸主动脉组织中SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平逐渐升高（P<0.05）。与对照组比较，CIH组细胞增殖活性降低（P<0.05），细胞培养上清中LDH活性及细胞中ET-1、MDA水平和细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞中NO水平和SOD活性降低（P<0.05），SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平升高（P<0.05）；与CIH组比较，CIH+sh-SENP-1组细胞增殖活性升高（P<0.05），细胞培养上清中LDH活性及细胞中ET-1、MDA水平和细胞凋亡率降低（P<0.05），细胞中NO水平和SOD活性升高（P<0.05），SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平降低（P<0.05）。 结论 SENP-1/HIF-α通路在CIH诱导的大鼠胸主动脉损伤组织中高度活化，沉默SENP-1表达可减轻CIH诱导的血管内皮细胞损伤，其作用机制可能与下调SENP-1/HIF-α通路活化水平有关。

目的 观察人骨髓间充质干细胞（hMSCs）条件培养基（CM）与人脂肪肉瘤SW872细胞共培养后对肿瘤细胞增殖和迁移能力的影响，探讨hMSCs CM对脂肪肉瘤细胞的作用及可能的作用机制。 方法 体外培养hMSCs，采用慢病毒方法分别转染慢病毒空载体shNS（对照组）和慢病毒shRNA Yes相关蛋白（YAP）（shYAP-hMSCs组），采用实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法和Western blotting 法检测各组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平，提取CM。体外培养SW872细胞，分为对照组（正常培养）、hMSCs CM组和shYAP-hMSCs CM组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率，Western blotting法检测各组细胞中YAP、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和细胞周期蛋白D1（cyclin D1）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较，shYAP-hMSCs组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.01），表明成功构建了shYAP-hMSCs稳定转染细胞株。CCK-8法，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞增殖活性升高（P<0.05），shYAP- hMSCs CM组SW872细胞增殖活性降低（P<0.01）；流式细胞术，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞凋亡率无明显变化（P>0.05），shYAP-hMSCs CM组SW872细胞凋亡率升高（P<0.01）；细胞划痕实验，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率升高（P<0.05），shYAP-hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率降低（P<0.01）；Western blotting法，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclin D1蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05），shYAP-hMSCs组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclin D1蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 hMSCs参与调控人脂肪肉瘤SW872细胞增殖和迁移，其机制可能与YAP表达有关。

目的 探讨肌源性分化蛋白1（Myod1）对氧糖剥夺（OGD）诱导的SH-SY5Y细胞增殖抑制和凋亡的影响，并阐明其作用机制。 方法 采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测正常对照组研究对象和缺血性脑梗死组患者外周血及正常培养的SH-SY5Y细胞（对照组）和OGD细胞模型（OGD组）细胞中Myod1和长链非编码RNA（lncRNA）小核仁RNA宿主基因15（SNHG15）mRNA表达水平。分别采用si-Myod1、pcDNA3.0-Myod1、si-SNHG15、pcDNA3.0-SNHG15、si-NC、空载质粒（Vector）、miR-NC和miR-24-3p模拟物（miR-mimics）质粒转染SH-SY5Y细胞后，进行OGD处理，将SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD组、OGD+Vector组、OGD+Myod1组、OGD+si-NC组、OGD+si-Myod1组、OGD+si-SNHG15组、OGD+si-SNHG15+Vector组、OGD+si-SNHG15+Myod1组、OGD+miR-NC组、OGD+miR-mimics组、OGD+miR-mimics+Vector组和OGD+miR-mimics+SNHG15组。采用CCK-8法检测各组细胞活性，采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EdU）染色法检测各组EdU阳性细胞率，采用原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测各组TUNEL阳性细胞率，采用Western blotting法检测各组细胞中裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（cleaved caspase-9）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。染色质免疫共沉淀（CHIP）法评估Myod1和SNHG15之间的关联。双荧光素酶报告基因实验评估Myod1与SNHG15及SNHG15与miR-24-3p的靶向关系。 结果 与正常对照组比较，缺血性脑梗死组患者外周血中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均升高（P<0.05）。与对照组比较，OGD组细胞中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）。与OGD组比较，48和72 h时OGD+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均降低（P<0.01），TUNEL阳性细胞率升高（P<0.01）；OGD+si-Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高（P<0.01），TUNEL阳性细胞率降低（P<0.01）。Myod1可与SNHG15的启动子序列结合。SNHG15可吸附miR-24-3p，Myod1与SNHG15及SNHG15与miR-24-3p存在靶关系。敲低SNHG15后，与OGD组比较，48和72 h时OGD+si-SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高（P<0.01），TUNEL阳性细胞率降低（P<0.01），细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平降低（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.01）；与OGD+si-SNHG15组比较，48和72 h时OGD+si-SNHG15+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率降低（P<0.05），TUNEL阳性细胞率升高（P<0.05），细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高（P<0.05），Bcl-2的蛋白表达水平降低（P<0.05）。过表达miR-24-3p和SNHG15后，与OGD组比较，48和72 h时OGD+miR-mimics组细胞活性和EdU阳性细胞率升高（P<0.01），TUNEL阳性细胞率降低（P<0.01），细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平降低（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.01）；与OGD+miR-mimics组比较，48和72 h时OGD+miR-mimics+SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率降低（P<0.05），TUNEL阳性细胞率升高（P<0.05），细胞中Bax、cleaved caspase-3 和 cleaved caspase-9 蛋白表达水平升高（P<0.05），Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05）。 结论 Myod1可通过与SNHG15启动子区结合进而吸附miRNA-24，促进OGD诱导的SH-SY5Y细胞的增殖抑制和细胞凋亡。

目的 分析外泌体（Exo）微小RNA-761（miR-761）通过调控肿瘤相关巨噬细胞（TAM）极化对骨肉瘤（OS）细胞上皮-间质转化（EMT）进程的影响，阐明其相关的作用机制。 方法 miR-761质粒和阴性对照（miR-NC）质粒分别转染至HEK239细胞中，同时设不转染的细胞为对照组，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测转染效果。分离含miR-761的Exo，采用透射电镜观察Exo形态，采用纳米颗粒分析仪检测Exo样品浓度和粒径分布，Western blotting法检测Exo表面标志蛋白表达情况。采用佛波酯（PMA）刺激人单核细胞白血病THP-1细胞成为M0巨噬细胞，采用含miR-761的Exo处理M0巨噬细胞并与OS MG63细胞建立共培养体系，实验分组为M0组、TAM组、miR-761 NC 组和miR-761 Exo 组，收集各组M0巨噬细胞，流式细胞术检测各组细胞中M1巨噬细胞标志物CD86和M2巨噬细胞标志物CD206阳性率，Western blotting法检测各组细胞中M1巨噬细胞分泌因子白细胞介素1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）和M2巨噬细胞分泌因子白细胞介素10（IL-10）及转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白表达水平；采用含miR-761的Exo处理M0巨噬细胞并与MG63细胞建立共培养体系，实验分为对照组、TAM组、miR-NC Exo+TAM组和miR-761 Exo+TAM组，收集各组MG63细胞，免疫荧光染色法观察各组MG63细胞中E-钙黏附蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）荧光强度，Western blotting法检测各组细胞中E-cadherin、Vimentin及EMT调控相关转录因子Twist1、Snail和Slug蛋白表达水平，Transwell小室实验检测各组MG63细胞中侵袭和迁移细胞数。 结果 通过转染实验成功获得含miR-761的HEK239细胞，并分离得到Exo。与M0组比较，TAM组巨噬细胞中CD86阳性率降低（P<0.05），CD206阳性率升高（P<0.05），IL-1β和TNF-α蛋白表达水平降低（P<0.05），IL-10和TGF-β1蛋白表达水平升高（P<0.05）；与TAM组比较，miR-761 Exo 组巨噬细胞中CD86阳性率升高（P<0.05），CD206阳性率降低（P<0.05），IL-1β和TNF-α蛋白表达水平升高（P<0.05），IL-10和TGF-β1蛋白表达水平降低（P<0.05）。与对照组比较，TAM组MG63细胞中E-cadherin荧光表达强度减弱而Vimentin荧光表达强度增强，E-cadherin蛋白表达水平降低（P<0.05），Vimentin、Twist1、Snail和Slug蛋白表达水平升高（P<0.05），迁移细胞数和侵袭细胞数增加（P<0.05）；与 TAM 组比较，miR-761 Exo+TAM 组 MG63 细胞中E-cadherin荧光表达强度增强而Vimentin荧光表达强度减弱，E-cadherin蛋白表达水平升高（P<0.05），Vimentin、Twist1、Snail和Slug蛋白表达水平降低（P<0.05），迁移细胞数和侵袭细胞数减少（P<0.05）。 结论 Exo传递miR-761能够抑制OS细胞EMT进程，进而抑制细胞的迁移和侵袭，其作用机制可能与调控TAM极化作用有关。

目的 利用网络药理学分析方法初步预测消斑通脉方抗动脉粥样硬化（AS）的潜在作用通路和靶点，联合体外细胞实验对其可能机制进行验证。 方法 采用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、GeneCards、Swiss Target Prediction和Uniprot等数据库，收集消斑通脉方中活性化合物及对应靶点信息，构建“成分-靶点-疾病”网络，通过蛋白-蛋白互作（PPI）网络预测可能的作用靶点和通路，对交集靶点进行基因本体论（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析。体外培养人主动脉血管平滑肌细胞（HA-VSMCs）并鉴定，采用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导HA-VSMCs异常增殖并进行鉴定。MTT法检测不同浓度消斑通脉方作用后各组 HA-VSMCs 增殖活性，确定消斑通脉方安全性。HA-VSMCs分为空白组、模型组（诱导HA-VSMCs异常增殖）、瑞舒伐他汀组（诱导HA-VSMCs异常增殖后采用4 μmol·L^-1瑞舒伐他汀干预）及低、中和高剂量消斑通脉方组（诱导HA-VSMCs异常增殖后分别采用0.025、0.050和0.100 mg·L^-1消斑通脉方干预）。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组HA-VSMCs培养上清中人单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素8（IL-8）水平，实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）法检测各组HA-VSMCs中核因子κB（NF- κB）p65 mRNA和成纤维细胞生长因子2（FGF2）mRNA表达水平，Western blotting 法检测各组HA-VSMCs中 NF- κB p65 和 FGF2 蛋白表达水平。 结果 消斑通脉方中含有103种活性成分，可通过作用于189个靶基因发挥抗AS作用，潜在作用靶点包括IL-6、IL-8、血管内皮生长因子A（VEGFA）、核因子κB1（NF-κB1）和RELA（NF-κB p65）等。GO功能分析和KEGG信号通路富集分析，消斑通脉方通过调节脂质、缺氧诱导因子1（HIF-1）、表皮生长因子（EGF）、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）和NF-κB等信号通路发挥抗AS作用。细胞形态表现和免疫荧光染色结果证明细胞为HA-VSMCs。油红O染色，可观察到大量红色脂滴，表明造模成功。MTT法检测，在一定剂量范围内消斑通脉方对HA-VSMCs增殖率无明显影响，安全性良好。ELISA 法检测，与模型组比较，瑞舒伐他汀组和不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs培养上清中MCP-1和IL-6水平降低（P<0.05或P<0.01），0.050和0.100 mg·L^-1消斑通脉方组HA-VSMC培养上清中IL-8降低（P<0.01）；与瑞舒伐他汀组比较，不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs培养上清中MCP-1降低（P<0.01），0.050和0.100 mg·L^-1消斑通脉方组HA-VSMCs培养上清中IL-8降低（P<0.01）。与模型组比较，瑞舒伐他汀组和不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65 mRNA表达水平降低（P<0.01），瑞舒伐他汀组及0.050和0.100 mg·L^-1消斑通脉方组HA-VSMCs中FGF2 mRNA表达水平降低（P<0.01）；与瑞舒伐他汀组比较，0.050和0.100 mg·L^-1消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65和FGF2 mRNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较，瑞舒伐他汀组和不同剂量消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65和FGF2蛋白表达水平降低（P<0.01）；与瑞舒伐他汀组比较，0.050和0.100 mg·L^-1消斑通脉方组HA-VSMCs中NF-κB p65蛋白表达水平降低（P<0.01），0.100 mg·L^-1消斑通脉方组HA-VSMCs中FGF2蛋白表达水平降低（P<0.01）。 结论 消斑通脉方具有抗炎、抑制HA-VSMCs增殖和抗AS作用，其作用机制可能与NF-κB/FGF2通路失活有关。