目的：探讨扶正软坚抗癌方调控蛋白激酶B （Akt）/鼠双微体2 （MDM2）/P53信号通路对肝癌HepG2细胞恶性生物学行为的影响。方法：采用0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60、3.20和6.40 g·mL^-1扶正软坚抗癌方分别处理HepG2细胞48 h,CCK-8法检测HepG2细胞存活率，筛选扶正软坚抗癌方浓度用于后续实验。将HepG2细胞分为对照组、低剂量扶正软坚抗癌方组(0.2 g·mL^-1)、中剂量扶正软坚抗癌方组(0.4 g·mL^-1)、高剂量扶正软坚抗癌方组(0.8 g·mL^-1)、SC79组(8 mg·L^-1 SC79)和高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组(0.8 g·mL^-1扶正软坚抗癌方+8 mg·L^-1 SC79)。CCK-8法检测各组HepG2细胞增殖活性，克隆形成实验检测各组HepG2细胞克隆形成率，流式细胞术检测各组HepG2细胞凋亡率，Transwell小室实验检测各组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数，Western blotting法检测各组HepG2细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3 （Caspase-3）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、磷酸化Akt （p-Akt）、磷酸化MDM2（p-MDM2）和P53蛋白表达水平。结果：随着扶正软坚抗癌方浓度(0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、 1.60、 3.20和6.40 g·mL^-1)的升高，HepG2细胞存活率逐渐降低（P<0.05），选取0.2、0.4和0.8 g·mL^-1扶正软坚抗癌方用于后续实验。CCK-8法检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞增殖活性均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞增殖活性明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞增殖活性明显升高（P<0.05）。克隆形成实验检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞克隆形成率均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞克隆形成率明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞克隆形成率明显升高（P<0.05）。流式细胞术检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞凋亡率均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。Transwell小室实验检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性，SC79组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数均明显升高（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞迁移和侵袭细胞数均明显升高（P<0.05）。Western blotting法检测，与对照组比较，低、中和高剂量扶正软坚抗癌方组HepG2细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-MDM2蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），并呈剂量依赖性；Caspase-3和P53蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），并呈剂量依赖性；SC79组HepG2细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-MDM2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）, Caspase-3和P53蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）；与高剂量扶正软坚抗癌方组比较，高剂量扶正软坚抗癌方+SC79组HepG2细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-MDM2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,Caspase-3和P53蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。结论：扶正软坚抗癌方抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡，其作用机制与抑制Akt/MDM2信号通路、上调P53蛋白表达有关。