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2023年, 第40卷, 第02期　
刊出日期：2023-02-28
  

  • 全选
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  • CRISPR/Cas9联合Cre-Loxp系统建立VASN条件敲除的小鼠肝细胞系
    甘暨, 杨丽超, 张起, 孙俊铭, 张俊, 何敏
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 173-181. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.001
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    目的：利用CRISPR/Cas9技术联合Cre-Loxp系统的条件性敲除策略构建VASN基因敲除的AML12小鼠肝细胞株。方法：在VASN基因第二外显子上下游设计靶点并合成gRNA序列，构建2个CRISPR/Cas9重组载体；设计构建VASN上下游分别带有Loxp序列和旁侧同源序列的供体载体donor DNA质粒；将3个质粒共转染至小鼠肝细胞AML12中，分离单克隆，提取基因组DNA，经PCR及测序鉴定获得稳定敲入Loxp序列的单克隆细胞株AML12-Loxp；将pALB-Cre质粒转染至AML12-Loxp，筛选建立敲除VASN基因的细胞系。结果：成功构建2个靶向敲除VASN基因的pX459-gRNA-VASN-1和pX459-gRNAVASN-2重组载体及一个供体载体；转染药筛后获得12个单细胞克隆，经测序，5个单克隆细胞实现VASN基因上下游精确敲入Loxp序列；同源重组敲入效率为41.6%;p ALB-Cre质粒转染后获得20个单细胞克隆，经PCR和测序获得12个VASN基因敲除的单克隆细胞，敲除效率为60%。结论：利用CRISPR/Cas9技术联合Cre-Loxp系统成功构建了VASN基因敲除的AML12细胞，为后续体外研究VASN在肝细胞中的功能及在动物体内实现VASN的条件性敲除奠定了分子基础。
  • 拟黑多刺蚁活性成分对LPS诱导小鼠炎性骨丢失的作用
    冯晓靓, 韦桂宁, 刘志娟, 高一洁, 周蕊, 宋方茗
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 182-188. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.002
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    目的：研究拟黑多刺蚁活性成分（AFPR）对脂多糖（LPS）诱导小鼠炎性骨丢失的作用。方法：取24只雄性C57BL/6J小鼠，每组6只，随机分为假手术组、模型组（AFPR 0 g/kg）、AFPR给药组（4 g/kg、8 g/kg）；第1天和第4天分别给予腹腔注射LPS溶液（5 mg/kg），饲养7 d后建立小鼠炎性骨丢失模型；利用Micro-CT扫描及苏木精—伊红（HE）染色分析法分析胫骨骨组织形态学及相关参数变化情况，抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAcP）染色分析小鼠胫骨骨组织破骨细胞数量的变化情况，活化T细胞核因子（NFATc1）与组织蛋白酶K(CTSK)染色分析破骨细胞活性的变化情况，并进一步采用HE染色观察小鼠体内肝肾组织的变化情况；此外，体外实验通过TRAcP染色实验探究AFPR对破骨细胞分化的作用，利用碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红（ARD）染色探究AFPR对成骨细胞活性的影响。结果：与sham组相比，AFPR 0 g/kg组胫骨骨小梁明显受到破坏，破骨细胞数目明显增多（P<0.001），且破骨特异性因子NFATc1与CTSK的表达上调。与AFPR 0 g/kg组相比，不同剂量AFPR可有效增加小鼠骨组织中骨小梁厚度与数量，并且还能够抑制破骨细胞活性及其特异性因子的表达水平（P<0.001），并呈剂量依赖性；在体外实验中，与AFPR 0μg/mL组相比，AFPR能够有效抑制破骨细胞分化；但AFPR对成骨细胞的活性没有影响。结论：AFPR对LPS诱导小鼠全身炎性骨丢失具有一定的保护作用，并且可能与抑制破骨细胞活性有关。
  • KIF2C在肝细胞癌中的作用及ceRNA调控网络构建
    卢春苗, 莫书天, 韩创业, 庞锦树, 杨子叶, 韩箫, 农莹丹, 唐立博, 赵殊琪, 陈镁沣, 罗小玲
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 189-198. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.003
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    目的：分析驱动蛋白家族成员2C(KIF2C)在肝细胞癌（HCC）中的表达及意义；探索竞争内源性RNA(ceRNA)网络在HCC发展中的潜在作用。方法：利用肿瘤芯片数据库（Oncomine）、肿瘤基因组图谱（TCGA）和基因表达谱交互分析（GEPIA）数据库分析KIF2C在HCC中的表达，及其与HCC的总生存期（OS）、无病生存期（DFS）及病理分级等临床参数的关系；通过RT-qPCR实验分析KIF2C在HCC组织和配对的癌旁组织中的表达；通过细胞功能实验分析干预KIF2C表达对HCC细胞增殖、侵袭与迁移的影响；利用STRING和GeneMANIA数据库探索与KIF2C互作的蛋白和基因；使用高通量测序，寻找log2|FC|>1条件下的差异基因，并进行GO与KEGG富集分析，探索KIF2C潜在的作用通路；通过共表达分析，筛选互作的RNA后构建ceRNA调控网络。结果：KIF2C在HCC中显著高表达（P<0.001）;KIF2C表达水平影响HCC患者的生存预后及病理分级（P<0.05）；细胞功能实验表明KIF2C过表达促进HCC细胞的增殖、侵袭与迁移（P<0.05）；有10个蛋白参与KIF2C的蛋白互作；共有20个基因参与KIF2C的基因互作；筛选出3 754个长非编码RNA、7 621个差异表达信使RNA和170个差异表达微小RNA;GO与KEGG富集分析显示，相关差异基因参与细胞外囊泡、质膜固有成分等功能，且显著富集于p53信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路；最后，12个lncRNA和5个miRNA构成了一个ceRNA网络，其中has-miR-181b-5p是关键的miRNA。结论：KIF2C在HCC中显著高表达且提示预后不良，KIF2C过表达促进HCC细胞的增殖、侵袭和迁移活动；获得与KIF2C相关的ceRNA调控网络，其在HCC中发挥重要作用。
  • 2012—2022年广西HIV-1独特重组型毒株近似全长基因序列特征分析
    李媛婷, 陈荣凤, 严文霞, 廖艳研, 叶力, 蒋俊俊, 梁丽娟, 黄耀锋, 秦英梅, 黎彦君, 梁浩
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 199-205. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.004
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    目的：研究广西HIV-1独特重组型毒株（URFs）的基因重组特点，为广西HIV-1疫情防控提供科学依据。方法：对1例pol区基因序列初步判断为URF的HIV-1感染者的血液样本进行RNA提取、巢式PCR扩增全长基因并测序，从PubMed等数据库检索2012—2022年发表的有关广西URFs近似全长基因组的文章及对应的序列，构建系统进化树，并进行重组模式、断点分析和耐药突变位点分析。结果：测序获得1例长度约8.9 kb的URF，该URF是以CRF08＿BC为骨架插入CRF01＿AE片段构成的二代重组毒株。将该URF与数据库中检索到的12例广西URFs共同分析，发现广西URFs主要来源于性传播途径感染者和静脉吸毒感染者。所有URFs均包含CRF01＿AE片段，以01＿AE/07＿BC重组比例最高（69.2%,9/13）,1例URF含有主要耐药位点。结论：广西已鉴定的URFs数量较少，以01＿AE/07＿BC重组为主，应加强对URFs的监测和鉴定，以全面了解广西HIV-1重组毒株的特点。
  • 过表达LRRFIP1对肝癌细胞Huh7生物学行为的影响
    宋萨, 许悦欢, 张瑶尧, 吴莹莹, 艾明凤, 谢嘉琳, 邱藓婷, 李奕宝, 周素芳, 晁耐霞
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 206-213. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.005
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    目的：探讨LRRFIP1表达上调对肝癌细胞Huh7的生物学行为影响，并初步探索其相关机制。方法：构建LRRFIP1过表达的稳定细胞株，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）和蛋白免疫印迹法（western blotting）检测过表达效率，细胞增殖实验（CCK-8）检测过表达LRRFIP11对Huh7细胞增殖能力的影响；平板克隆形成实验检测过表达LRRFIP1对Huh7细胞克隆形成能力的影响；流式细胞术检测过表达LRRFIP1对Huh7细胞周期和凋亡的影响；划痕实验和Transwell实验检测过表达LRRFIP1对细胞迁移和侵袭能力的影响；检测与上皮间质转化（EMT）相关的蛋白E-cadherin、N-cadherin,Vimentin和Snail的表达；免疫共沉淀和蛋白质谱技术串联（CoIP-MS）法筛选可能与LRRFIP1互作蛋白。结果：过表达LRRFIP1促进了Huh7细胞的增殖（P<0.001）和克隆形成能力（P<0.001），抑制了细胞凋亡（P<0.01）；过表达LRRFIP1导致Huh7细胞G0/G1期比例减少，S期增加（P<0.001,P<0.01）。此外，过表达LRRFIP1组细胞的迁移（P<0.05）和侵袭（P<0.001）数量显著低于对照组；western blotting实验结果显示，与对照组相比，过表达LRRFIP1组细胞上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达显著升高（P<0.001），间充质细胞标志蛋白N-cadherin和Vimentin表达显著减低（P<0.001,P<0.01）,EMT相关转录因子Snail蛋白表达显著降低（P<0.001）。最后，过表达LRRFIP1后我们采用CoIP-MS法筛选出80个可能与其互作蛋白，GO分析显示Huh7细胞株中下拉LRRFIP结合蛋白富集于27个生物过程、11个细胞组分和9种分子功能。KEGG通路注释显示这80种蛋白主要富集于ECM-受体相互作用信号通路；STRING和Cytoscape分析Hub基因。结论：LRRFIP1过表达促进了肝癌细胞Huh7的增殖和克隆形成能力，抑制其凋亡、迁移、侵袭能力；LRRFIP1可能与eEF1A1相互作用，从而影响肝癌的发生发展。
  • 脂质代谢相关基因在慢性阻塞性肺疾病中的鉴定与验证
    梁彩霞, 周广, 周舟, 钟小宁, 梁毅
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 214-220. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.006
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    目的：研究脂质代谢相关基因在慢性阻塞性肺疾病（COPD）中的表达，探讨脂质代谢关键基因在COPD中的可能机制。方法：从GEO和GeneCards数据库中获取数据，通过GO富集和PPI网络分析，筛选出差异表达的脂质代谢基因。香烟暴露24W建立肺气肿小鼠模型，HE染色观察小鼠肺组织病理学改变；使用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测小鼠肺组织中脂质代谢关键基因的m RNA相对表达水平；用香烟烟雾提取物干预正常人来源的肺上皮细胞系BEAS-2B，通过细胞增殖实验（CCK-8）法测定香烟烟雾提取物干预浓度，RT-qPCR测定BEAS-2B细胞中脂质代谢关键基因的相对表达量。结果：基于GEO和GeneCards数据库，筛选出5个脂质代谢关键基因（PIK3CA、PRKAG2、GNB3、PLCB2、GLA），发现PIK3CA和PRKAG2基因在吸烟相关COPD中的小气道上皮细胞中高表达，而GNB3、PLCB2和GLA基因的表达下调。成功构建的肺气肿小鼠模型，与野生型对照组比较，小鼠肺组织中PIK3CA和PRKAG2基因的mRNA表达增加（P<0.001），而GNB3、PLCB2和GLA基因的mRNA表达下调（P<0.001），与香烟烟雾提取物干预的BEAS-2B细胞中基因表达情况一致。结论：脂质代谢关键基因PIK3CA、PRKAG2、GNB3、PLCB2、GLA参与了COPD的发生发展，可能是识别吸烟相关COPD的潜在生物标志物。
  • 羧基化聚酰胺——胺/无定形磷酸钙镁诱导胶原纤维再矿化的研究
    严凯琦, 黄晓熳, 黄婧娴, 谢方方
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 221-227. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.007
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    目的：制备并表征羧基化聚酰胺—胺稳定的无定形磷酸钙镁纳米复合体（PAMAM-COOH/ACMP），并初步验证其诱导人牙本质胶原纤维再矿化的能力。方法：在水溶液中制备PAMAM-COOH/ACMP并分别使用傅里叶变换红外光谱（FTIR）、透射电子显微镜（TEM），选区电子衍射（SAED），能谱面扫描（EDX-Mapping）进行表征，依次获得化学结构、形貌、物相及元素分布信息。在仿生条件下，利用PAMAM-COOH/ACMP诱导完全脱矿的人牙本质胶原纤维模型再矿化，对牙本质进行FTIR、X射线衍射（XRD）及扫描电子显微镜（SEM）检测以评价再矿化效果。结果：FTIR检测结果提示，PAMAM-COOH/ACMP中存在磷酸根基团，碳氮键和酰胺键。TEM、EDX-Mapping及SEAD结果显示，PAMAM-COOH/ACMP为直径60～90 nm的近似圆形纳米非晶相颗粒，钙磷镁元素集中分布于颗粒中。SEM结果显示，牙本质表面未见大块沉积矿物，但高倍镜下可见5 mg/mL和10 mg/mL PAMAM-COOH/ACMP处理组的胶原纤维被连续矿物包裹并使纤维间隙减小。根据XRD与FTIR的检测结果，发现这些新生成的矿物为磷酸钙沉积。结论：成功制备了新型纳米材料PAMAM-COOH/ACMP纳米复合体，该纳米复合体在室温条件下尺寸稳定性佳，具有精确诱导人牙本质胶原纤维再矿化的能力。
  • 小球藻多糖对人树突状细胞成熟的作用和机制研究
    梁镕伊, 袁清霞, 赵龙岩, 张丽峰, 肖健
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 228-235. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.008
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    目的：探讨小球藻多糖（PFC）对人树突状细胞（DC）的成熟作用及其相关机制的初步研究。方法：使用纯化后的PFC对外周血单核细胞来源的不成熟DC进行干预，使用流式细胞术检测PFC干预后DC表面CD83和CD86表达变化，利用酶联免疫法（ELISA）检测细胞因子IL-6、TNF-α和IL-10水平的变化；继而通过比较PFC处理组和对照组的转录谱基因表达差异及通路富集分析，寻找其作用途径，并使用相关分子通路抑制剂进行初步验证。结果：PFC可上调DC表面CD83和CD86的表达，促进DC细胞因子IL-10的释放；生信分析结果提示PFC可能通过Toll样受体2/4(TLR2/4)发挥作用，利用TLR2和TLR4通路抑制剂下调了PFC诱导的DC CD86表达。其中TLR4抑制剂干预后CD86表达水平显著下降（P<0.05）。结论：PFC可能通过TLR2和TLR4通路上调人外周血单核细胞来源DC表面标志物CD83和CD86表达水平的提高，从而促进DC成熟。
  • EGCG-exosomes通过miR-30a/Beclin-1轴抑制自噬减轻心肌缺血/再灌注损伤
    张宁, 甘晓雯, 陈玲琳, 喻秋婷, 李海琦, 李玉雪, 简洁
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 236-244. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.009
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    目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）预处理心肌细胞分泌的外泌体（exosomes）对心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的作用及分子机制。方法：体外培养H9c2心肌细胞，给予或不给予EGCG预处理，建立缺氧/复氧模型。提取、纯化外泌体，采用在体基因干扰或基因敲除技术，构建antagomiR-30a和Beclin-1+/-小鼠，建立I/R模型，缺血30 min心肌注射外泌体，研究EGCG预处理心肌细胞分泌的exosomes(EGCG-exosomes)对I/R的作用。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-30a与Beclin-1的相互作用，TTC染色法检测心肌梗死面积，苏木精—伊红（HE）染色观察心肌细胞形态变化；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清心肌肌钙蛋I(cTnI)含量；透射电子显微镜观察自噬小体数量；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）、蛋白印迹法（western blotting法）检测miR-30a与自噬相关基因和蛋白的表达。结果：与I/R组相比，exosomes组自噬体数量减少，心肌损伤减轻。与exosomes组相比，EGCG-exosomes组心肌梗死面积缩小，cTnI含量降低，自噬体数量减少，Beclin-1和LC3-Ⅱ基因及蛋白表达下调，cathepsin D蛋白表达下调，p62基因及蛋白表达上调；沉默miR-30a促进心肌I/R自噬发生，给予EGCGexosomes则逆转上述作用；此外，敲低Beclin-1与EGCG-exosomes有协同抑制自噬作用（均P<0.05）。结论：EGCG-exosomes通过miR-30a/Beclin-1轴抑制自噬，减轻心肌I/R损伤。
  • ABCC4基因表达对前列腺癌免疫微环境的影响
    张清元, 刘敏, 陆江婷, 袁宗泽, 苑佳兴, 庞福智, 廖金玲, 陈阳
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 245-253. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.010
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    目的：探究ATP结合盒亚家族C成员4(ABCC4)基因在前列腺癌（PCa）中的表达，分析ABCC4对PCa肿瘤免疫微环境（TME）的影响。方法：使用GEO数据库中的GEO2R计算PCa与癌旁组织的差异表达基因。通过GEPIA2数据库探究ABCC4基因在PCa中的表达。将从UCSC Xena数据库下载的TCGA中的PCa数据分为ABCC4基因高、低表达组。使用clusterprofafiler R包进行GO分析和基因集富集分析（GSEA）。利用TISIDB数据库、ESTIMATE和CIBERSORT分析ABCC4基因表达与免疫指标的相关性。结果：PCa组织中ABCC4基因表达高于癌旁组织（P<0.05）。ABCC4高表达组PCa患者生存能力较差。在GSEA中，ABCC4低表达组中Th1和Th2细胞分化通路被激活，ABCC4基因可能在PCa的TME中起作用。TISIDB分析证实ABCC4基因表达与NK和T细胞丰度呈负相关关系（P<0.05）。ABCC4基因高表达与免疫检查点基因低表达有关。ESTIMATE和CIBERSORT分析表明，ABCC4基因表达可抑制PCa的免疫细胞浸润，尤其CD8 T、NK和Tregs细胞。免疫荧光实验显示，ABCC4蛋白表达低可诱导更多的CD8 T细胞浸润（P<0.05）。结论：ABCC4基因调控PCa的TME的免疫细胞浸润，尤其对T细胞和NK细胞浸润有重要作用，从而影响PCa的发生及其免疫治疗。
  • 二甲双胍对妊娠期糖尿病大鼠MEK/ERK通路及心肌凋亡的影响
    邢少宁, 符爱贞, 程虹, 周娃娃, 林和先
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 254-261. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.011
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    目的：研究二甲双胍对妊娠期糖尿病大鼠MEK/ERK通路及心肌凋亡的影响。方法：构建妊娠期糖尿病大鼠模型。将实验大鼠分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍处理组，每组12只。二甲双胍处理组大鼠每日腹腔注射70 mg/kg的二甲双胍。采用ELISA试验、苏木精—伊红染色法（HE染色）、Tunel、实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）、蛋白印迹法（western blotting）法及超声心动图分别检测各组大鼠的血清中血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白（c TnI）、肌酸激酶心型同工酶（CKMB）含量水平、心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二酫（MDA）及一氧化氮（NO）水平、心肌组织凋亡水平、凋亡相关基因和蛋白、心脏功能、心肌形态学及二甲双胍对大鼠MEK/ERK通路的影响。结果：与正常对照组相比，模型对照组大鼠血清中LDH、c TnI、CK-MB含量显著上升（P<0.05）。与模型对照组相比，二甲双胍处理组血清中LDH、c TnI、CK-MB含量显著降低（P<0.05）；二甲双胍显著改善了大鼠心肌形态学，降低了炎症细胞浸润，改善了心肌细胞变性、水肿；与正常对照组相比，模型对照组大鼠心肌组织中凋亡细胞数量显著上升。与模型对照组相比，二甲双胍处理组大鼠心肌组织中凋亡细胞数量显著降低；与正常对照组相比，模型对照组大鼠心肌组织中Bax/Bcl2、active-caspase 3及active-caspase 9水平显著上升（P<0.05）。与模型对照组相比，二甲双胍处理组大鼠心肌组织中Bax/Bcl2、active-caspase 3及active-caspase 9水平显著降低（P<0.05）；超声心动图结果表明二甲双胍显著改善了大鼠心脏功能；与正常对照组相比，模型对照组大鼠心肌组织中p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2、SIRT1蛋白相对表达量显著降低（P<0.05）。与模型对照组相比，二甲双胍处理组大鼠心肌组织中p-MEK/MEK、pERK1/2/ERK1/2蛋白相对表达量显著上升（P<0.05）；与正常对照组相比，大鼠心肌组织中SOD、NO水平显著降低，而MDA水平显著上升（P<0.05）。与模型对照组相比，二甲双胍显著提高大鼠心肌组织中SOD、NO水平（P<0.05），显著降低MDA含量（P<0.05）。结论：二甲双胍能显著抑制妊娠期糖尿病诱导心肌损伤，其机制可能与激活MEK/ERK信号通路有关。
  • 乳果糖调控NOX4/NLRP3通路对类风湿性关节炎大鼠的保护作用
    冷冬月, 方兴刚, 李旭峰
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 262-267. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.012
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    目的：探讨乳果糖调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/核苷酸结合域样受体蛋白3(NLRP3)通路对类风湿性关节炎（RA）大鼠的保护作用。方法：将50只大鼠随机分为对照组、RA组、乳果糖（0.25 g/kg）组、乳果糖+NOX4抑制剂GKT137831(10 mg/kg)组、甲氨蝶呤（0.35 mg/kg）组，每组10只。除对照组外，其余各组大鼠通过尾根处皮内注射胶原乳液建立RA大鼠模型。造模完成后各组灌胃给予相应药物处理。灌胃结束次日进行关节炎评分，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测到大鼠粪便肠道菌群所占比例，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。苏木精—伊红（HE）染色观察踝关节组织病理学变化。蛋白印迹（western blotting）法检测NOX4、NLRP3蛋白表达。结果：与对照组相比，RA组大鼠出现炎性浸润、少量纤维蛋白沉积以及滑膜出血等病理现象，粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著降低，而放线菌所占比例、平均关节炎评分，血清TNF-α、IL-6水平及关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达水平显著升高（均P<0.05）。与RA组相比，乳果糖组、甲氨蝶呤组病理现象得到改善，大鼠粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著增高，放线菌所占比例、平均关节炎评分，血清中TNF-α、IL-6水平，关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达显著降低（均P<0.05）。乳果糖组与甲氨蝶呤组上述指标比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。与乳果糖组相比，乳果糖+GKT137831组病理损伤得到进一步改善，大鼠粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著增高，放线菌所占比例、平均关节炎评分，血清中TNF-α、IL-6水平，关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达水平显著降低（均P<0.05）。结论：乳果糖可减轻RA大鼠炎性反应，其机制可能与抑制NOX4/NLRP3通路有关。
  • LncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-519e-5p对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响
    李轶, 王程阳, 刘顺帆, 杨贤, 高雨焦, 马磊
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 268-274. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.013
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    目的：探讨lncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-519e-5p对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响。方法：体外培养U-CH1细胞，将ZFPM2-AS1的小干扰RNA以及miR-519e-5p的模拟物分别转入U-CH1细胞中，并随机分组：si-NC组、si-ZFPM2-AS1组、miR-NC组、miR-519e-5p组、si-ZFPM2-AS1+anti-miR-NC组、si-ZFPM2-AS1+anti-miR-519e-5p组；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测U-CH1细胞中lncRNA ZFPM2-AS1与miR-519e-5p表达量；MTT、流式细胞术、划痕实验、Transwell实验分别检测U-CH1细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭；双荧光素酶报告实验检测lncRNA ZFPM2-AS1与miR-519e-5p的靶向调控关系；蛋白印迹（western blotting）法分析蛋白E-cadherin、N-cadherin表达。结果：与si-NC组、miR-NC组比较，si-ZFPM2-AS1组、miR-519e-5p组细胞活力、划痕愈合率、侵袭细胞数及蛋白N-cadherin水平下降，凋亡率、E-cadherin水平增高（P<0.05）;lncRNA ZFPM2-AS1可负向调控miR-519e-5p表达；si-ZFPM2-AS1+anti-miR-519e-5p组与si-ZFPM2-AS1+anti-miR-NC组比较，细胞活力、划痕愈合率、侵袭细胞数及蛋白N-cadherin水平增高，凋亡率、E-cadherin水平下降（P<0.05）。结论：下调lncRNA ZFPM2-AS1可促进U-CH1细胞凋亡并阻滞增殖、迁移、侵袭，其机制与上调miR-519e-5p表达有关。
  • 成人原发性膜性肾病伴乙肝病毒感染的临床特点及预后分析
    黄海峰, 杨佳青, 张丽娥, 经嘉俊, 胡秋华, 谭黎娜, 王明军
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 275-281. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.014
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    目的：探讨成人原发性膜性肾病原发性膜性肾病（PMN）伴乙肝病毒（HBV）感染的临床特点及预后。方法：回顾性分析2015年1月至2020年10月在广西医科大学第一附属医院肾内科住院治疗并经肾活检确诊的成人PMN患者临床资料，比较伴或不伴HBV感染的PMN患者的临床特点，运用Kaplan-Meier生存分析和COX回归分析比较两组患者的预后。结果：共纳入PMN患者88例，其中伴HBV感染（PMN-HBV组）49例，不伴HBV感染（PMN组）39例；PMN-HBV组谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、24 h尿蛋白水平高于PMN组（P<0.05），而补体C3、C4水平低于PMN组（P<0.05）。两组间在其他临床指标及药物使用上差异均无统计学意义（P>0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，PMN组临床缓解率高于PMN-HBV组（Log-rank χ2=5.124, P=0.024）。多因素COX回归分析显示，合并HBV感染是影响PMN临床缓解的影响因素（HR=0.049,95%CI=0.214～0.899,P=0.024）。结论：伴HBV感染是影响成人PMN患者临床缓解的影响因素，伴HBV感染的成人PMN患者预后较差。
  • 血清miR-30a-5p通过靶向FOXD1对膝骨关节炎发展的影响
    张丹龙, 梁少博, 魏巍, 庄岩, 张堃
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 282-287. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.015
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    目的：探讨膝骨关节炎（KOA）患者血清miR-30a-5p水平变化及其临床意义。方法：收集2019年1月至2022年1月西安交通大学医学院附属红会医院创伤骨科收治的253例KOA活动期患者（KOA组）和209例非KOA志愿者（对照组）的临床资料进行前瞻性分析。其中20例KOA患者接受全膝关节置换，25例对照组采用选择性膝关节镜探查清理术获取滑膜组织。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测血清和滑液miR-30a-5p水平；采用western blotting法检测滑膜组织叉头框D1(FOXD1)蛋白表达。通过Spearman相关分析评估miR-30a-5p与Kellgren-Lawrence(K-L)分级、西安大略大学和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）、膝关节疼痛数字等级评定量表（NRS）评分以及炎症指标的相关性。结果：KOA组血清miR-30a-5p水平显著高于对照组[2.32(1.92～3.20)vs. 1.08(0.82～1.48),Z=-12.663,P<0.001]；受试者工作特征曲线（ROC）分析的灵敏度和特异性分别为83.80%和78.0%;KOA患者血清miR-30a-5p水平与WOMAC评分、膝关节疼痛NRS评分以及白细胞计数（WBC）、红细胞沉降率（ESR）、C-反应蛋白（CRP）均呈正相关关系（P<0.05）。78例首次诊断KOA患者治疗4周后血清miR-30a-5p水平较基线值显著降低（P<0.001）。另外20例KOA患者滑膜组织中FOXD1蛋白表达较对照组下调（P<0.001），且血清miR-30a-5p水平与滑膜组织中FOXD1蛋白表达呈负相关关系（P<0.001），与滑液中miR-30a-5p水平呈正相关关系（P<0.001）。结论：血清miR-30a-5p水平的升高可能通过抑制FOXD1促进KOA的进展，血清miR-30a-5p可能成为KOA诊断和评估的潜在指标。
  • 外周血TLR2、PRF及GrzB在儿童嗜血细胞综合征中的表达及其与预后的关系
    孔楠, 侯瑶, 吴雄, 田阳阳, 徐鸣浩, 刘红林
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 288-292. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.016
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    目的：探讨外周血Toll样受体2(TLR2)、NK细胞表面穿孔素（PRF）及颗粒酶B(GrzB)在儿童嗜血细胞综合征中的表达及与预后关系。方法：选取2019年1月至2021年1月昆明市儿童医院收治的79例嗜血细胞综合征儿童作为观察组，另纳入79例同龄体检健康儿童作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法测定外周血TLR2基因表达量，流式细胞仪测定NK细胞表面PRF、GrzB阳性细胞率。受试者工作特征曲线（ROC）分析TLR2、PRF及GrzB的诊断效能，观察组接受为期6个月的随访，比较死亡组与存活组外周血TLR2水平及NK细胞表面PRF、GrzB阳性细胞率，Logistic回归法分析TLR2、PRF及GrzB三者交互作用对儿童嗜血细胞综合征预后的影响。结果：观察组外周血TLR2表达水平高于对照组，NK细胞表面PRF、GrzB阳性细胞率低于对照组（P<0.05）；外周血TLR2表达水平及NK细胞表面PRF、GrzB联合诊断儿童嗜血细胞综合征价值明显优于单一诊断；死亡组外周血TLR2表达水平高于存活组，NK细胞表面PRF、GrzB阳性细胞率低于存活组（P<0.05）；低TLR2与高NK细胞表面PRF、GrzB存在交互作用（P<0.05）。结论：外周血TLR2表达及NK细胞表面PRF、GrzB阳性细胞率联合检测有助于提高儿童嗜血细胞综合征的诊断效能，且与患儿预后存在交互作用，有助于早期发现和治疗。
  • 超声造影在特殊部位肝癌消融治疗中的价值研究
    杨立娟, 覃敏培, 杨宏志, 苏海庆, 李业钊, 廖海珍
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 293-296. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.017
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    目的：探讨超声造影（CEUS）在特殊部位肝癌（HCC）消融治疗中的价值。方法：回顾特殊部位HCC患者81例，治疗前、后均行CEUS，根据治疗方法分为联合治疗组[微波消融（MWA）+无水乙醇注射（PEI）]45例和单纯MWA组36例，术后1个月评估疗效并观察有无并发症。结果：瘤体治疗前、后径线比较差异有统计学意义（P<0.05）;CEUS评估疗效准确率为97.5%(79/81)，增强CT(CECT)为96.3%(78/81)，两种影像学方法准确率比较差异无统计学意义（P>0.05）；联合治疗组完全消融率为95.6%(43/45)，单纯MWA组完全消融率为86.1%(31/36)，两组疗效比较差异有统计学意义（P<0.05）；完全消融患者和不完全消融患者，治疗前、后甲胎蛋白（AFP）值比较差异均有统计学意义（P<0.05）；术后两组患者并发症发生率比较差异无统计学意义（P>0.05），均未出现严重并发症。结论：MWA联合PEI的综合治疗对特殊部位HCC有很好的临床疗效，CEUS和CECT在疗效评估方面有很好的一致性。
  • 体外循环心脏瓣膜置换术后谵妄的危险因素及其交互效应
    雷涛, 刘松涛, 沈斌
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 297-303. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.018
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    目的：探讨体外循环心脏瓣膜置换术患者术后发生谵妄的危险因素及其交互效应。方法：选取2019年1月至2022年6月在广西壮族自治区人民医院心胸血管外科行体外循环心脏瓣膜置换术的358例患者，分为谵妄组（n=92）和非谵妄组（n=266）。采用Logistic回归分析法分析患者术后发生谵妄的危险因素。采用多因子降维法（MDR）分析危险因素之间的相互作用。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，评估模型的灵敏度和特异度。结果：两组在年龄、糖尿病、术后使用镇静药物、机械通气时间、体外循环时间、阻断时间等方面比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。术后使用镇静药物、糖尿病、体外循环时间三者之间存在显著交互效应（P<0.05）。加入交互效应的回归模型ROC曲线下面积（AUC）为0.859(95%CI:0.815～0.903)，最佳截断值为0.267，特异度为0.744，灵敏度为0.739。未调整交互效应的模型AUC为0.851(95%CI:0.806～0.895)，最佳截断值为0.266，特异度为0.759，灵敏度为0.761。结论：年龄、术后使用镇静药物、机械通气时间、体外循环时间、阻断时间均为谵妄发生的危险因素，术后使用镇静药物、糖尿病、体外循环时间3个因素间的交互效应可能是术后谵妄发生的重要预测因素。
  • 高血压视网膜早期病变患者脉压差水平与颈动脉粥样硬化的相关性
    余帆, 张雪姣, 田华伟, 孙子辉
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 304-309. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.019
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    目的：探讨分析不同脉压差水平高血压视网膜早期病变患者与颈动脉粥样硬化程度的相关性。方法：选择2021年10月至2022年5月深圳市福田区5个社康中心收治的183例高血压视网膜早期病变患者（即：眼底病变Ⅱ级以下患者），根据脉压差水平，将患者分为脉压差<7.98 k Pa(A组，95例)和脉压差≥7.98 kPa(B组，88例)。收集患者一般资料，采用超声检测患者颈总动脉内膜中层厚度（IMT）及颈内动脉阻力指数（RI）、舒张末期流速（EDV）、收缩峰值流速（PSV），两组患者均进行光相干断层扫描血管成像技术（OCTA）检查，获取血管密度（VD）、中心凹无血管区（FAZ）面积、FAZ周长、非圆度指数（AI）；分析高血压视网膜早期病变患者颈动脉血流动力学参数与眼底病变参数的相关性；并对高血压视网膜早期病变患者颈动脉粥样硬化的影响因素进行单因素及多因素Logistic回归分析。结果：B组年龄、高血压病程、收缩压、舒张压、脉压差、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）显著高于A组，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、PSV显著低于A组（P<0.05）。A组与B组颈动脉正常、增厚、斑块形成、狭窄患者比例差异有统计学意义（P<0.05），其中B组颈动脉狭窄患者比例显著较高。单因素Logistic回归分析结果中年龄、高血压病程、脉压差与高血压视网膜早期病变患者颈动脉粥样硬化有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果中脉压差≥7.98 kPa是高血压视网膜早期病变患者发生颈动脉粥样硬化的危险因素（P<0.05）。结论：脉压差水平与高血压视网膜早期病变患者颈动脉粥样硬化密切相关，可为评估预测患者颈动脉粥样硬化程度提供一定参考依据。
  • 非持续性室性心动过速对射血分数保留的心力衰竭远期预后的影响
    许键, 贾晓云, 杨兴维
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 310-314. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.020
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    目的：探讨非持续性室性心动过速（NSVT）对射血分数保留的心力衰竭（HFpEF）远期预后的影响。方法：以2017年1月至2020年12月期间符合条件的225例HFpEF患者为研究对象，收集一般临床资料。患者于出院前、出院后1周、出院后2周行3次24 h动态心电图监测，记录NSVT发生情况，并据此分为无NSVT组和有NSVT组。所有患者进行前瞻性随访，终点事件为全因死亡。应用寿命表法估算生存率，应用Cox比例风险回归模型分析NSVT和死亡的关系。结果：纳入分析的HFpEF患者215例，共有47例发生NSVT，发生率为21.9%。无NSVT组和有NSVT组之间生存曲线差异有统计学意义（χ2=7.641,P=0.006），无NSVT组生存率高于NSVT组。多因素Cox回归分析表明，NSVT是死亡的危险因素。结论：HFpEF患者有较高的NSVT发生率，并且NSVT影响患者的远期预后，这对于HFpEF患者危险分层、拟定治疗策略具有一定的指导意义。
  • 基于孕检指标构建低风险孕妇发生自发性早产的预测模型研究
    韦玉岚, 邱霓, 陆巧云, 梁海燕
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 315-320. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.021
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    目的：分析影响低风险孕妇发生自发性早产（SPB）的风险因素，并构建预测模型。方法：选取2019年2月至2022年1月在本院行规律产检的236例低风险（基本情况良好且无妊娠合并症或其他妊娠风险）孕妇，分为SPB组（孕周<37周，n=71）和足月组（孕周≥37周，n=165）。采用单因素和多因素Logistic回归分析探究SPB发生的影响因素，并建立预测模型。采用一致性指数（CI）、受试者工作特征（ROC）曲线、校准曲线及Hosmer-Lemeshow拟合优度检验（H-L检验）评价所建立模型的预测价值。结果：经产、收缩压升高、血小板计数偏高、血小板激活因子（PAF）水平升高、宫颈长度≤2.5 cm均为低风险孕妇发生SPB的影响因素（P<0.05）；将这些影响因素作为预测因素建立列线图模型，模型预测低风险孕妇SPB发生风险的CI为0.774,ROC曲线下面积（AUC）为0.774(95%CI:0.710～0.839)，灵敏度为69.00%，特异度为75.80%；列线图预测SPB发生风险与实际发生风险之间基本吻合，平均绝对误差（MAE）为0.024;H-L检验显示该模型的预测值与实际观察结果之间具有良好的一致性（P>0.05）。结论：经产、宫颈长度≤2.5 cm及收缩压、血小板计数、PAF升高均为低风险孕妇发生SPB的危险因素，基于这些因素构建的预测模型辨别度、校准度及预测性能良好，可准确预测低风险孕妇发生SPB的风险。
  • 南宁市青秀区心血管疾病高危人群电子健康素养现状及其影响因素研究
    马婕, 麦兰仙, 黄芹, 文宏, 曾志羽
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 321-326. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.022
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    目的：调查了解南宁市青秀区心血管疾病高危人群电子健康素养状况及其影响因素，以改善该区心血管疾病高危人群电子健康素养状况，提高疾病管理能力。方法：随机纳入南宁市青秀区心血管疾病高危筛查项目人群，采用简单抽样法，使用自行设计的一般资料调查表和电子健康素养量表（eHEALS）对调查人群进行问卷调查。采用单因素分析和多重线性回归分析方法分析心血管病高危人群电子健康素养的影响因素。结果：本研究共纳入213例心血管疾病高危人群，电子健康素养评分22分（8～30分），低于电子健康素养分值分界点26分，处于低水平。单因素分析结果显示，不同年龄段、婚姻状况、文化程度、有无网络获取途径、网络使用的频率、医疗费用支付方式及家庭年收入人群的电子健康素养评分比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。多元线性回归分析显示，文化程度越高、网络使用频率越多及家庭收入越高，则电子健康素养评分越高。结论：调查对象电子健康素养水平较低，受到多种因素影响，应该针对人群个性化制定有效的干预措施来提高心血管病高危人群的电子健康素养水平。
  • 就诊的独生子女家庭及二胎家庭家长焦虑状况及其影响因素分析
    甘美, 任选辉, 纳晨, 王娜
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 327-332. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.023
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    目的：通过分析就诊的独生子女家庭及二胎家庭养育过程中引发家长焦虑状况的各种因素，揭示相关的社会问题，为缓解现代家长的育儿焦虑提供部分理论基础。方法：于2021年11～12月在湖北省武汉市第一医院儿科门诊及云南省昆明市昆明医科大学附属延安医院儿科门诊就诊的儿童及家长，自愿在线完整填写自制问卷的714例一胎、二胎儿童的家庭为研究对象，采用GAD-7广泛性焦虑量表对家长的焦虑状况进行调查研究，并分析影响独生子女家庭及二胎家庭家长焦虑状况的各种因素。结果：714例完整填写问卷的家长焦虑发生率为13.17%(94/714)；单因素分析显示，地域、家庭年收入、养育态度、出生后住院情况是独生子女及二胎家庭家长产生焦虑的共同影响因素；多因素Logistic回归分析显示,地域差异、家庭年收入较低、儿童出生后住过院是独生子女及二胎家庭家长焦虑的影响因素（P<0.05）。结论：现代社会中独生子女家庭及二胎家庭养育子女过程中家长易产生焦虑，多种因素与家长产生养育焦虑相关，在独生子女家庭中更为突出，应采取针对性干预措施，缓解家长焦虑，进而提高家庭生活质量，促进儿童健康成长。
  • 基于一测多评法的肝舒胶囊中7种成分含量测定
    农璐蔚, PHAM THI THAI HOA, 李运容, 陈松
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 333-339. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.024
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    目的：基于一测多评法（QAMS）建立肝舒胶囊中虎杖苷、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C 7种成分含量测定方法。方法：采用HPLC法，Phenomenex NX-C18柱（250 mm×4.6 mm×5μm），乙腈—0.2%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速为1.00 mL/min，检测波长328 nm，以虎杖苷为内参物，建立该成分与其他6个成分的相对校正因子，计算各成分含量，并与外标法测定所得含量进行比较，验证所建立方法的可行性。结果：新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的相对校正因子（RCF）分别为1.192 2、1.183 9、1.278 9、1.051 0、0.994 7、0.994 5，相对保留时间（RRT）分别为0.304 2、0.503 6、0.551 3、1.153 1、1.193 1、1.277 1。5批样品QAMS计算所得结果与外标法检测结果一致（相对误差在-5%～5%）。结论：建立的QAMS操作简便，稳定性、精密度与重复性均良好，可用于肝舒胶囊的质量控制。
  • 自动化腹膜透析的应用进展
    王霞, 孙艳艳
    广西医科大学学报. 2023, 40(02): 340-344. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.02.025
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    在世界范围内，进行腹膜透析的终末期肾病患者数量庞大，自动化腹膜透析（APD）因其便利性、灵活性的优势，令众多患者受益，使用APD的患者数量逐步上升。目前APD在美国、加拿大等发达国家使用率较高，约占70%。在我国，APD虽尚未普遍，但呈现上涨的趋势。为了能够更加深入理解APD技术、进一步推广APD在我国的运用，为众多终末期肾病患者造福，本文对APD的常见模式及临床应用予以展开叙述。
2025年, 第42卷, 第03期
刊出日期：2025-03-25
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