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2024年, 第45卷, 第05期 
刊出日期:2024-09-30
  

  • 全选
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  • 张亿, 朱虹, 李明友, 王广达, 许志文, 姜晓红, 翟鹏飞, 冯志明, 陈宗祥, 左示敏
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 1-11. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.001
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    稻瘟病是由稻瘟病真菌引起的水稻重要病害,严重影响稻米的产量与品质,培育广谱持久抗性水稻品种是控制稻瘟病最经济有效的措施。利用CRISPR/Cas9技术对江苏主推优良食味粳稻品种南粳9108中2个抗稻瘟病数量性状基因Bsr-d1和Pi21进行敲除研究,获得各基因的纯合敲除系,并通过杂交聚合获得携带双基因敲除系。苗期多菌株接种及叶片划伤接种结果表明,与野生型相比,Bsr-d1和Pi21各单基因敲除系均显著增强稻瘟病抗性;双基因聚合系的抗性水平总体强于各单基因系。RT-qPCR结果显示,稻瘟病菌接种后,多个防御相关基因在敲除系中表达水平显著高于野生型。与野生型相比,Bsr-d1和Pi21编辑系在主要农艺性状、经济和品质相关性状上无显著差异。这一研究创建的抗稻瘟病育种中间材料可进一步用于广谱持久抗稻瘟病优良食味粳稻新品种育种。
  • 石玲, 许开瑞, 任圆媛, 朱娟, 郭宝健, 王菲菲, 许如根, 吕超
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 12-19+64. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.002
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    赤霉病是大麦主要病害之一,严重影响大麦产量与品质。为研究大麦赤霉病抗性分子机制,以2个大麦赤霉病抗、感近等基因系N53和T66为材料,利用转录组测序技术(RNA-Seq),分析N53、T66在接种禾谷镰刀菌后不同时间点的基因表达特征和差异。结果表明:以接种0 h作为对照,N53和T66分别鉴定出15 230和15 106个差异表达基因。不同接种时间点上、下调的基因数目和富集到GO及KEGG通路的基因数目在两材料间存在显著差异。不同处理组间共筛选出421个共同差异表达基因,GO功能注释分类分成3大类42个亚类,KEGG通路共涉及到21个,并在信号转导(signal transduction)、植物-病原体相互作用(plant-pathogen interaction)、植物激素信号转导(plant hormone signal transduction)、MAPK-信号通路-植物(MAPK signaling pathway-plant)、苯丙烷类生物合成(phenylpropanoid biosynthesis)通路显著富集。综上,这一研究从转录组水平初步探索大麦对赤霉病的响应机制,可为进一步挖掘大麦赤霉病抗性候选基因、明晰大麦赤霉病抗性分子机制提供参考。
  • 颜磊, 赵凌天, 张雨婷, 赵灿, 李国辉, 王维领, 许轲, 霍中洋
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 20-30. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.003
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    以强筋小麦农麦88和弱筋小麦宁麦13为供试材料,探究迟播条件下基本苗和施氮量对其品质的影响,筛选适宜江苏淮南优质栽培措施组合。结果表明:基本苗和施氮量及其互作对迟播小麦主要品质指标有显著或极显著影响。随基本苗数量的增多,两品种面粉吸水率、干(湿)面筋含量、稀解值以及面团稳定时间和形成时间有所降低,支链淀粉含量、低谷黏度、最终黏度有所升高,直链淀粉含量先升后降;两品种籽粒硬度、蛋白质含量、面筋指数、总淀粉含量、峰值黏度、反弹值等指标的变化趋势不一致。随施氮量的增加,两品种籽粒容重、面筋指数、总淀粉及支链淀粉含量呈降低趋势,面粉吸水率、面团稳定时间和形成时间呈升高趋势,蛋白质含量和干(湿)面筋含量呈先增后降的规律;两品种籽粒容重、直链淀粉含量以及面粉糊化特性相关指标的响应变化有所差异。迟播宁麦13和农麦88分别在基本苗375×10~4苗·hm-2、施氮量315 kg·hm-2和基本苗300×10~4苗·hm-2、施氮量270 kg·hm-2的处理组合下,其蛋白质、湿面筋含量及面团稳定时间等主要品质指标均达到较优,符合国家弱、强筋小麦品种分级标准。
  • 朱黎明, 张文杰, 张家豪, 田桂治, 魏庆伟
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 31-37. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.004
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    及时、准确地掌握区域灌溉用水量,对水资源管理及其优化配置具有重要的意义。然而,如何有效地获取区域灌溉用水量,仍是农业、水利及地理信息等学科亟需解决的重要问题。鉴于灌溉与土壤水分变化的联系,提出一种利用土壤水分估算灌溉用水量的方法。以鹤壁市16个土壤水分监测站点为研究对象,分别建立线性模型、对数模型和土壤水量平衡模型表达降水量与土壤水分的定量关系。首先,获取站点上的6年逐日气象数据(温度、降水、气压、风速、日照时长)和土壤水分数据,前4年数据用于建模,后2年数据用于模型验证。然后,在每个站点上建立基于土壤水分估算降水量的模型,并利用验证数据进行验证。结果表明:线性模型计算降雨量的RMSE为10.55 mm,对数模型计算结果的RMSE为10.3 mm,土壤水量平衡模型计算结果的RMSE为8.62 mm,基于土壤水量平衡原理的模型能更好地表达土壤水分与降水量之间的定量关系。最后,利用土壤水量平衡模型估算田间的灌溉用水量。与实测的灌溉用水量数据对比,采用水量平衡模型估算的灌溉用水量偏小约14.19%。综上,建立的利用土壤水分估算灌溉用水量方法,对准确获取灌溉用水量具有重要意义。
  • 曹雪, 潘纪龙, 仰瑾, 刘晓宁, 张帅
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 38-44. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.005
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    棉蚜(Aphis gossypii Glover)是种内种群分化明显的重要农业害虫,种群分化给棉蚜生物学及分子生物学的研究带来挑战。通过高通量数据比对,从棉花型和黄瓜型棉蚜线粒体基因组中鉴定出一段包含多态性位点的区域,该区域位于线粒体Cyt b基因上,命名为Hap577。与其他蚜虫相比,棉蚜中Hap577包含的多态型位点具特异性。采集自7种不同寄主的1 031个棉蚜样品,基于Hap577鉴定出60个棉蚜单倍型(Hap1-Hap60),其中87.9%为Hap1、Hap3、Hap4和Hap17;采自西葫芦和黄瓜上棉蚜的单倍型92.2%为Hap1、Hap3、Hap4和Hap17;采自花椒、木槿、石榴和棉花上棉蚜的单倍型87.1%为Hap1和Hap4;采自甜瓜上棉蚜的单倍型69.8%为Hap3。对53个发布在NCBI数据库的棉蚜转录组数据进行分析,鉴定出其单倍型与采集寄主的对应关系与上述研究结果一致。这一研究建立了基于稳定多态性位点对棉蚜进行种群划分的分子标记方法,可为探索不同种群棉蚜发生规律、抗药性机制及植物抗虫机制奠定基础。
  • 蒋润州, 纪开燕, 赵海婷, 丁诗文, 秦朗, 张坤, 赵景奎, 贺振
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 45-51. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.006
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    凤仙花坏死斑病毒(impatiens necrotic spot virus,INSV)可引起多种农业和园艺观赏作物的严重病害,该病害在世界范围内普遍发生,建立快速有效的检测方法对INSV的防控有着重要意义。以INSV Nuclear Protein基因序列引物进行扩增,获得789 bp的目的基因,将其与原核表达载体pET28a连接,获得重组质粒pET28a-NPINSV,将其转化大肠埃希菌Rosetta菌株。经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳检测显示在分子量约28.7 ku处有目的蛋白质条带,与预期的INSV NP大小一致。利用镍柱亲和纯化INSV NP蛋白,并免疫健康新西兰大白兔,制备兔多克隆抗血清。通过Dot blot和ELISA方法对INSV NP多克隆抗血清进行检测,结果显示其能特异性识别INSV的NP蛋白。应用此抗血清在受INSV侵染的桃叶样品中能检测到NP蛋白的表达,而在健康植株叶片中未检测到。对制备的抗血清用纯水稀释至1:20 000时,仍能特异地检测到目的蛋白质条带,说明该抗血清特异性较强,效价较高,可为INSV的快速检测提供有效的方法参考。
  • 胡亚杰, 卞崇禹, 林小兴, 虞瑞银, 唐景冬, 何自华, 黎朝清, 李海, 谢珊珊, 丁婷, 吴峰
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 52-64. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.007
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    为获得对烟草青枯病菌有拮抗作用的生防菌,从广西贺州市烟草青枯病发病较重烟田的健康烟株根际土壤中分离获得1株对烟草青枯病菌有较强抑菌活性的菌株,命名为GJ-8。根据形态学、生理生化特征和分子生物学初步将拮抗细菌GJ-8鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。随后采用单因素试验及响应面试验优化菌株GJ-8发酵培养基组分,结果表明贝莱斯芽孢杆菌GJ-8最优发酵培养基组分为玉米淀粉17 g·L-1、黄豆粉10 g·L-1、磷酸二氢钾8 g·L-1,优化后抑菌圈直径比优化前提高21.90%,菌体浓度提高3.29倍。GJ-8菌剂施于烟田,对烟草青枯病的防效为23.53%,烟株根际土壤中烟草青枯病菌含量为2.24μg·g-1,比对照组菌量减少92.48%,说明施用该菌剂可有效降低烟草青枯病发展。综上,这一研究可为贝莱斯芽孢杆菌GJ-8生防菌剂的开发及应用提供理论基础。
  • 杜明川, 李春兰, 鲍海娟, 纪金兰, 王伟, 蒲小剑, 刘晶
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 65-74+81. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.008
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    以4份不同来源的胡卢巴种子为材料,配置3种不同类型及不同浓度的盐溶液[中性单盐(NaCl,0、50、100、150、200 mmol·L-1)、中性混合盐(NaCl+Na2SO4,浓度比1:2,0、25、50、75、100、125、150、175 mmol·L-1)、碱性混合盐(NaCl+Na2CO3+NaHCO3+Na2SO4,浓度比5:3:9:23,0、50、100、150、200 mmol·L-1)]对胡卢巴种子进行盐胁迫处理,探究盐胁迫对胡卢巴种子萌发指标(相对发芽率、相对发芽指数、相对活力指数、相对胚根长、相对胚芽长、相对鲜重)的影响。结果表明:不同种源胡卢巴种子在不同类型盐胁迫下,其种子萌发指标均受到盐胁迫的影响。低浓度盐胁迫对胡卢巴种子萌发有促进作用,100 mmol·L-1单盐、25 mmol·L-1中性混合盐和50 mmol·L-1碱性混合盐胁迫下,相对发芽率较对照分别高1.39%、3.89%和0.52%。4份胡卢巴材料在中性单盐胁迫下耐盐能力由强至弱依次为青海胡卢巴、加拿大胡卢巴、云南胡卢巴、甘肃胡卢巴,而在中性混合盐和碱性混合盐胁迫下,其耐盐能力由强至弱依次为青海胡卢巴、云南胡卢巴、甘肃胡卢巴、加拿大胡卢巴。
  • 詹阳洋, 吕鹏, 甄峰, 杨佳勋, 张中洋, 李鸿儒, 宋禹, 曲斌
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 75-81. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.009
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    选用农业废弃物玉米秸秆,通过高压釜水热法、退火热处理和机械球磨法等技术将其制备成生物碳/硅复合纳米材料,对制得材料进行结构和形貌表征,并探究其作为锂离子电池负极材料的电化学性能。结果表明:生物碳纳米材料显示出层状结构,经高温退火后硅颗粒紧密、均匀地结合于生物碳表面及其结构边缘;这种碳源的生物碳材料中天然存在的氮原子产生的晶体缺陷可增强碳材料的导电性和反应活性,从而提高生物碳/硅复合纳米材料的电化学性能。由于更高的比表面积以及循环过程中形成的固态电解质界面(solid electrolyte interface,SEI)膜消耗的可逆容量更少,因而CSi1 (碳硅质量比为3:1)相对于CSi2 (碳硅质量比为5:1)循环容量表现更佳,展现出更好的循环稳定性和良好的倍率性能。
  • 黄东璋, 包文斌, 吴正常
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 82-89. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.010
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    猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度传染性疾病,前期基于组学测序筛选出1个关键lncRNA (LOC102157897),有关其表达定位以及对PEDV复制的调控作用目前尚不清楚。首先在组织和细胞水平上测定PEDV感染前后LOC102157897的表达水平;其次利用lncLocator软件预测和核质分离试验分析其细胞定位情况,并验证其表达水平与PEDV复制的关系;最后利用转录组测序筛选其下游靶基因及信号通路。结果表明:PEDV感染可极显著提高猪空肠组织和IPEC-J2细胞中LOC102157897的表达水平;LOC102157897主要定位于细胞核中,这可能与其生物学功能有关;成功构建了LOC102157897干扰细胞系,且干扰后IPEC-J2细胞中PEDV复制水平呈极显著下降。表达水平下调有利于提高宿主细胞对PEDV感染的抵抗能力。转录组测序分析显示,LOC102157897干扰前后存在151个差异表达基因,主要参与病毒蛋白互作、趋化因子信号、白细胞受体互作、白细胞介素17信号等免疫通路,并根据功能注释和差异程度,筛选出2个组蛋白基因H2AC18和H3C14。综上,这一研究确定了1个PEDV抗性相关lncRNA分子LOC102157897,并初步探究了其功能和下游调控机制,为揭示lncRNA在PEDV感染宿主过程中的重要作用以及为今后制定PEDV的抗病育种工作策略和筛选分子标记物奠定基础。
  • 李佳, 于畅, 李雯倩, 陈广振, 李红霞, 王丹丹, 张金龙, 马志禹
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 90-97. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.011
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    为检测神经介素B (neuromedin B,NMB)及其受体(neuromedin B receptor,NMBR)基因和蛋白在圆小囊(sacculus rotundus,SR)中的表达模式和分布情况,制备圆小囊组织石蜡切片,通过HE染色,观察圆小囊组织形态;提取圆小囊组织mRNA,采用实时荧光定量PCR (qPCR)检测NMB和NMBR基因在圆小囊中的表达情况;提取圆小囊组织蛋白,采用免疫印迹(Western blot)检测NMB和NMBR蛋白在圆小囊中的表达情况;并采用免疫组织化学法(IHC)检测NMB和NMBR蛋白在圆小囊中的分布情况。结果表明:圆小囊结构与普通动物肠道类似,但具有发达的淋巴组织,且淋巴组织中散在分布着弥散神经内分泌系统细胞;NMB和NMBR mRNA在不同性别兔的圆小囊中均有表达,但NMBR mRNA在公兔圆小囊中的表达显著高于母兔;NMB和NMBR蛋白在不同性别兔的圆小囊中均有表达,但两者在公兔圆小囊中的表达均显著高于母兔;NMB和NMBR蛋白主要分布于圆小囊的淋巴组织及绒毛内,分布情况略有不同。综上,这一研究从形态学和分子生物学方面明确了NMB及其受体在圆小囊中的表达和分布情况,可为后续深入研究NMB及其受体在圆小囊内的功能奠定基础。
  • 成成, 成大荣, 朱生敏, 陈晓芳, 陶建平
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 98-104. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.012
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    为了解山羊肠道微生物群成员的多样性及其发育规律,从江苏2个不同山羊养殖场随机选择2只山羊,分别在1、3、5、10、20、30、40、45、50、60、70、80和90日龄时采集新鲜粪便样品,并采用宏基因组测序对所有样品进行分析。结果表明:山羊肠道微生物群的成员和丰度随日龄增长而不断变化,并受哺乳和采食的影响。其中,40日龄哺乳期山羊的肠道微生物有600余种,90日龄断奶山羊肠道微生物群最终稳定在1 500种左右。在80多种核心成员中,脆弱拟杆菌、大肠埃希菌和丁酸球菌是哺乳羔羊肠道中的优势细菌,而栖瘤胃普雷沃菌和厚壁菌在断奶山羊肠道细菌群中占主导地位。值得注意的是宋内志贺菌、鲍氏志贺菌、福氏志贺菌、痢疾志贺菌、肠道沙门菌、邦戈里沙门菌、梭状芽孢杆菌、格氏乳球菌和幽门螺杆菌等人兽共患细菌也可在山羊中检测到,这提示山羊可能是这些微生物的宿主。
  • 陈玥柔, 张智萍, 廖凯, 丁笠, 张新跃
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 105-113. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.013
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    为制备针对锚蛋白重复结构域蛋白13C (ankyrin repeat domain-containing protein 13C,ANKRD13C)的单克隆抗体,利用PCR扩增人源ANKRD13C基因,并与原核表达载体pET-32a(+)和pGEX-6P-1连接构建重组质粒,通过诱导表达纯化ANKRD13C重组蛋白、免疫小鼠、PEG法融合细胞和单克隆化,获得9株分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,包括7株IgG1类抗体和2株IgM类抗体。经免疫印迹法鉴定,其中1株IgG1类抗体8E3能特异性识别细胞内源性表达的ANKRD13C,将该杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔内生产腹水,纯化后经ELISA检测其效价为1:2.51×10~5,亲和常数达(9.78±0.55)×10~9 L·mol-1。这一研究表明,该抗体可应用于ELISA、Western blot和IFA等试验,为深入研究ANKRD13C生物学功能奠定基础。
  • 陈许敏, 向洁, 王洁如, 许正新
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 114-122. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.014
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    为探究紫云英苷(astragalin,AG)对心肌细胞瞬时外向钾通道电流Ito的作用,用langendorff主动脉逆向灌流法急性分离出单个SD大鼠心肌细胞,进行全细胞膜片钳试验,记录给药前后Ito的变化及激活、失活和复活过程中的动力学特征。结果表明:不同浓度的AG均表现出对Ito的抑制作用,在50、100、200 μmol·L-1浓度范围内,随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强。以给药前Ito幅值为参照,给予各浓度AG后,电流分别降至原来的(84.06±2.75)%、(66.09±4.65)%、(48.79±5.96)%,后2个浓度的效应与给药前相比具有统计学意义。在动力学特征方面,50、100、200 μmol·L-1浓度的AG使瞬时外向钾通道激活阈值上升,失活加速,从失活状态到活化状态的转换延长。综上,AG对SD大鼠心肌细胞上的Ito有抑制作用,此效应的产生与通道的激活、失活和失活后恢复动力学过程改变有关。
  • 陈磊, 张智萍, 廖凯, 张新跃
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 123-130. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.015
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    山奈酚(kaempferol,KMF)是一种广泛存在于植物中的次生代谢产物,具有多种生物和药理活性,主要由植物组织的传统有机溶剂提取和工程菌发酵获得,因其高成本和繁琐的生产过程而限制其在工业生产中的应用。为获得一种操作性更强、更经济的山奈酚大规模生产方法,建立了一套利用自诱导培养基合成黄酮类化合物的生物系统,以柚皮素为底物,利用转入了拟南芥来源的黄烷酮3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)和黄酮醇合酶1 (flavonol synthase 1,FLS1)基因的大肠埃希菌合成山奈酚。结果表明:优化自诱导培养基和生物转化条件后,山奈酚产量提高2.17倍,达(212.46±3.22) mg·L-1,底物转化率由(66.15±1.16)%提高到(85.87±0.49)%。这一研究不仅可开发一种操作简便、得率高、成本低的山奈酚制备方法,还可为其他次生代谢产物的生产提供一条重要思路。
  • 孙华迪, 王平, 孔雅鑫, 李城昊, 胡志远
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 131-138. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.016
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    为研究酶解处理后甘薯蛋白质(sweet potato protein,SPP)结构及理化性质的变化,选用5种蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶)对SPP进行酶解处理,分析蛋白酶酶解产物结构变化,测定其水解度、溶解度、持水性、乳化性等理化指标。结果表明:木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶处理后SPP水解度较其他3种蛋白酶处理后更高;SDS-PAGE凝胶电泳图谱显示,经酶解后SPP中处于高分子量的条带被降解为25 ku的低分子量条带;FTIR光谱分析表明,在5种蛋白酶酶解产物的二级结构中α-螺旋和β-转角是其主要结构;木瓜蛋白酶和胰蛋白酶处理后SPP溶解度较高;碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解产物持油性、乳化性及起泡性优于其他蛋白酶酶解产物,而胰蛋白酶酶解产物持水性较佳。综上,这一研究可为SPP活性研究及新产品开发提供理论基础。
  • 罗光宏, 刘海燕, 杨生辉, 孙中亮, 王丽娟, 孙利芹
    扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(05): 139-146. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.05.017
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    螺旋藻能利用光能,固定二氧化碳合成如蛋白质、多糖、不饱和脂肪酸等有机物,被誉为人类最理想的食物资源之一。传统的螺旋藻产品形式有藻粉及以其为原料制成的片剂和胶囊等,这类产品加工制备的工艺中包含螺杆泵上料挤压、高速雾化和高温脱水等环节,在此过程中会造成螺旋藻藻丝断裂、细胞破碎及营养物质损失。鲜食螺旋藻是在封闭式光生物反应器中培养,经采收、洗涤、过滤、杀菌而制成的可直接食用的螺旋藻,其口感清爽、无不良气味,正逐渐被人们所接受。首先分析鲜食螺旋藻较传统藻粉的营养优势,然后综述鲜食螺旋藻在现代食品加工中的应用,并对其生产系统的开发前景进行了展望,旨在为螺旋藻新产品研发及产业高质量发展提供借鉴。