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2022年, 第39卷, 第04期　
刊出日期：2022-04-28
  

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  • 曲美他嗪对大鼠骨关节炎炎症反应和软骨基质降解的作用研究
    胡紫薇, 茹晓, 蓝逆寒, 高明, 郑立
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 513-519. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.001
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    目的：探讨曲美他嗪对大鼠骨关节炎（OA）炎症反应和软骨基质降解作用。方法：将软骨细胞分为对照组、模型组和实验组。对照组加入单纯培养基培养，模型组加入含有10μg/mL IL-1β培养基培养，实验组加入含有10μg/mL IL-1β+0.1 mg/mL曲美他嗪的培养基培养。通过细胞计数试剂（CCK-8）法和钙黄绿素/碘化丙啶（Calcein-AM/PI）染色法检测曲美他嗪的毒性作用；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨形成和炎症相关基因的表达；将大鼠随机为对照组、模型组和实验组，除对照组外，模型组和实验组采用前交叉韧带切断手术建立大鼠OA模型，实验组大鼠关节腔内注射100μL 0.1 mg/mL曲美他嗪，模型组和对照组分别注射等量的0.9%NaCl溶液。处理4周后，对各组关节进行组织学染色及评分。结果：CCK-8结果显示，与0 mg/mL比较，曲美他嗪浓度低于0.1 mg/mL时，对软骨细胞无明显毒性（P>0.05）;Calcein-AM/PI染色结果显示，与模型组比较，实验组活细胞数量增加，死细胞数量减少，细胞活力提高（P<0.01）;RT-qPCR结果显示，与模型组比较，实验组的性别决定区域Y相关的高迁移率族框9(SOX9)和蛋白聚糖（ACAN）相对表达量均升高（均P<0.05），白介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、环氧酶-2(COX-2)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达均降低（均P<0.05）。相较于模型组，实验组软骨层的损伤与变形明显缓解；与模型组相比，实验组的组织学评分降低（P<0.05）。结论：曲美他嗪具有减轻OA炎症反应和保护软骨的作用。
  • 鼻咽癌细胞体外诱导肿瘤相关成纤维细胞形成并上调NNMT表达
    杨雨嘉, 姚茜, 霍慧敏, 崔昆, 姚小暄, 黄中恒, 唐锦平, 刘春磊, 韦正波, 谢莹
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 520-525. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.002
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    目的：探讨烟酰胺-N-甲基转移酶（NNMT）在肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）中的表达。方法：分别采用条件培养基（CM）和Transwell小室两种共培养模式建立CAFs体外诱导模型，将人胚肺成纤维细胞MRC-5与鼻咽癌细胞系5-8F共培养48 h，显微镜下观察细胞形态学变化。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测NNMT及CAFs相关标志物[α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、成纤维细胞活化蛋白（FAP）、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)及波形蛋白（Vimentin）]基因表达，CCK-8法检测细胞增殖能力。分离纯化头颈肿瘤来源CAFs,RT-qPCR和Western blotting法检测CAFs相关标志物及NNMT的表达。结果：两种共培养模式均能成功诱导并上调MRC-5细胞中NNMT、α-SMA、FAP、FSP-1、Vimentin基因表达（P<0.05），其中Transwell小室共培养模式诱导效果较好。鼻咽癌细胞系5-8F-CM亦能促进MRC-5细胞生长；头颈肿瘤来源的CAFs中FAP、FSP-1、Vimentin、IL-6、NNMT表达量均升高（均P<0.05）。结论：Transwell小室共培养模式是体外诱导CAFs形成的良好建模方式，NNMT在CAFs中的表达上调。
  • 薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的作用及机制研究
    程阳, 葛晨亮, 范奕好, 何燕
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 526-532. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.003
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    目的：探究薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的抑制作用及可能的机制。方法：24只健康雄性SD大鼠，随机分为对照组、模型组、薯蓣皂苷低剂量(薯蓣皂苷溶液30 mg/kg·d-1)、高剂量组(薯蓣皂苷溶液60 mg/kg·d-1)，除对照组外，其余各组采用皮下注射异丙肾上腺素(ISO,5 mg/kg·d-1)，对照组予以等剂量生理盐水，连续给药10 d，苏木精—伊红染色（HE）及masson染色检测心肌炎症反应和纤维化水平，免疫印迹法（Western blotting）检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1前体（pro-caspase-1）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 p20（caspase-1 p20）蛋白表达水平，免疫组化法检测心肌组织胶原蛋白Ⅰ（CollagenⅠ）、胶原蛋白Ⅲ（CollagenⅢ）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-18（IL-18）表达水平。结果：与对照组比较，模型组心肌纤维化明显较重，心肌炎症细胞浸润增加，心肌间质CollagenⅠ、CollagenⅢ表达增加，IL-1β、IL-18分泌增加，NLRP3和caspase-1 p20表达升高（P<0.05）；与模型组比较，薯蓣皂苷低、高剂量组心肌纤维化有所改善，心肌炎症细胞浸润减少，心肌间质CollagenⅠ、CollagenⅢ表达下降，IL-1β、IL-18分泌减少，NLRP3和caspase-1 p20表达降低（P<0.05）。各组间pro-caspase-1表达量比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：薯蓣皂苷可通过抑制NLRP3炎症小体表达而改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化。
  • 瘦素对缺血再灌注损伤大鼠脑损伤的保护作用及机制研究
    张艳, 胡诗俊, 蓝翊宁, 李胜昆, 秦超, 程道宾
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 533-539. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.004
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    目的：探讨瘦素对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织的神经保护作用及其机制。方法：将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、瘦素组和PI3K抑制剂组，每组10只。除假手术组外，其余3组均采用改良Longa线栓法建立大鼠大脑局灶性缺血再灌注损伤模型。对各组大鼠进行神经功能缺损评分，采用2,3,5-氯化三苯四氮唑（TTC）染色法检测脑梗死体积，苏木素—伊红（HE）染色法观察皮层组织的病理形态变化，原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡，蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测各组磷酸化蛋白酶B(p-Akt)的表达，组织免疫荧光法比较各组内质网应激相关蛋白C/EBP同源蛋白（CHOP）和半胱氨酸蛋白酶12(Caspase 12)的表达。结果：与假手术组比较，模型组神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡率均升高（P<0.05）,CHOP和Caspase 12的荧光强度均增强；与模型组比较，瘦素组的神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡率均降低（P<0.05）,CHOP和Caspase 12的荧光强度均减弱，皮层组织中神经细胞形态明显改善，并且p-Akt蛋白水平升高（P<0.01）；与瘦素组比较，PI3K抑制剂组的神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡率均升高（P<0.05）;CHOP和Caspase 12的荧光强度均增强。结论：瘦素可改善大鼠脑缺血再灌注后损伤，其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路，下调内质网应激相关的促凋亡因子CHOP和Caspase 12的表达有关。
  • TERT沉默对OGD/R诱导的大鼠体外星形胶质细胞损伤的影响及机制
    谢晓云, 吴双, 黄海萍, 梁程伟, 傅金凤, 王辞岚, 刘竞丽
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 540-546. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.005
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    目的：探讨端粒酶逆转录酶（TERT）沉默对氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）诱导的大鼠体外星形胶质细胞损伤的影响及机制。方法：体外原代培养新生大鼠脑皮层星形胶质细胞，建立星形胶质细胞OGD/R损伤模型。将细胞分为正常对照（Control）组、糖氧剥夺6 h/复糖复氧24 h(OGD/R)组、OGD/R+转染阴性对照（OGD/R+Si-Con）组及OGD/R+干扰TERT表达的SiRNA(OGD/R+Si-TERT)组。免疫荧光检测TERT及GFAP在星形胶质细胞的定位及表达变化。TERT-SiRNA转染后48 h收集细胞，通过Western blotting检测TERT的表达以验证转染效率。采用CCK-8法检测各组细胞的活力，Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡情况，Western blotting检测p53、Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果：免疫荧光结果显示，TERT可表达于星形胶质细胞，以胞核为主，胞质表达较少。与OGD/R+Si-Con组比较，转染TERT-siRNA的星形胶质细胞中TERT表达降低（P<0.05），表明TERT-SiRNA转染星形胶质细胞成功；与Control组比较，OGD/R组、OGD/R+Si-Con组及OGD/R+Si-TERT组细胞活力及Bcl-2蛋白表达均降低，细胞凋亡率及TERT、P53和Bax蛋白表达均升高（均P<0.05）；与OGD/R+Si-Con组比较，OGD/R+SiTERT组细胞凋亡率及P53、Bax蛋白表达升高，细胞活力及TERT、Bcl-2蛋白表达降低（均P<0.05）。结论：TERT基因沉默促进OGD/R诱导的大鼠星形胶质细胞凋亡，其机制可能与激活P53/Bcl-2/Bax信号通路有关。
  • 基于TLR4信号通路研究利拉鲁肽对脂多糖诱导的原代小胶质细胞炎症反应的作用机制
    杨泽麟, 荣曦, 刘红
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 547-551. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.006
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    目的：基于Toll样受体4(TLR4)信号通路，探索利拉鲁肽抑制脂多糖（LPS）诱导的原代小胶质细胞炎症反应的机制。方法：选取出生1 d SPF级SD大鼠，分离培养原代小胶质细胞，利用免疫荧光染色特异性蛋白Iba-1检测其纯度，将细胞随机分为5组：空白对照（N）组、脂多糖（LPS）组、利拉鲁肽（Li）组、脂多糖+利拉鲁肽（LL）组及脂多糖+TLR4抑制剂（LT）组。LPS组用LPS干预24 h,Li组用利拉鲁肽干预24 h,LL组用LPS干预24 h+利拉鲁肽干预24 h,LT组用LPS干预24 h+TAK-242干预24 h。用流式细胞仪测定各组细胞总凋亡率，以蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测IL-1β、TNF-α、TLR4、MyD88、TRAF6蛋白在各组中的表达情况。结果：与N组比较，LPS组细胞总凋亡率上升（P<0.05）；与LPS组比较，LL组和LT组细胞的总凋亡率呈下降趋势（P<0.05）。与N组比较，LPS组IL-1β、TNF-α、TLR4、MyD88、TRAF6蛋白相对表达量增高（P<0.05）；与LPS组比较，LL组和LT组IL-1β、TNF-α、TLR4、MyD88、TRAF6蛋白表达呈下降趋势（P<0.05）。结论：利拉鲁肽可能通过下调TLR4信号通路中关键因子表达抑制LPS诱导的原代小胶质细胞炎症反应，并改善细胞凋亡，保护神经系统。
  • 绿原酸干预HepG2肝癌细胞诱导肿瘤相关巨噬细胞极化的体外研究
    张潇剑, 蓝利, 阙婷, 唐立博, 杨子叶, 唐深, 罗小玲
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 552-556. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.007
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    目的：研究绿原酸（CGA）对人肝癌细胞HepG2诱导的肿瘤相关巨噬细胞（TAM）极化的影响。方法：人单核巨噬细胞THP-1经100 mmol/L佛波酯（PMA）刺激48 h诱导分化为M0巨噬细胞，与HepG2细胞共培养，并用不同浓度CGA干预。倒置显微镜下观察细胞形态学变化，CCK-8法检测细胞活性，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测TAM相关标志物CD206、白细胞介素（IL）-10、IL-6和环氧化合酶2(COX-2)mRNA表达水平。结果：与HepG2共培养后贴壁M0巨噬细胞形态由扁平圆形转变为不规则圆形，并有伪足伸出和梭形细胞形成，共培养48 h时细胞活性最高（P<0.05）。CGA处理48 h后，在25～100μg/mL浓度范围内随着CGA浓度增加，TAM细胞活性增高（P<0.05）。50μg/mL、100μg/mL CGA处理TAM 48 h后，不规则圆形带伪足细胞和梭形细胞数量增多，M1型巨噬细胞相关标志物IL-6、COX-2表达上调，M2型巨噬细胞相关标志物IL-10、CD163表达下调（P<0.05），且100μg/mL CGA较50μg/mL干预作用更明显。结论：HepG2肝癌细胞能诱导巨噬细胞极化为M2样TAM,CGA干预后TAM向M1样极化转变。
  • 基于p38MAPK/IL-6信号通路研究青蒿琥酯对2型糖尿病大鼠肝脏的作用
    白硕秋, 农晓琳, 张思琴, 李佳芮
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 557-563. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.008
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    目的：基于p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）/白细胞介素-6(IL-6)信号通路，观察青蒿琥酯对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用，研究青蒿琥酯调控肝脏炎症及纤维化的机制。方法：60只雄性SD大鼠被随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）、青蒿琥酯干预组（ART组）、盐酸二甲双胍干预组（MET组）及青蒿琥酯+盐酸二甲双胍联合用药干预组（ART+MET组），每组12只。药物干预4周后，测定大鼠体重及血糖水平，随后过量麻醉处死大鼠，采用电镜观察肝细胞超微结构改变；苏木精—伊红（HE）和Masson染色法分别观察肝组织形态学和纤维化改变，免疫组织化学染色法及实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测肝组织p-p38MAPK、IL-6蛋白及mRNA的表达。结果：与NC组相比，DM组大鼠体重降低，空腹血糖升高（P<0.05）；肝脏细胞胞核变形，细胞器扩张肿胀；出现广泛脂肪变性，中央静脉扩张充血明显，炎性细胞浸润；胶原纤维增多增粗，形成纤维间隔；p-p38MAPK、IL-6蛋白及mRNA表达水平上调（P<0.05）。与DM组相比，ART组、MET组及ART+MET组大鼠体重上升，空腹血糖值降低，肝脏细胞脂肪变性、炎性反应、纤维化及超微结构中各类细胞器受损均有所改善，p-p38MAPK、IL-6蛋白及mRNA表达水平下调（P<0.05），其中以ART+MET组改善最为明显。结论：青蒿琥酯可降低2型糖尿病大鼠血糖值，改善其肝脏脂肪变性、炎性反应及纤维化，其机制可能与青蒿琥酯抑制p38MAPK/IL-6信号通路有关，且青蒿琥酯与盐酸二甲双胍联合用药改善肝脏损伤效果更佳。
  • 锰中毒小鼠黑质中m6A甲基化及其相关因子的表达研究
    廖嘉家, 罗曼, 黄夏杰, 黄婉, 李滋虎, 覃海兰, 甘玉清, 肖友生, 王进
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 564-568. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.009
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    目的：研究锰中毒小鼠黑质中 m6A 甲基化及其相关因子表达的变化。方法：将 28 只成年清洁级雄性昆明小鼠按照随机数字表法分成 4组：对照组、MnCl2低剂量组、中剂量组、高剂量组；对照组腹腔注射等量无菌生理盐水，MnCl2低、中、高剂量组分别腹腔注射 10 mg/kg、20 mg/kg、30 mg/kg的 MnCl2溶液，1次/d，连续 4周，每天观察动物一般情况并记录体重变化。各组于注射结束后 3 d 取黑质组织，免疫荧光法观察黑质多巴胺能神经元损伤情况，m6A 甲基化试剂盒检测各组 m6A 甲基化修饰水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR 法）实验检测 m6A 甲基化相关基因在对照组和 MnCl2高剂量组小鼠黑质中的mRNA 表达水平。结果：与对照组相比，MnCl2高剂量组小鼠体重降低，黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞数减少，甲基化水平、m6A 促甲基化基因 METTL3、去甲基化基因 ALKBH5 及 FTO mRNA 表达水平升高（均 P<0.05）。结论：m6A 甲基化水平及甲基化相关因子METTL3、ALKBH5和FTO在锰中毒小鼠黑质中高表达，提示m6A甲基化可能在锰中毒中发挥作用。
  • 秦皮苷对脂多糖诱导的巨噬细胞极化的影响
    韦虹, 蒋春兰, 覃再嫩, 郑立
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 569-576. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.010
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    目的：初步探讨秦皮苷对脂多糖（LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞向M1、M2型极化的影响。方法：体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞系，将细胞随机分为对照组、LPS处理组（模型组）以及LPS+秦皮苷组（实验组）。培养细胞24 h后，利用细胞活力检测试剂盒（CCK-8试剂）和活/死细胞（Calcein-AM/PI）双染试剂盒检测秦皮苷对细胞增殖的影响；通过1.1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）法测定秦皮苷的总抗氧化活性，二氯二氢荧光素二氢乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测各组细胞内活性氧（ROS）的表达水平；利用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测巨噬细胞相关基因的表达；免疫荧光染色观察巨噬细胞细胞内相关生物标志物[诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和CD206）]的表达水平。结果：秦皮苷浓度为20μg/mL时，能够明显促进巨噬细胞的增殖，巨噬细胞活力最好。DPPH和DCFH-DA荧光探针检测结果均显示秦皮苷具有良好总抗氧化能力，能够清除细胞内的ROS。与对照组相比，模型组中炎症相关基因白介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD86和iNOS的表达上升，抗炎相关基因精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206和白介素-10(IL-10)的表达上升（P<0.05）。通过秦皮苷处理后，与模型组相比，实验组中炎症相关基因表达下降，抗炎相关基因表达上升（P<0.05）；同时，实验组中M1巨噬细胞相关蛋白（iNOS）分泌受到抑制（P<0.001）,M2型巨噬细胞相关蛋白（CD206）表达升高（P<0.001）。结论：秦皮苷可以抑制LPS诱导的M1型巨噬细胞极化，促进巨噬细胞从M1表型向M2表型极化，对M1/M2亚型失衡具有调节作用，有利于维持其动态平衡，有望为炎症的临床治疗提供新的方式。
  • 4-辛基衣康酸抑制糖酵解调控M2型巨噬细胞极化
    陈成英, 蓝利, 袁江浪, 孔星星, 王新航, 刘彧冰, 李菡, 陆彩玲, 李习艺, 唐深
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 577-582. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.011
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    目的：研究4-辛基衣康酸（4OI）对M2型巨噬细胞（Mφ）极化的干预作用，初步探讨糖酵解及脂肪酸氧化在其中的作用机制。方法：将Mφ分为M0组（100 nmol/L佛波酯刺激48 h诱导为M0型）、M2组[M0组基础上用20 ng/mL白细胞介素4(IL-4)刺激48 h诱导为M2型]、M2+4OI-L组（M2组基础上用100μmol/L 4OI处理12 h）、M2+4OI-H组（M2组基础上用200μmol/L4OI处理12 h）。实时荧光定量PCR检测M2型Mφ极化相关标志物白细胞介素10(IL-10)、甘露糖受体（MRC-1）、细胞趋化因子（CCL-22）、DC特异性细胞间黏附分子3结合非整合素（CD209）、细胞因子信号抑制物（SOCS1）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、脂肪酸氧化限速酶碱棕榈酰基转移酶-1α(CPT-1α)的mRNA表达水平；微量法酶活性试剂盒检测糖酵解限速酶己糖激酶（HK）和丙酮酸激酶（PK）活性，刃天青法检测细胞内呼吸链代谢酶活性。结果：M0极化为M2时，与M0组比较，伪足伸出细胞和梭形细胞占比和M2型极化相关标志物CCL-22、IL-10、MRC-1、CD209、SOCS1和PPAR-γ mRNA表达水平上升（P<0.01）;HK和PK活性升高（P<0.05）;CPT-1α mRNA水平和线粒体呼吸链代谢酶活性升高（P<0.01）。4OI干预后，与M2组比较，伪足伸出细胞和梭形细胞占比和M2型极化相关标志物CCL-22、IL-10、MRC-1、CD209、SOCS1和PPAR-γ mRNA表达水平下降（P<0.05）;HK和PK活性降低（P<0.05）;CPT-1α mRNA水平进一步升高（P<0.01）；线粒体呼吸链代谢酶活性无明显变化。结论：4OI可能通过抑制M2型Mφ糖酵解降低M2型Mφ极化相关标志物的表达，通过进一步促进脂肪酸氧化水平，维持M2细胞内线粒体呼吸链代谢酶活性和细胞氧化磷酸化稳定。
  • 微透析法测定秋水仙碱体外血浆蛋白结合率及与超滤法比较
    苏晓丹, 覃裕翠, 麦琬婷, 陆建媚, 韦妍妍, 黄秋洁, 叶勇
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 583-588. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.012
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    目的：采用微透析技术研究秋水仙碱的体外血浆蛋白结合率，并与超滤法比较。方法：微透析探针分别浸于含125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL秋水仙碱的兔、大鼠血浆中。灌注器以2.5μL/min的流速依次灌注40 min不同浓度的血浆平衡，每60 min间隔采样1次，高效液相色谱法（HPLC）分析秋水仙碱浓度，计算兔、大鼠血浆蛋白结合率，并与超滤法进行比较。结果：秋水仙碱在0.099 92～99.920 0μg/mL呈良好线性关系，标准方程为A=25 052 C-6 613.6,r=0.999 7；日内精密度和日间精密度相对标准差（RSD）分别为0.36%、0.85%、0.92%和2.53%、1.74%、1.19%；秋水仙碱浓度在13.96μg/mL、52.10μg/mL、71.44μg/mL的回收率分别为（99.53±0.04）%、（99.99±0.13）%、（99.92±0.22）%；秋水仙碱浓度在120μg/mL、250μg/mL、500μg/mL的兔、大鼠血浆体外平均回收率分别为46.43%、35.46%，秋水仙碱浓度为125μg/mL时，兔、大鼠体外血浆8 h内稳定性考察平均值分别为41.22%、30.23%,RSD分别为1.36%、1.01%。在相同浓度相同种属下，低、中浓度秋水仙碱在大鼠血浆中的蛋白结合率差异无统计学意义（P>0.05），在兔血浆中的蛋白结合率差异有统计学意义（P<0.05）。结论：秋水仙碱与兔、大鼠血浆有较高的蛋白结合率，微透析法和超滤法结果差异不大。
  • 肝细胞癌差异表达的癌—睾丸抗原筛选及表达初步验证
    李晓莹, 刘畅, 李鑫, 薛春红, 农蔚霞, 葛盈盈, 张庆梅, 谢小薰, 罗彬, 曾麒燕
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 589-595. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.013
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    目的：通过生物信息学方法筛选肝细胞肝癌（HCC）相关癌—睾丸抗原（CTA）并进行实验验证，为HCC免疫靶向治疗奠定基础。方法：通过GEPIA数据库筛选HCC中显著差异表达CTA，再用LinkedOmics数据库分析这些CTA与HCC预后的关系，并获取与这些CTA正相关的共表达基因集，进一步用DAVID数据库对这些CTA进行功能分析。共收集32例HCC组织，选择其中10例配对癌旁组织，通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CTA mRNA表达。结果：通过生物信息学的方法，筛选出HCC中5个显著差异表达且与预后相关的CTA:NUF2、PBK、KIF2C、OIP5和SPA17；进一步对这5个CTA进行功能预测，发现它们主要参与转录及其调控、细胞分裂、纤毛形态发生等生物学过程，涉及细胞周期、剪接体及RNA运输等信号通路。RTqPCR结果显示，NUF2和PBK在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织。结论：CTA NUF2和PBK高表达于HCC，有望成为HCC潜在的治疗靶点。
  • 基于高通量测序的风湿性心脏病瓣膜组织mRNA差异分析
    陈星宇, 卢创宏, 吴晓丹, 曾志羽
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 596-600. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.014
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    目的：基于高通量测序（NGS）技术筛选风湿性心脏病（RHD）与非RHD患者的瓣膜组织中的差异mRNA。方法：选取2020—2021年在广西医科大学第一附属医院行二尖瓣置换术的RHD患者（RHD组）和非RHD患者（Con组），取瓣膜组织进行基因NGS，对显著差异基因进行基因功能（GO）富集分析和京都基因与基因百科全书（KEGG）通路分析，然后通过蛋白相互作用（PPI）网络筛选关键基因，通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证关键基因表达。结果：两组瓣膜组织共4 498个差异表达基因，其中2 315个上调，2 183个下调，显著差异表达有530个，筛选出FN1、CD44、VCAM-1 3个关键基因。与Con组比较，FN1、CD44、VCAM-1在RHD组瓣膜组织中的表达均上调（P<0.05）。GO分析结果显示，主要富集的生物学过程（BP）为细胞外基质（ECM）及结构的组装和分解，主要的细胞成分（CC）为细胞外基质，显著的分子功能（MF）为钙黏着蛋白结合和肌动蛋白结合。KEGG通路显著富集于细胞基质黏着、白细胞跨内皮转移、ECM受体相互作用等信号通路中。结论：NGS筛查出RHD患者与非RHD患者瓣膜组织中差异表达基因FN1、CD44、VCAM-1，可能在ECM受体相互作用和白细胞跨内皮转移等信号通路中发挥重要作用。
  • 转录因子EB在病毒性心肌炎B细胞中的表达及机制研究
    卢飞玉, 韦斌, 孔清, 黄凯, 伍伟锋
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 601-605. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.015
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    目的：初步探究转录因子EB(TFEB)在病毒性心肌炎（VMC）B细胞中的表达和机制。方法：将小鼠随机分为VMC组和对照组，VMC组小鼠腹腔注射CVB3建立急性VMC小鼠模型，对照组小鼠同一天腹腔注射相同剂量的PBS，观察两组小鼠的心肌损伤变化；采用免疫印迹分析方法（Western blotting）检测两组B细胞中TFEB的表达和自噬标记物LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对表达量；体外培养从VMC小鼠中分离的脾脏B细胞，分为VMC+Tre组和VMC组，VMC+Tre组加入自噬诱导剂，VMC组加PBS作为对照，Western blotting检测两组B细胞中的TFEB蛋白的表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对表达量。结果：与对照组对比，VMC组小鼠心肌炎症细胞浸润，心肌病理积分、B细胞中的TFEB表达水平及自噬标志物LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对表达量增高（均P<0.05）；与VMC组B细胞相比较，VMC+Tre组小鼠B细胞中的TFEB蛋白相对表达量、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对表达量增高，同时，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对表达量与TFEB蛋白相对表达量呈正相关关系（均P<0.05）。结论：病毒性心肌炎B细胞中TFEB表达增加，其可能与病毒性心肌炎B细胞的自噬增强相关。
  • 多西环素对角膜瘢痕形成的影响
    周佳欣, 邹文进
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 606-611. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.016
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    目的：研究多西环素对角膜瘢痕形成的影响。方法：（1）体外实验：收集人眼角膜基质分离并培养，使用免疫荧光双染鉴定所提取到的细胞为人角膜细胞。多西环素组在传代培养后加入重组人转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人角膜细胞分化成角膜肌成纤维细胞，培养2 h后加入浓度为20 ng/mL的多西环素溶液，另设不加入任何药物的对照组和只加入TGF-β1的模型组，放入培养箱继续培养48 h。蛋白免疫印迹（Western blotting）检测CollagenⅠ和Fibronectin蛋白表达；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CollagenⅠ和Fibronectin mRNA相对表达量。（2）体内实验：采用36只雌性SD大鼠构建角膜碱烧伤模型，随机分为对照组和多西环素组，每组18只。采用体视显微镜观察大鼠角膜恢复情况并在第3、第7、第14天进行角膜混浊度评分，角膜取材后做HE染色观察大鼠角膜组织结构变化。结果：模型组细胞Fibronectin、CollagenⅠmRNA和蛋白相对表达量均较对照组升高（均P<0.05），多西环素组细胞Fibronectin、CollagenⅠmRNA和蛋白相对表达量均较模型组降低（均P<0.05）。与对照组相比，大鼠角膜碱烧伤后第7、第14天，多西环素组大鼠角膜混浊度评分更低（P<0.05）;HE染色图片，各个时间点多西环素组大鼠角膜基质结构更规整，第7天多西环素组上皮修复更佳、炎症细胞浸润更少。结论：多西环素可以抑制人角膜细胞分化为肌成纤维细胞，促进大鼠角膜碱烧伤后角膜愈合，减轻角膜瘢痕。
  • β-珠蛋白基因CD114突变导致β-地中海贫血的研究
    文火月, 林伟雄, 肖璇, 陈萍
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 612-616. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.017
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    目的：研究 β-珠蛋白基因 CD114（CTG>CCG,HBB:c.344T>C）突变导致 β-地中海贫血的血液学特点和临床特征。方法：对地中海贫血筛查疑为β-地中海贫血的病例，采用血细胞常规检测及高效液相色谱法（HPLC）血红蛋白电泳进行血液学表型分析；荧光 PCR 熔解曲线法、Gap-PCR 法和 DNA 测序进行 α-和 β-地中海贫血基因分析。结果：共检出 440 例 β-地中海贫血杂合子病例 ，其中检出 1 例罕见的 β-珠蛋白基因突变杂合子病例 ，基因分析为 β-珠蛋白基因 CD114（CTG>CCG,HBB:c.344T>C）杂合子突变。该病例为女性，29 岁，有中度贫血，血常规结果：血红蛋白（Hb）78.3 g/L, 红细胞（RBC）3.65×1012/L，平均红细胞体积（MCV）66.52 fL，平均红细胞血红蛋白量（MCH）21.48 pg，红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）322.9 g/L。其余439 例 β-地中海贫血杂合子病例表现为轻度贫血，血常规结果：Hb（115.2±12.46）g/L,RBC（5.79±0.68）×1012/L,MCV（64.27±5.48）fL,MCH（20.10±1.94）pg,MCHC（312.58±8.41）g/L。不同性别的 β-地中海贫血杂合子病例血常规分析结果比较，除MCHC 外，其他指标差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：首次在中国人群中发现罕见 β-珠蛋白基因 CD114（CTG>CCG,HBB:c.344T>C）突变导致 β-地中海贫血。此突变类型罕见，临床上容易漏诊，提示在临床诊疗、遗传咨询和产前诊断过程中要重视这种类型的突变。
  • 基于网络药理学和巨噬细胞炎症模型探讨积雪草酸抗动脉粥样硬化的作用机制
    李丹, 莫凡露, 吴灵君, 黄菊, 李佳琳, 韦智译, 苏奕达, 黄清兰, 王辉, 何萍
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 617-623. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.018
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    目的：基于网络药理学和巨噬细胞炎症模型探讨积雪草酸（AA）抗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法：首先，通过Swiss Target Prediction、CTD、GeneCards数据库获取AA相关靶点，GeneCards、TTD数据库获取AS相关靶点，之后通过Venny2.1.0在线工具映射获得AA与AS的交集靶点。采用String 11.5数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建交集靶点的蛋白相互作用（PPI）网络图并筛选出核心靶点；通过David 6.8数据库对交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析，并通过微生信在线工具对富集结果进行可视化。最后采用Cytoscape 3.7.2软件构建出“药物—靶点—疾病—通路”网络模型图。构建脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症模型，通过ELISA法检测TNF-α释放水平，Annexin V-APC/7-AAD双染色法流式细胞术及Western blotting检测细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达，验证AA对巨噬细胞炎症和凋亡的影响。结果：网络药理学预测共获得AA抗AS的潜在作用靶点84个，GO和KEGG分析结果显示AA抗AS机制可能与调控TNF、NOD样受体、凋亡及PPAR等信号通路有关。细胞实验结果显示，与LPS组比较，AA高、低剂量组TNF-α水平降低，细胞凋亡率和Bax、Cyt C蛋白表达进一步提高，而Bcl-2蛋白表达下降（P<0.05或P<0.01）。结论：AA可通过多靶点、多通路发挥抗AS作用，诱导巨噬细胞凋亡和抗炎为其作用机制之一。
  • 柚皮素治疗结直肠癌的网络药理学分析及实验验证
    张子函, 李文鑫, 罗香蓉, 熊祖明, 林益镕, 张森
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 624-630. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.019
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    目的：运用网络药理学的方法探究黄酮类化合物柚皮素治疗结直肠癌的主要机制，并进行实验验证。方法：首先通过pharmmapper数据库和SwissTargetPrediction数据库获得柚皮素的作用靶点，再通过GeneCards数据库和DisGeNet数据库获取结直肠癌相关基因；在STRING数据库中得到交集基因的protein-protein interaction(PPI)网络并通过Cytoscape获取核心基因，在DAVID数据库中进行Gene Ontology(GO)分析及KEGG通路富集分析；通过CCK-8实验检测不同浓度及不同作用时间柚皮素对结直肠癌细胞的抑制作用，并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测用药前后核心基因的表达情况。结果：通过网络数据库共筛选出柚皮素作用的169个靶点和结直肠癌相关的11 247个基因，取交集后得到141个柚皮素可能作用的结直肠癌靶点。核心基因分析显示SRC、PIK3CA、CYP19A1、PIK3CB、HSD17B2、INSR、MET等为核心基因。GO分析和KEGG分析筛选出主要通路，包括PI3K-Akt信号通路、花生四烯酸代谢、乳腺癌通路、亚油酸代谢等。CCK-8结果显示随着浓度和时间的增加，柚皮素对结直肠癌细胞的抑制作用逐渐增强（P<0.05）。RT-qPCR结果显示，与对照组相比，柚皮素作用后细胞中PIK3CA、MET、HSD17B2、SNCA、SRC、ESR1的mRNA表达水平下降，而ARK1C3的mRNA表达水平上升（P<0.05）。结论：预测了柚皮素的抗结直肠癌作用及其可能的作用机制，柚皮素可通过结直肠癌相关基因发挥抗肿瘤作用。
  • 磁共振T1mapping与T2mapping序列在类风湿关节炎兔模型骨髓水肿中的定量研究
    丁浩, 袁文昭, 莫志青, 龙娇玲, 许华, 曾自三
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 631-636. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.020
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    目的：探讨磁共振T1mapping及T2mapping序列在类风湿关节炎（RA）兔模型骨髓水肿中定量研究的可行性。方法：将16只新西兰大白兔随机分为两组，对照组6只，RA模型组10只，利用醋酸泼尼松龙及甲氨蝶呤对模型组进行治疗。采用3.0T磁共振对两组动物的双膝关节作T1mapping及T2mapping等序列扫描，测量动物股骨远端骨髓T1mapping、T2mapping值，同时利用类风湿关节炎磁共振评分系统（RAMRIS）对模型组治疗前、后进行半定量评分，治疗后取兔股骨下端作病理切片并对其评分及相应统计分析。结果：治疗后T1mapping值比治疗前降低，而模型组高于对照组，各组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后T2mapping值比治疗前升高，而模型组低于对照组，各组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）。模型组治疗前、后的T1mapping值与RAMRIS评分呈正相关关系（r=0.56,r=0.75，均P<0.05）。模型组治疗后的T1mapping值与骨髓水肿病理评分呈正相关关系（r=0.67,P<0.05），模型组治疗后的T2mapping值与骨髓水肿病理评分呈负相关关系（r=-0.57,P<0.05）。结论：磁共振T1mapping及T2mapping值可以定量评估RA兔模型骨髓水肿，T1mapping序列可用于动物RA模型疗效的定量评价。
  • IAV绝对定量PCR构建及其在体外感染巨噬细胞中的实验研究
    阙婷, 蓝利, 张潇剑, 袁江浪, 孔星星, 樊晓晖, 张增峰, 唐深, 罗小玲
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 637-642. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.021
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    目的：构建实时荧光定量PCR(RT-qPCR)绝对定量法检测甲型流感病毒（IAV），研究其在检测IAV体外感染巨噬细胞（Mφ）中病毒复制动态变化的应用效能。方法：佛波酯（PMA）诱导THP-1细胞刺激活化为Mφ，分为Mφ组和Mφ感染组[IAV的感染复数（MOI）为0.1、0.5、1、1.5、2、5、10、15、20，共9个感染剂量组]。构建RT-qPCR绝对定量检测法检测IAV体外感染Mφ模型中细胞内和培养上清病毒核酸拷贝数；CCK-8法检测24 h内不同MOI的流感病毒对Mφ细胞活性的影响，选取10～5～10～6TCID50的最佳MOI作为感染模型剂量；采用红细胞凝集实验（HA）检测感染模型细胞内和培养上清的病毒生物合成水平。结果：构建RT-qPCR的标准曲线为Y=-3.345X+38.454，具有良好的线性关系，检测下限为10～2copies/μL,10倍稀释梯度在10～3～10～8区分度和重复性良好；与Mφ组相比，随着MOI增加，Mφ活性下降（P<0.05），感染后贴壁Mφ形态出现变圆悬浮、胞质内大量颗粒、胞体模糊和细胞破裂等变化，且MOI越大，病变程度越严重；以105～106TCID50为依据，选取MOI=0.5、1、2、5、10作为Mφ体外感染的剂量；体外感染的细胞内和培养上清病毒核酸浓度随MOI增大而升高；Mφ感染组细胞内病毒标本HA效价均为1∶64，培养上清的HA效价在1∶32～1∶64。结论：构建RT-qPCR绝对定量法成功检测到体外感染Mφ细胞内和培养上清病毒核酸拷贝数呈逐渐增加趋势，并与细胞病变程度呈正相关关系；HA结果无法准确区分病毒复制趋势，RT-qPCR绝对定量法的敏感度和区分度均较HA高。
  • 不同运动方式对2型糖尿病小鼠肠道菌群及短链脂肪酸的影响
    韦薇, 张秋, 黄燕凤, 翟露, 刘玉花, 马翠, 黄山, 钟鑫, 戴霞
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 643-648. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.022
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    目的：探索有氧运动、抗阻运动及联合有氧—抗阻运动对2型糖尿病小鼠肠道菌群种类和丰度、短链脂肪酸（SCFA）及血糖的影响。方法：选用8周龄C57BL/KS.db背景的雄性db/db小鼠作为小鼠模型，将小鼠随机分为有氧运动组（Y组）、抗阻运动组（K组）、有氧联合抗阻运动组（L组）和对照组（D组），每组10只，经过8周的干预后，检测各组小鼠血糖、肠道菌群及粪便和血清中的SCFA含量。结果：运动干预8周后，K组、Y组、L组小鼠血糖均低于D组，肠道放线菌门相对丰度均高于D组，特有菌种数量均高于D组（均P<0.05）。K组2型糖尿病小鼠的chao 1指数和shannon指数高于D组，Y组chao 1指数高于D组，L组shannon指数高于D组（均P<0.05）。K组和L组粪便乙酸含量高于D组和Y组，K组粪便丙酸含量高于D组、Y组、L组（P<0.05）；各运动组粪便丁酸含量均高于D组（均P<0.05）,K组、L组血清丁酸含量均高于D组（P<0.05）。抗阻运动干预的2型糖尿病小鼠罗氏菌属和瘤胃球菌属相对丰度更高。结论：有氧运动、抗阻运动和联合有氧—抗阻运动均可改善2型糖尿病小鼠的血糖及肠道菌群的组成和结构，提高SCFA的水平，且抗阻运动在改善肠道菌群结构及提高SCFA水平上的效果最佳。
  • 异丙酚对胎鼠离体海马神经元脑源性神经营养因子表达的影响
    韦祎, 周沾, 覃银莹, 谢玉波, 利莉
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 649-652. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.023
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    目的：评价异丙酚对胎鼠离体海马神经元脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响。方法：将SD大鼠腹中14 d胎鼠处死，分离海马组织，剪碎研磨，消化，吹打及离心。神经元体外培养至第8天，按随机数字表法分为3组：空白对照组（C组）；20%脂肪乳剂对照组（I组）和100μmol/L异丙酚组（P组）。C组不做任何处理，I组加入20%脂肪乳剂，P组加入异丙酚孵育3 h至其终浓度为100μmol/L。采用免疫细胞化学法鉴定神经元并计算其纯度，CCK-8法检测神经元活性并绘制生长曲线，RTqPCR检测BDNF的mRNA表达量，Western blotting法检测BDNF蛋白的表达量。结果：与C组比较，P组神经元活性明显降低，BDNF的mRNA及蛋白表达量降低（P<0.05）;I组神经元活力未见明显差异。结论：异丙酚通过下调BDNF对胎鼠海马神经元产生神经毒性作用。
  • 锂皂石/壳聚糖纳米复合支架的制备及相关生物学性能的初步研究
    樊雪敏, 徐雯, 郭安捷, 陈志兴, 莫水学, 方善宝
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 653-659. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.024
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    目的：构建锂皂石/壳聚糖（LAP/CS）纳米复合支架材料，评价支架材料的形貌特征、理化性能及生物安全性，探讨其作为骨组织再生工程中骨替代材料的可行性。方法：通过原位聚合法和冷冻干燥法制备具有多孔网状结构的LAP/CS纳米复合支架，分为CS组、1%LAP/CS组、3%LAP/CS组、5%LAP/CS组、7%LAP/CS组、10%LAP/CS组。扫描电镜观察其形貌特征，分析元素分布情况，对其吸水率、降解率进行检测，体外实验在各组支架材料上复合人牙周膜干细胞，通过细胞计数实验计算支架对细胞的黏附率，扫描电镜观察细胞在支架上的黏附情况，CCK8法检测支架材料浸提液对细胞的毒性作用。结果：LAP/CS纳米复合支架组与CS组支架均具有多孔网状结构，支架表面分布着氧、钠、镁、硅等元素，LAP/CS组支架含有较高的镁元素和硅元素；LAP/CS组吸水率低于CS组（P<0.05），且随着LAP含量升高，材料的吸水率降低；LAP/CS组较CS组降解率降低；CCK8实验表明各组支架材料对人牙周膜干细胞均无细胞毒性；扫描电镜可观察到各组支架均可黏附细胞，5%LAP/CS组和7%LAP/CS组较CS组细胞黏附率高（P<0.05）。结论：LAP/CS纳米复合支架具有多孔结构及良好的吸水性、细胞黏附能力和低细胞毒性，含有成骨相关的镁元素，具备成骨支架材料的结构基础。
  • 舒芬太尼对肾缺血再灌注大鼠肾组织细胞自噬的影响
    杨雪梅, 杨康明, 李娜
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 660-665. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.025
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    目的：探讨舒芬太尼（Sufen）对肾缺血再灌注（RIRI）大鼠肾组织细胞自噬的影响及其作用机制。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、Sufen组、LY294002组、Sufen+LY294002组，每组12只，除对照组外，其他组均需构建RIRI模型。检测大鼠血清中肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）活性；Western blotting检测大鼠肾脏组织中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、PI3K、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白表达。结果：与模型组比较，Sufen组大鼠血清中Cr、BUN水平降低，肾脏组织中的肾小管损伤减轻，肾脏组织中MDA含量、自噬小体的数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低，SOD活性、p62蛋白、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平升高，而LY294002组上述对应指标与Sufen组呈相反趋势（均P<0.05）；与Sufen组比较，Sufen+LY294002组大鼠血清中Cr、BUN水平升高，肾脏组织中的肾小管损伤严重，肾脏组织中MDA含量、自噬小体的数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高，SOD活性、p62蛋白、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平降低（均P<0.05）。结论：舒芬太尼可能通过激活PI3K/AKT通路来抑制过度自噬，进而发挥对RIRI大鼠肾脏的保护作用。
  • 淫羊藿素对乳腺癌细胞化疗敏感的影响机制研究
    刘卫国, 何利芳, 顾玲, 何育威, 侯俊杰
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 666-671. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.026
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    目的：探讨淫羊藿素（ICT）对乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-231顺铂（CDDP）耐药细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法：培养乳腺癌细胞MDA-MB-231，构建MDA-MB-231/CDDP耐药细胞株，两种细胞分别分为对照（Con）组、CDDP组和CDDP+ICT组。采用MTT法检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞侵袭，流式细胞仪检测细胞凋亡，Western blotting法检测p38和ERK1/2磷酸化蛋白（p-ERK1/2、p-p53）的表达。结果：1.5μmol/L的ICT联合CDDP对两种乳腺癌细胞的增殖抑制作用较CDDP单用更加明显（P<0.05）。与Con组比较，CDDP组和CDDP+ICT组两种乳腺癌细胞侵袭率及p-ERK1/2蛋白表达均明显降低，细胞凋亡率及p-p53蛋白表达明显升高（均P<0.05），且CDDP+ICT组较CDDP组更加显著（P<0.01）。结论：ICT联合CDDP较CDDP单用对人乳腺癌细胞及其CDDP耐药细胞株的增殖、侵袭抑制作用和凋亡诱导作用更加明显，且ICT的增敏作用可能与ERK1/2相关通路的抑制及p-p53蛋白的激活有关。
  • 血清微囊藻毒素-LR水平与原发性肝癌临床病理特征的关系
    唐燕梅, 农清清, 赵惠柳, 王佑新, 黄杏蕾, 苏钊辉, 何俊权, 赵娜
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 672-676. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.027
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    目的：探讨血清微囊藻毒素-LR(MC-LR)水平与原发性肝癌临床病理特征之间的关系，为肝癌的预防和控制提供科学依据。方法：选取2016年12月至2021年7月在广西医科大学附属肿瘤医院就诊的原发性肝癌患者405例作为肝癌组，411例同期体检的健康者作为对照组。收集研究对象的一般人口学及临床资料，采用酶联免疫吸附试验检测研究对象血清MC-LR水平。结果：肝癌组血清MC-LR水平高于对照组[（0.18±0.09）ng/mL vs(0.12±0.06)ng/mL,P<0.01]。与MC-LR低暴露组（<0.14 ng/mL）相比，MC-LR高暴露组（≥0.14 ng/mL）人群发生肝癌风险明显增加（校正OR=2.81,95%CI:1.78～4.43,P<0.001）。肿瘤直径≥5 cm、多发、BCLC分期为C～D期、低分化、出现淋巴结转移、远处转移或侵犯门静脉者，血清MC-LR水平较高（均P<0.05）。结论：MC-LR高暴露可能增加原发性肝癌发病风险，肝癌患者血清MC-LR水平与肿瘤直径及数量、分化程度、BCLC分期、淋巴结转移等临床病理特征相关。
  • 广西贵港市HIV感染者低病毒血症发生率及影响因素分析
    王心维, 徐月香, 梁贤君, 覃春伟, 陈荣凤, 覃雄林, 叶力, 梁浩, 黄运轩, 蒋俊俊
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 677-681. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.028
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    目的：了解并分析广西贵港市2003—2020年人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者的低病毒血症（LLV）发生率及影响因素。方法：收集2003年12月至2020年10月中国艾滋病综合防治数据信息管理系统的贵港市HIV感染者的基本信息及病毒载量（VL）、CD4+T细胞计数（CD4+）等实验室检测指标。根据随访过程中是否发生LLV分为LLV组及Non-LLV组，比较两组病例的人口学和临床资料，分析发生LLV的影响因素。结果：5 463例感染者纳入分析。36.8%(2 010/5 463)的感染者发生LLV，其中VL处于50～200 copies/mL,201～400 copies/mL,401～999 copies/mL的发生率分别为22.7%,7.4%,6.6%。多因素COX比例风险回归分析显示，开始抗逆转录病毒疗法（ART）治疗时年龄>50岁[调整风险比（aHR）:1.391,95%CI:1.273～1.520]，初始治疗方案为二线方案（aHR:1.232,95%CI:1.047～1.449）,CD4+<350个/μL(200～349个/μL,aHR:1.361,95%CI:1.018～1.820;<200个/μL,aHR:1.602,95%CI:1.206～2.128)发生LLV风险较高。结论：广西贵港市HIV感染者存在LLV发生风险，主要受抗逆转录病毒疗法开始治疗时的年龄、治疗方案及治疗不及时等因素的影响。
  • 加味消毒饮颗粒质量标准研究
    张浩, 罗朝亮, 韦开听, 吴无畏, 周贤强, 蒋伟哲, 陈路
    广西医科大学学报. 2022, 39(04): 682-687. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.029
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    目的：建立加味消毒饮颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法鉴别加味消毒饮颗粒中的黄芩、野菊花和栀子等；采用高效液相色谱法测定加味消毒饮颗粒中黄芩苷的含量，色谱柱为Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm），流动相为甲醇∶水∶磷酸（48∶52∶0.1），柱温为30℃，流速为1.0 mL/min，检测波长为330 nm，进样量为10μL。结果：加味消毒饮颗粒供试品色谱分离良好，斑点较清晰，分别在与黄芩素、汉黄芩素、蒙花苷、栀子苷对照品色谱和黄芩、野菊花、栀子对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点，其Rf值适中，且阴性对照无干扰；黄芩苷质量浓度线性范围为0.243～1.946μg(r=0.999 8)，该含量测定方法的精密度、稳定性和重复性均良好；平均回收率为97.30%,RSD为1.78%(n=9);3批加味消毒饮颗粒供试品中黄芩苷的含量在5.010 8～5.128 2 mg/g范围内。结论：薄层色谱鉴别和含量测定方法可靠、准确、操作简单，可用于加味消毒饮颗粒的质量控制。
2025年, 第42卷, 第03期
刊出日期：2025-03-25
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