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2022年, 第39卷, 第03期 
刊出日期:2022-03-28
  

  • 全选
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  • 廖世杰, 宋方茗, 陈凯, 唐生平, 徐家科
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 345-350. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.001
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    骨骼的生长和修复重塑过程中血管因素至关重要。表皮生长因子样结构域6(epidermal growth factor-like domain 6,EGFL6)作为成骨细胞特异性分泌的促血管生成因子,可经由MAPK/ERK、Wnt/β-catenin、BMP/Smad信号通路及其他相关分子调控骨血管的生成。本文就EGFL6调控骨血管生成的机制进行综述,以期为骨愈合受损、骨坏死等骨科临床难题提供新的治疗思路。
  • 周宝文, 吴梅青, 石泽延, 白子文, 姚奕斌, 刘振芳, 庞如利, 赵卫华
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 351-356. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.002
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    目的:研究紫杉醇(PTX)对FLT3-ITD突变急性髓细胞白血病细胞株MOLM-13增殖与凋亡的影响及作用机制。方法:不同浓度的PTX分别作用于FLT3-ITD突变细胞MOLM-13和FLT3未突变细胞THP-1, 采用CCK8法及流式细胞仪FITC/PI双标法分别检测PTX对两种细胞株增殖与凋亡的影响;采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)及western blotting法分别检测PTX对 MOLM-13 细胞株 FLT3、NF-κB 基因及蛋白表达的影响。结果:PTX 作用于 MOLM-13 细胞 24 h、48 h、72 h 的 IC50分别为7.659 nmol/L、3.748 nmol/L、3.408 nmol/L,而 THP-1 细胞的 IC50为 61.164 nmol/L、11.804 nmol/L、9.834 nmol/L。4 nmol/L 和8 nmol/L PTX 作用 MOLM-13 细胞 48 h 的凋亡率分别为(13.12±0.20)%、(46.27±1.48)%,与对照组[(9.95±0.48)%]相比凋亡率升高(P<0.05);4 nmol/L和8 nmol/L PTX作用THP-1细胞48 h后的凋亡率分别为(4.26±2.06)%、(8.22±0.47)%,8 nmol/L PTX处理组凋亡率比对照组[(5.26±0.83)%]高(P<0.05)。经 PTX 处理 48 h 后,MOLM-13 细胞中 FLT3、NF-κB 基因表达下调,FLT3、NF-κB、p-NF-κB 蛋白表达下调(P<0.05)。结论:与 FLT3 未突变白血病细胞株 THP-1 相比,PTX 对 FLT3-ITD 突变细胞株MOLM-13的抑制作用更为明显,且呈剂量和时间依赖性;PTX对MOLM-13细胞的作用机制可能与下调FLT3、NF-κB以及p-NF-κB 蛋白的表达,进而诱导白血病细胞发生凋亡有关。
  • 陈颖, 李康路, 郑立
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 357-362. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.003
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    目的:探讨聚多巴胺(PDA)对过氧化氢(H2O2)诱导的骨关节炎(OA)软骨细胞氧化损伤和炎症反应的作用。方法:合成PDA 并进行表征,T-AOC 试剂盒检测 PDA 的总抗氧化水平,CCK-8 法检测不同浓度 PDA 对软骨细胞的毒性作用。体外培养乳鼠膝关节软骨细胞,分为正常组、模型组和处理组。用H2O2诱导软骨细胞复制OA模型,并进行PDA处理。钙黄绿素(Calcein-AM)染色检测细胞活力,DCFH-DA 荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,免疫荧光染色检测细胞白介素(IL)-6 表达,RT-qPCR 法检测炎症相关基因和软骨特异性基因Ⅱ型胶原纤维 α1(COL2A1)的表达。结果:SEM、TEM、XRD 及 FTIR 证明PDA 合成成功。PDA 的总抗氧化水平随着 PDA 浓度的增加而升高。100 μg/mL 的 PDA 处理后,与模型组比较,PDA 组软骨细胞活力升高,细胞内ROS水平和IL-6蛋白表达降低,基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13和一氧化氮合成酶(iNOS)mRNA表达下调,COL2A1 m RNA表达上调(均P<0.05)。结论:PDA在H2O2诱导的OA软骨细胞中具有抗炎、抗氧化和清除ROS的作用,有望成为治疗OA的一种新型生物材料。
  • 仇雯霞, 谢小慧, 陈欣欣, 王宗玉, 陈闯
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 363-369. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.004
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    目的:基于网络药理学探讨蛭岩消积方治疗肝癌的作用机制,并通过体外实验研究蛭岩消积方水提物对HepG2肝癌细胞的生物学作用及其机制。方法:利用网络药理学工具预测蛭岩消积方治疗肝癌的作用靶点和通路。将人肝癌细胞HepG2分为对照组(不含蛭岩消积方水提物)和不同浓度蛭岩消积方水提物组。采用CCK8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞周期,western blotting法检测细胞周期相关蛋白[CDK2、CyclinA、Cdc25A、磷酸化(p-)CHK1]及信号通路蛋白的表达。结果:利用网络药理学筛选出蛭岩消积方治疗肝癌的潜在作用靶点381个,其中关键靶点30个,KEGG富集分析结果发现潜在靶点主要富集在PI3K/AKT、乙肝、丙肝、前列腺癌、AGE-RAGE、IL-17、TNF等信号通路。蛭岩消积方水提物可降低细胞增殖活性,减少迁移和侵袭细胞数,将细胞阻滞于S期;与对照组比较,蛭岩消积方水提物中、高剂量组CDK2、Cdc25A、CyclinA蛋白表达量及p-AKT与AKT比值、p-PI3K/PI3K比值降低,p-CHK1蛋白表达量升高(均P<0.05)。结论:蛭岩消积方治疗肝癌的作用机制是多成分、多靶点、多通路共同调控的结果;蛭岩消积方水提物可能通过阻断PI3K/AKT通路抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移。
  • 张琳珮, 陈依雨, 陆洪艳, 史雯雪, 郭玲, 蒋霞
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 370-374. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.005
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    目的:探讨朝天罐总酚对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症反应的调控作用。方法:培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,以LPS诱导构建细胞炎症模型,采用MTT法测定不同浓度(1.88μg/mL、3.75μg/mL、7.5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL、60μg/mL)朝天罐总酚对细胞增殖的影响,中性红吞噬实验检测朝天罐总酚对RAW264.7细胞吞噬能力的影响。根据细胞存活率和吞噬功能检测结果,设为朝天罐总酚低、中、高剂量组,Griess法检测细胞上清液一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平。结果:朝天罐总酚浓度≤15μg/mL时,其对RAW264.7细胞存活率无显著影响(P>0.05)。与空白对照比较,3.75~15μg/mL朝天罐总酚可增强RAW264.7细胞细胞吞噬能力(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组NO、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.01);与模型组比较,朝天罐总酚中、高剂量组NO、TNF-α水平降低,朝天罐总酚各剂量组IL-6水平降低(均P<0.01)。结论:朝天罐总酚可能通过抑制炎症因子产生、增强细胞吞噬功能对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞发挥抗炎作用。
  • 崔小飞, 朱博, 李康路, 黄汉记, 卢德杰, 赵劲民
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 375-382. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.006
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    目的:探讨miR-499a-5p在骨肉瘤(OS)中的表达及其对OS发生发展的影响。方法:通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证miR-499a-5p在OS细胞系(143B、MNNG)及正常成骨细胞(hFOB1.19)中的差异表达,并使用3种在线预测工具对miR-499a-5p的靶基因进行了预测,并取3种数据共同交集得到的靶基因作为候选靶基因。利用靶基因进行基因功能分析(GO)富集分析,并利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,然后经过蛋白互作网络(PPI)分析,筛选节点最高的3个关键hub基因,并利用生存分析从这3个关键hub基因中筛选出具有预后意义的关键基因。结果:RT-qPCR结果显示,与正常的成骨细胞比较,OS细胞中miR-499a-5p表达降低(P<0.05)。通过3种在线预测工具预测miR-499a-5p的靶基因并交集获得181个靶基因。GO分析结果表明,生物过程(BP)最显著富集的是RNA聚合酶Ⅱ促子转录的正向调控,细胞组成(CC)最显著富集的是细胞核,分子功能(MF)最显著富集的是蛋白结合。在KEGG的通路富集中,最显著的是人类T细胞白血病病毒1感染信号通路,其次是轴突引导通路、催产素信号通路和T细胞激活信号通路。靶基因的蛋白互作网络分析发现节点最高的3个关键hub基因分别是异质核糖核蛋白C(HNRNPC)、真核翻译起始因子4γ2(EIF4G2)和真核翻译起始因子4A同工型2(EIF4A2)。生存分析结果显示,高度表达HNRNPC的OS患者的生存率显著降低(P<0.05)。结论:miR-499a-5p可能通过调控HNRNPC基因对OS发展产生潜在的影响。
  • 李培群, 钟伟娟, 梁莹, 樊晓晖, 张增峰
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 383-387. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.007
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    目的:探讨干扰维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)表达对新城疫病毒(NDV)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7产生肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法:将小鼠巨噬细胞RAW264.7分为NDV组(加入NDV7793)、PBS组(仅加入PBS)和空白组(不予处理)。用Lipotectamine 3000分别将siRNA-RIGI1、siRNA-RIGI2和siRNA-NC转染入小鼠巨噬细胞,设为siRNA-RIGI1组、siRNA-RIGI2组和siRNA-NC组。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测RIG-I、TRAIL和IL-6 mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清液中TRAIL和IL-6的含量。结果:与PBS组或空白组比较,NDV组RIG-I、TRAIL、IL-6 m RNA相对表达量及细胞上清液中TRAIL、IL-6的含量升高(P<0.05)。siRNA-RIGI1组、siRNA-RIGI2组RIG-I mRNA相对表达量低于siRNA-NC组和空白组(P<0.05)。与NDV组比较,NDV+siRNA-RIGI1组、NDV+siRNA-RIGI2组TRAIL、IL-6 m RNA相对表达量及细胞上清液中TRAIL和IL-6的含量降低(P<0.05)。结论:干扰RIG-I表达可抑制NDV诱导的小鼠巨噬细胞产生TRAIL、IL-6,RIG-I可能在NDV活化巨噬细胞抗肿瘤过程中发挥重要作用。
  • 兰静, 徐劲松, 阮春花, 夏国际
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 388-393. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.008
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    目的:探究慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)与肺功能的相关性。方法:将40只Wistar大鼠随机分为正常对照组和AECOPD组,每组20只,其中正常对照组不作处理,AECOPD组通过熏吸香烟及气管内注射内毒素的方式建立COPD模型,并予以鼻腔内注射金黄色葡萄球菌构建AECOPD大鼠模型,观察两组大鼠肺组织病理形态学变化及建模后0周、4周、8周、12周体重变化,比较两组大鼠血清NE水平及肺功能指标[吸气阻力(Ri)、最大通气量(MVV)、0.3 s用力呼吸容积(FEV0.3)/用力肺活量(FVC)及呼气峰流速(PEF)],并通过Pearson相关性分析法分析NE与肺功能的相关性。结果:正常对照组肺组织肺泡结构完整,排列整齐,气管和支气管黏膜纤毛完整无脱落,未见明显炎性细胞浸润;AECOPD组肺泡结构明显破坏,肺泡壁变薄,肺泡腔不规则扩大,周围可见炎性细胞浸润,气道黏膜上皮杯状细胞增生,管壁纤维组织增生,支气管上皮细胞坏死、脱落。在8周、12周时AECOPD组大鼠体重低于正常对照组(P<0.05)。AECOPD组血清NE水平与Ri均较正常对照组升高,MVV、FEV0.3/FVC、PEF均较正常对照组降低(P<0.01)。AECOPD大鼠血清NE与Ri呈正相关关系(r=0.530,P=0.003),与MVV(r=-0.456,P=0.011)、FEV0.3/FVC(r=-0.395,P=0.031)、PEF(r=-0.554,P=0.002)呈负相关关系。结论:AECOPD血清NE水平升高与AECOPD肺功能持续下降密切相关。
  • 黄婧娴, 杨婧, 谢红宇, 严凯琦, 谢方方
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 394-399. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.009
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    目的:探讨粘接剂负载羧基化聚酰胺-胺/无定形磷酸钙(PAMAM—COOH/ACP)纳米复合体对树脂-牙本质粘接性能的影响。方法:收集新鲜拔除的无龋无白斑人前磨牙或第三磨牙80个并制成统一牙本质粘接试样,将80个试样随机分为4组(A组、B组、C组、D组)。A组采用自酸蚀粘接剂进行树脂粘接,B组、C组、D组分别采用含0.3wt%ACP、0.3wt%PAMAM—COOH和0.3wt%PAMAM—COOH/ACP的自酸蚀粘接剂进行树脂粘接。对各组粘接试样行剪切强度测试,并对测试结果行单因素方差分析。采用扫描电子显微镜(SEM)观察各组牙本质粘接界面断端,并在超景深三维显微系统(50倍)下统计断裂类型。结果:A组、B组、C组、D组剪切强度分别为(8.67±4.78)MPa、(10.11±3.53)MPa、(11.94±4.78)MPa、(12.01±2.91)MPa。C组和D组的剪切强度均高于A组(P<0.05),B组、C组、D组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。SEM下观察断端,A组只可见树脂残留,B组可见少量疏松矿化产物生成,C组可见矿化产物深入牙本质内,D组形成致密的矿化产物且牙本质小管管径缩小。各组的断裂模式均以黏附破坏为主,除A组外,其余各组均发生少量内聚破坏或混合破坏。结论:PAMAM—COOH/ACP纳米复合体加入自酸蚀粘接剂中可提高其树脂-牙本质粘接强度。
  • 杨春悦, 唐云, 许建文
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 400-405. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.010
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    目的:通过观察miR-124-3p及Bcl-2、Bax蛋白的表达,探讨电针治疗对脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能恢复的机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。假手术组行椎板切除术,其余各组通过改良版Allen’s打击法建立SCI大鼠模型。造模成功后6 h起,电针组予T9~T11夹脊穴、大椎穴以及双侧足三里穴电针治疗,假手术组和模型组不予任何处理。在术后第1、第3、第7天采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分观察各组大鼠后肢运动功能,并于术后第7天进行取材,苏木精—伊红(HE)染色法观察脊髓组织神经元细胞的病理形态学改变,RT-qPCR法检测脊髓组织中miR-124-3p的表达情况,Western blotting检测脊髓组织中凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)的表达量。结果:与假手术组相比,术后第7天模型组大鼠BBB评分降低,神经元数量减少,脊髓组织中Bax的表达水平升高,miR-124-3p、Bcl-2的表达水平下降(P<0.05);与模型组相比,术后第7天电针组大鼠BBB评分提高,神经元数量增多,组织中Bax的表达水平降低,miR-124-3p、Bcl-2的表达水平升高(P<0.05)。结论:电针治疗可以促进SCI后大鼠神经功能的恢复,其机制可能与调控miR-124-3p及Bcl-2、Bax的表达有关。
  • 黄诗萍, 廖舟翔, 莫婉灵, 李辉, 杨丽超, 黄雪静, 何敏
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 406-411. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.011
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    目的:利用转录组RNA测序分析筛选与肝癌(HCC)预后相关的miRNA。方法:对正常肝细胞HL7702和HCC细胞Huh7、HepG2和Hep3B进行转录本RNA测序,筛选出HCC细胞与正常肝细胞之间的差异表达miRNAs,对差异表达miRNAs进行生物信息学分析,RT-qPCR验证miR-429表达水平,文献分析miR-429与HCC关系。结果:筛选出在Huh7、HepG2和Hep3B中差异表达的miRNAs共100个,其中上调39个,下调61个;KEGG通路分析表明,差异表达miRNAs主要富集于在多糖降解、癌症中的蛋白聚糖、ErbB等信号通路,其中miR-429在4条信号通路中被富集到。转录组RNA测序和RT-qPCR实验显示miR-429在HCC细胞中高表达,利用Kaplan-Meier plotter数据库对其进行生存分析发现,miR-429高表达的HCC患者总体生存期短(HR=1.63,95%CI:1.14~2.31,P<0.05),文献分析发现miR-429在HCC组织和细胞中高表达,且miR-429高表达是HCC患者生存时间的危险因素。结论:miRNA在HCC细胞和正常肝细胞中存在表达差异,筛选出在HCC细胞中高表达的miR-429有望作为HCC患者预后标志物。
  • 刘豪, 何小静, 刘春霞, 覃伊, 伍思怡, 赵晨, 林飞
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 412-417. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.012
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    目的:探讨半乳凝集素3(Gal3)在小鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)模型中的表达情况。方法:将20只C57BL/6J雄性小鼠随机分为假手术组和4个实验组(即LIRI后2 h组、LIRI后6 h组、LIRI后12 h组、LIRI后24 h组),每组4只。假手术组只开胸不夹闭肺门,实验组夹闭肺门60 min并分别于松开血管夹后2 h、6 h、12 h、24 h收集左肺标本。采用苏木精—伊红(HE)染色法和肺组织湿干重比(W/D)观察肺组织病理学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、western blotting、免疫荧光染色法检测Gal3 mRNA与Gal3蛋白的表达水平。结果:与假手术组相比,LIRI后各实验组出现肺组织损伤,组织结构破坏明显,肺损伤评分和W/D均升高,炎症因子IL-1β和TNF-α水平升高(均P<0.05),在LIRI后6 h肺组织病理学损伤程度和炎性因子水平达到峰值(P<0.05),随后逐渐降低。与假手术组相比,LIRI后各实验组Gal3 mRNA及其蛋白表达水平升高,Gal3免疫荧光染色表达水平升高(P<0.05),均于LIRI后6 h达到高峰(P<0.05),然后逐渐下降。结论:小鼠LIRI后Gal3表达升高,高水平的Gal3可能与LIRI后的肺组织损伤和炎症爆发有关。
  • 何达, 张莉, 席俊峰
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 418-423. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.013
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    目的:研究沙奎那韦(SQV)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及其对PI3K-AKt-NF-κB信号通路的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为对照组(Control组)、LPS模型组(LPS组)、SQV处理的LPS模型组(LPS+SQV组),每组12只。LPS+SQV组大鼠在LPS造模前予以200 mg/kg·d-1的SQV连续5 d灌胃处理,Control组与LPS组大鼠用等体积的生理盐水灌胃处理,第5天LPS组和LPS+SQV组大鼠采用腹腔注射5 mg/kg的LPS制备ALI模型,造模12 h后腹腔注射120mg/kg戊巴比妥处死大鼠;苏木精—伊红(HE)染色观察各组肺组织病理变化,计算各组大鼠肺组织湿/干(W/D)比值,TUNEL染色对肺组织细胞凋亡水平进行测定,采用ELISA法检测每组大鼠支气管肺泡灌洗液中炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的表达量,Western blotting检测肺组织中PI3K-AKt-NF-κB信号通路相关蛋白IκBa的表达水平和PI3K、AKt、NF-κB p65蛋白的磷酸化水平。结果:与Control组相比,LPS组的大鼠肺组织病理学损伤加重,肺组织W/D比值升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量和PI3K的磷酸化水平(p-PI3K/PI3K)、AKt的磷酸化水平(p-AKt/AKt)、NF-κB的磷酸化水平(p-NF-κB p65/NF-κB p65)均升高(P<0.05),而IκBa表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.01);与LPS组相比,LPS+SQV组的大鼠肺组织病理学损伤减轻,肺组织W/D比值下降(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01),IL-10含量、IκBa表达均升高(P<0.05),而其他检测指标均降低(P<0.05)。结论:SQV通过抑制细胞凋亡和炎症反应对LPS诱导的大鼠ALI产生一定的保护作用,其机制可能与PI3K-AK-NF-κB信号通路有关。
  • 白先愚, 郭兴喆, 成南南, 杨萌哲, 周守常, 覃柳洁, 黄元姣, 林文珍
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 424-430. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.014
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    目的:通过网络药理学分析蝙蝠葛碱对鼻咽癌(NPC)的作用靶点及通路,并探讨其作用机制。方法:运用Pubchem、Pharmmapper、GeneCards数据库检索蝙蝠葛碱和NPC的作用靶点后并取得它们的交集靶点;使用Cytoscape软件构建“蝙蝠葛碱—NPC疾病靶点”网络图,并利用David数据库进行GO功能注释及KEGG通路富集分析。CCK-8法检测蝙蝠葛碱作用的CNE-2细胞在24 h、48 h、72 h的增殖抑制情况。Western blotting法检测预测出的通路靶点蛋白的表达。结果:共筛选出潜在作用靶点69个,GO功能注释获得分子功能条目16个、生物过程条目24个和细胞组成条目10个,KEGG通路富集得到20条相关通路,涉及PI3K-AKT信号、癌症信号、催乳激素等信号通路。蝙蝠葛碱呈浓度和时间依赖性抑制CNE-2细胞增殖,PI3K和AKT蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:蝙蝠葛碱能有效抑制NPC细胞增殖,并且验证了PI3K-AKT通路为蝙蝠葛碱作用于NPC的主要通路。
  • 郭思彤, 谭思涛, 梁小玲, 黄菊, 刘丽敏
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 431-436. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.015
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    目的:研究驱风止痛散(QFZTS)治疗急性痛风性关节炎(AGA)的疗效及作用机制。方法:在TCMSP平台和Pubchem数据库筛选QFZTS活性成分及作用靶点,Genecards、OMIM数据库获取疾病靶点,将药物与疾病相关靶点取交集生成韦恩图,即得到QFZTS治疗AGA的潜在靶点。运用STRING数据库构建PPI网络图,导入CytoScape3.7.1得到潜在的关键靶点基因,进而对关键靶点基因进行KEGG通路分析。将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组和QFZTS高、中、低剂量组,除空白组外,其他各组通过踝关节腔内注射尿酸钠(MSU)混悬液复制AGA模型。采用苏木精—伊红(HE)染色观察踝关节滑膜组织病理学变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和转化生长因子(TGF)-β1水平,RT-qPCR法检测踝关节周围软组织中炎性小体NLRP3、Caspase-1、IL-1β m RNA表达。结果:QFZTS与AGA相关度最高的前20个靶点有MAPK14、CXCL8、CRP、IL-1β、NLRP3、CASP1、IL-6、TNF及TGF-β1等,其中炎症因子发挥重要作用。与模型组比较,QFZTS高剂量组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1水平降低,QFZTS高、中剂量组踝关节周围软组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β mRNA表达下调(P<0.05),滑膜增生情况均有不同程度的改善,炎性细胞浸润减少。结论:QFZTS可能通过下调NOD样受体信号通路相关炎症因子抑制AGA。
  • 罗承长, 苏琪盛, 黎小红, 杨峥, 莫武宁
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 437-442. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.016
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    目的:分析基质细胞衍生因子2样1(SDF2L1)过表达对人鼻咽癌(NPC)细胞5-8F中蛋白表达谱的影响。方法:提取SDF2L1基因过表达细胞株(5-8Fg)及空载细胞株(5-8F1)的总蛋白,利用非标记定量(LFQ)蛋白组学技术和串联质谱分析技术筛选差异表达蛋白(DEPs),应用R软件对DEPs进行GO和KEGG富集分析,Cytoscape软件筛选关键的DEPs,Oncomine数据库对关键DEPs进行验证,RT-qPCR和western blotting法对筛选出来的关键DEPs进行验证。结果:在5-8Fg细胞中共筛选出730个DEPs,其中296个DEPs上调,434个DEPs下调。富集分析结果显示,DEPs主要定位在核糖体中,参与核糖体合成和内质网蛋白加工等过程,发挥黏附蛋白和催化活性等功能。通过Cytoscape和Oncomine数据库验证出核糖体蛋白L14(RPL14)、RPS15A等9个关键DEPs。SDF2L1过表达后RPL14基因(P<0.05)表达下调。结论:SDF2L1过表达后显著改变了NPC细胞中的蛋白表达特征,RPL14可能是NPC的促癌因子。
  • 杨芬, 谭一虎, 肖鸣
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 443-449. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.017
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    目的:探讨女贞子提取物(LLE)对帕金森病(PD)大鼠神经炎症以及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响。方法:通过注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)构建PD大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、LLE低、中、高剂量组、阳性对照组,每组15只;另取15只正常大鼠作为对照组;LLE低、中、高剂量组分别给予0.2 g/kg、0.4 g/kg、0.8 g/kg LLE灌胃,阳性对照组给予1.67 mg/kg美多芭灌胃,对照组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续15d。干预结束后,利用旋转试验检测大鼠行为学变化;利用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠脑组织中氧化应激指标[丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)],炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)]水平;采用免疫组化法检测多巴胺标志物酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数;采用蛋白免疫印迹(western blotting)法检测PD大鼠脑组织中AMPK、ERK、p-AMPK、p-ERK表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠旋转圈数及脑组织MDA、TNF-α、NO含量均增加(P<0.05),TH阳性细胞数,GSH、SOD水平及p-AMPK/AMPK、p-ERK/ERK比值均降低(P<0.05);与模型组相比,LLE随着剂量增加,大鼠旋转圈数、MDA、TNF-α、NO水平降低(P<0.05),TH阳性细胞数,GSH、SOD水平及p-AMPK/AMPK、p-ERK/ERK比值升高(P<0.05);LLE高剂量组各项指标与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LLE可以抑制PD大鼠氧化应激损伤,缓解大鼠炎性反应,其机制可能与激活AMPK/ERK信号通路有关。
  • 赖宗强, 吴丽宁, 黎渊弘, 唐云峡
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 450-455. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.018
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    目的:研发一种具有靶向肿瘤功能的中药纳米脂质体并考察其体外抗肿瘤效应。方法:采用薄膜分散法制备靶向EpCAM的适配体(SYL3C)功能化绞股蓝皂苷(Gyp)脂质体SYL3C-Gyp@Lipo。考察SYL3C-Gyp@Lipo的表征特性,采取流式细胞仪检测其靶向性,MTT法评价其对人肝癌细胞HepG2的细胞毒性。结果:成功制备一种能够靶向肝癌的绞股蓝皂苷脂质体SYL3C-Gyp@Lipo,其分散性良好,呈圆球形或椭圆球形,能够减缓药物的释放,在体外能特异性杀伤肝癌HepG2细胞。结论:SYL3C-Gyp@Lipo能靶向杀伤高表达EpCAM的肝癌细胞,达到肿瘤靶向治疗效果,为制备新型的中药纳米载药制剂提供了一种潜在策略。
  • 张静, 张洁, 莫颖, 张蕾, 孙明慧
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 456-461. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.019
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    目的:探讨类甲基化转移酶3(METTL3)/miR-126对高糖(HG)诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)增殖的影响及其作用机制。方法:将NRK-52E细胞分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG组(35 mmol/L葡萄糖)、HG+siRNA-NC组和HG+METTL3 siRNA组。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中转化生长因子(TGF)-β1蛋白含量,RT-qPCR法检测miR-126和METTL3基因表达,western blotting检测METTL3和smad2蛋白表达,RNA免疫共沉淀技术(RIP)检测METTL3与miR-126的结合情况。结果:与对照组比较,HG组细胞增殖率和G1期细胞所占百分比降低,G2期细胞所占百分比及METTL3、TGF-β1、smad2、miR-126表达升高(P<0.05);与HG组比较,HG+METTL3 siRNA组细胞增殖率升高,G1期细胞所占百分比降低,S期细胞所占百分比升高,METTL3、TGF-β1、smad2、miR-126表达降低(均P<0.05)。HG组与HG+siRNA-NC组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。RIP实验结果显示,METTL3siRNA可降低成熟miR-126的含量(P<0.05)。结论:METTL3在HG诱导的肾小管上皮细胞中的表达上调,抑制细胞增殖,其可能与甲基化修饰miR-126并激活TGF-β1/smad2信号通路有关。
  • 梁青松, 贾军, 胡欣, 罗晖
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 462-468. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.020
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    目的:探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)靶向调控程序性死亡配体-1(PD-L1)对肺腺癌细胞(H1299)增殖、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:选择2019年3月至2021年5月在本院手术治疗的肺腺癌患者42例,术中取肺腺癌组织与癌旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测肺腺癌组织、癌旁组织与肺腺癌细胞H1299、HCC827、A549、H1975及支气管上皮细胞BEAS-2B中miR-138-5p表达水平;将H1299细胞分为Control组、miR-138-5p过表达(miR-138-5p mimics)组及阴性对照(miR-NC)组、抑制PD-L1表达(si-PD-L1)组及阴性对照(si-NC)组、miR-138-5p mimics+空载质粒(pcDNA)组和miR-138-5p mimics+PD-L1过表达(PD-L1)组。双荧光素酶报告基因检测miR-138-5p与PD-L1的靶向关系,CCK-8法与细胞划痕实验检测H1299细胞增殖与迁移,Western blotting法检测H1299细胞PD-L1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)蛋白表达。结果:miR-138-5p在肺腺癌组织中表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),肺腺癌H1299、HCC827、A549、H1975细胞中miR-138-5p表达水平显著低于BEAS-2B细胞(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-138-5p与PD-L1存在靶向关系;过表达miR-138-5p或抑制PD-L1表达后H1299细胞增殖、细胞划痕愈合率与PD-L1、PCNA、MMP-9、N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05);过表达PDL1可部分逆转过表达miR-138-5p对H1299细胞增殖、迁移与EMT的抑制作用。结论:miR-138-5p在肺腺癌患者组织和肺腺癌细胞中的表达下调,过表达miR-138-5p可通过靶向抑制PD-L1表达而抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和EMT。
  • 渠宁, 陈莹, 董旭, 王秋宁
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 469-474. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.021
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    目的:观察英夫利昔单抗(IFX)在治疗丙种球蛋白(IVIG)初治无反应型川崎病(KD)的临床疗效及不良反应。方法:选取2017年9月至2020年9月就诊于本院儿科的IVIG初治无反应型KD患儿共98例,按随机数字表法将患儿分为对照组和观察组。对照组50例予第2次IVIG冲击治疗,观察组48例予IFX治疗,比较两组患儿治疗前、后的C-反应蛋白(CRP)、白介素(IL-6)、白介素12(IL-12)、白细胞(WBC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板(PLT)水平,损伤冠状动脉恢复情况以及相关临床指标和药物不良反应情况。结果:治疗后观察组患儿TNF-α、IL-6、IL-12、PLT、CRP和WBC的水平低于对照组(均P<0.05);观察组患儿冠状动脉中度扩张发生率2.08%低于对照组的26.00%(P<0.05),而治疗后冠状动脉扩张恢复正常的比例比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组的有效率高于对照组(P<0.05),两组患儿不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用IFX治疗IVIG初治无反应型KD患儿,可有效地降低炎性反应,缩短退热时间、皮疹消退时间、黏膜充血时间及淋巴结缩小时间,且无严重不良反应,具有较高的安全性。
  • 张庭凤, 蔡正文, 孙蔚亮, 梁俐, 甘廷庆, 罗婕
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 475-479. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.022
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    目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、HIF-2α和葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义。方法:收集广西医科大学第二附属医院2017年3月至2021年3月收治的非霍奇金淋巴瘤和淋巴结增生患者的病理切片标本,其中非霍奇金淋巴瘤42例作为淋巴瘤组,淋巴结增生37例作为淋巴结增生组,用免疫组化法测定两组HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1表达情况,并分析三者与淋巴瘤国际预后指数(IPI)评分之间的相关性。结果:HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1在淋巴瘤组中的阳性表达率均高于淋巴结增生组(均P<0.01)。淋巴瘤组织中HIF-1α的表达与HIF-2α、GLUT-1的表达呈正相关关系(r=0.593,P<0.05;r=0.583,P<0.05),HIF-2α的表达与GLUT-1的表达呈正相关关系(r=0.331,P<0.05)。IPI 3~5分组的HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1阳性表达率均高于0~2分组(均P<0.05),且HIF-1α、HIF-2α、GLUT-1的表达与IPI评分均呈正相关关系(0<1,均P<0.05)。结论:HIF-1α、HIF-2α、GLUT-1的异常表达可能共同参与了淋巴瘤的发生、发展过程,三者的检测有利于良、恶性淋巴结病变的鉴别,HIF-1α、HIF-2α、GLUT-1的高表达可能是非霍奇金淋巴瘤预后不良的高危因素。
  • 周少碧, 陈文, 邱俊霖
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 480-483. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.023
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    目的:观察糖尿病酮症酸中毒(DKA)患者的感染情况,并分析DKA合并感染的影响因素。方法:回顾性分析2014年1月至2019年12月北海市人民医院收治的240例DKA患者的临床资料,按是否合并感染分为感染组和非感染组,比较两组年龄、性别构成、糖尿病分型、白细胞、中性粒细胞、血肌酐(Scr)、尿酸等,并采用多因素Logistic回归分析DKA合并感染的独立影响因素。结果:240例DKA患者中,合并感染者121例,非感染者119例。感染的患者中,呼吸系统感染71例,消化系统感染35例,其他感染15例。2型糖尿病DKA的感染率高于1型糖尿病(P<0.05)。与非感染组比较,感染组的呼吸、脉搏及白细胞、中性粒细胞、Scr、尿酸水平升高,HCO3-水平降低(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,糖尿病分型和HCO3-为DKA合并感染的独立影响因素(P<0.05)。结论:DKA合并感染以呼吸系统感染多见,感染患者的肾功能较差,酸中毒较明显,糖尿病分型、HCO3-为DKA发生感染的独立影响因素。
  • 张海山, 赵军, 李丽媚, 李丹苹, 周晓莹, 李萍
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 484-487. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.024
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    目的:对单中心20年来收治的口腔鳞状细胞癌患者的发病情况及构成特点进行统计分析,为疾病的预防和早期诊断提供指导和帮助。方法:收集2001—2020年在广西医科大学附属口腔医院诊治,并经病理确诊的口腔鳞状细胞癌病例资料进行回顾性研究。结果:纳入病例4 068例,其中男2 647例,女1 421例,男女性别比为1.86∶1,女性患者平均确诊年龄为(58.07±13.72)岁,男性为(56.63±12.74)岁;50~69岁为口腔鳞状细胞癌的好发年龄段;唇癌、牙龈癌、硬腭癌、颊癌在≥60岁年龄组多见,而舌癌、口底癌则多见于<60岁年龄组;男性患者病变部位的前3位为舌(45.5%)、牙龈(16.2%)、口底(14.2%),女性患者病变部位的前3位为舌(57.5%)、牙龈(16.8%)、颊部(15.6%)。近20年口腔鳞状细胞癌的确诊例数呈逐年递增趋势。结论:近20年广西地区罹患口腔鳞状细胞癌患者的好发年龄段较过去推迟近10年,舌癌、口底癌表现出年轻化的倾向。
  • 李俊锋, 黄钊, 程洪, 冯启明, 陈丁泉, 覃娴静, 郑铁军, 凌赫, 苏伟, 赵劲民
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 488-493. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.025
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    目的:分析2010-2019年广西南宁市急性骨筋膜室综合征(ACS)截肢发生率的变化趋势及危险因素,为预防其发生提供参考。方法:收集2010-2019年南宁市6家综合医院诊治的ACS患者的临床资料,采用单因素及多因素Logistic回归分析影响患者发生截肢的危险因素。结果:共收集378例患者,其中截肢64例,总截肢率为16.93%;2010-2019年期间,广西南宁市 ACS 患者的截肢率呈下降趋势(P趋 势<0.05)。多因素 Logistic 回归分析显示:高能量损伤(OR=2.136,95%CI:1.050~4.343)、合并血管损伤(OR=2.553,95%CI:1.301~5.011)、合并感染(OR=3.120,95%CI:1.539~6.327)、转院治疗(OR=4.164,95%CI:1.853~9.354)以及未切开减压(OR=5.383,95%CI:1.143~25.348)是患者截肢的危险因素。结论:广西南宁市 ACS 的截肢率呈下降趋势;高能量损伤、合并血管损伤、合并感染、转院治疗以及未切开减压是ACS患者发生截肢的危险因素。
  • 李娜, 陈晓艺, 黄小童, 李清平
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 494-498. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.026
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    目的:建立蠲痹颗粒中有效成分绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸的含量测定方法。方法:色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长:绿原酸、阿魏酸为320 nm,龙胆苦苷为277 nm,柱温30℃,进样量为10μL。结果:绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸的线性范围分别为9.848~59.088μg/mL(R=0.999 58)、49.588~297.528μg/mL(R=0.999 62)和6.016~36.096μg/mL(R=0.999 62),平均加样回收率分别为101.4%(RSD=2.4%)、97.2%(RSD=2.7%)和100.0%(RSD=2.7%)(n=6)。结论:本研究同时测定了蠲痹颗粒中3个特征成分,重复性好,简单高效,可为蠲痹颗粒质量标准制定提供依据。
  • 黄艳萍, 郭殊玮, 刘微, 廖万忠, 蒋伟哲, 付书婕
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 499-505. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.027
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    目的:确定复方夏枯草颗粒的提取工艺和颗粒剂的成型工艺。方法:以对人甲状腺癌B-CPAP细胞增殖的抑制作用为指导,以有效成分的转移率为指标,确定最佳提取溶媒;采用正交试验,以出膏率及迷迭香酸和连翘苷的转移率为指标,考察液料比、提取时间、提取次数3个因素对处方药材提取效果的影响,选择最佳提取工艺;以颗粒成型率、流动性、吸湿性、溶化性为指标,考察辅料种类及配比对颗粒成型工艺的影响,优选最佳成型工艺。结果:最佳提取溶剂为35%乙醇;最佳提取工艺:12倍量35%乙醇,浸泡30 min后回流提取3次,每次1 h;最佳成型工艺:辅料为淀粉∶糊精(1∶2),药辅比1∶0.8,润湿剂为90%乙醇。结论:实验确定的复方夏枯草颗粒的提取工艺和成型工艺稳定可靠,重现性良好。
  • 黄文秀, 周先果, 黄锦平, 冯丽珍, 吕玉莲, 邓婉瑶, 刘胜君, 王瑶, 黄兴振
    广西医科大学学报. 2022, 39(03): 506-512. https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.028
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    目的:制备汉防己甲素纳米晶(Tet-NCs),并对其进行质量评价。方法:采用超声法制备Tet-NCs,以稳定剂种类、超声功率、超声时间等为考察因素,粒径和多分散系数(PDI)为评价指标,运用Box-Behnken响应面法优选制备工艺,并对制备的TetNCs进行质量评价。结果:优选的制备工艺是超声时间为8 min(超声功率为270 W),吐温含量为0.1%,大豆磷脂含量为0.5%,有机相与水相的比例为1∶20,药物浓度为10 mg/mL。最优制备工艺所制出Tet-NCs,粒径为(104.90±0.07)nm,PDI为(0.27±0.09),Tet-NCs呈不规则椭圆形和圆形,Tet-NCs中Tet呈现无定型结构,Tet-NCs中Tet特征吸收峰减弱,Tet的晶型发生了改变,120 min内Tet-NCs累积溶出度约为82.64%。结论:优选的超声法操作简单可行,所制备的Tet-NCs的粒径和PDI符合要求。