2024年, 第47卷, 第07期　
刊出日期：2024-07-25

  

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  酒精及高脂饮食双重诱导下脂肪肝的转录组学变化分析

  徐子瑛, 高亚钢, 唐智杰, 袁静

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 643-652. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0086

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  目的 通过酒精灌胃和高脂饮食诱导脂肪肝小鼠模型，观察小鼠肝脏表型和转录组学的改变，分析酒精、高脂饮食和联合饮食对肝脏的危害性。方法 实验小鼠分为对照组(PBS)、高脂饲喂组(高脂饲料)、酒精灌胃组(40%酒精)、联合饲喂组(酒精+高脂饲料)。HE染色观察各组小鼠肝脏组织病理形态。提取肝脏RNA进行转录组测序，并针对各组转录组学的变化进行分析，观察在单一风险因素作用下和双重风险因素作用下对肝脏的影响。构建基因表达调控网络锁定网络核心基因，并对其进行验证。结果 在病理层面，联合饲喂组肝脏相较于单一风险因素各组表现出更为严重的脂质累积和炎症。转录组学分析结果显示，联合饲喂组的基因表达相较于单纯的高脂饲喂组和酒精灌胃组表现出了更为明显的脂质累积通路的活跃和恶化倾向。对单风险因素和双重风险因素的差异表达基因取交集，筛选出了导致脂肪肝肝损伤的主要风险基因。功能分析结果显示高脂饮酒小鼠肝脏的基因表达变化不仅包括脂肪代谢异常，同时也和药物的不良代谢有关，最终导致肝脏炎症增加。通过网络分析可以确定Acacb,Cyp2b10和Cd36可能是高脂饮群体肝脏基因表达变化的主要靶点。结论 饮酒和高脂饮食对肝脏的影响虽然都和脂肪累积引起脂肪肝相关，但并不完全一样，高脂饮食人群饮酒会对肝脏产生更严重的影响。然而关于高脂饮食和饮酒对肝脏的具体作用机制有待于进一步深入探索。
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  淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后保护效果评估

  黄美容, 卢琴, 杨慧, 张宁晴, 闵迅, 黄健

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 653-658+665. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0090

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  目的 表达纯化淋病奈瑟菌NHBA蛋白，通过鼻腔免疫途径制备其多克隆抗体并对NHBA抗血清的免疫保护效果进行评估。方法 构建NHBA蛋白原核表达菌株并进行目的蛋白的表达及纯化。小鼠随机分为2组：NHBA组：NHBA蛋白+霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂；磷酸盐缓冲液(PBS)组：PBS+CTB佐剂。通过对小鼠进行鼻腔免疫NHBA蛋白制备其多克隆抗体，ELISA测定免疫后血清中IgG抗体效价。蛋白免疫印迹法鉴定NHBA蛋白在淋病奈瑟菌菌株中的表达情况。利用血清杀菌活性实验、调理吞噬杀伤实验及抗体粘附抑制实验评估NHBA抗血清的免疫保护效果。结果 成功表达纯化NHBA蛋白。鼻腔免疫小鼠后血清中产生了高滴度的IgG抗体。蛋白印迹实验结果显示抗血清能识别淋病奈瑟菌菌株中天然表达的NHBA蛋白。血清杀菌活性实验和调理吞噬杀伤实验的有效杀菌滴度分别为1/200、1/400。抗体粘附抑制实验结果显示NHBA抗血清能有效抑制淋病奈瑟菌粘附ME-180细胞。结论 淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后获得的抗血清具有免疫保护效果，未来可以作为淋病奈瑟菌鼻黏膜疫苗的有效靶点。
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  小白菊内酯调控NF-κB表达改善体外循环犬肺缺血再灌注损伤

  陈松, 吴汉华, 刘科宇, 谢菲, 秦莉, 张红

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 659-665. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0088

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  目的 研究小白菊内酯（PTL）对体外循环（CPB）犬肺缺血再灌注（IR）损伤的影响，并探讨其作用机制。方法 18只健康成年中华田园犬，体重10～12 kg,采用随机数字表法分为假手术组（Sham）、肺缺血再灌注组（IR）和小白菊内酯组（PTL）。假手术（Sham）组不进行CPB,其余两组均建立CPB左肺缺血再灌注损伤模型。取CPB前（T₁）、停机时（T₂）和实验结束时（T₃）股动脉血行血气分析，计算呼吸指数（RI）和氧合指数（OI）;ELSIA检测T₁、T₂和T₃时点血浆和T₃时点左肺肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量；HE染色观察肺组织病理情况；qRT-PCR检测肺组织TNF-α mRNA表达水平；Western blot检测肺组织NF-κB p65、NF-κB p65和TNF-α蛋白表达水平。结果 CPB后犬出现肺损伤，与IR组比较，T₃时点PTL组肺组织病理损伤减轻，RI明显降低（P<0.05）,血浆、肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量，肺组织TNF-α mRNA相对表达水平，TNF-α、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,OI明显升高（P<0.05）。结论 PTL可改善CPB犬肺损伤，其机制可能与抑制NF-κB p65激活，减轻炎症反应有关。
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  Parkin介导的自噬与锰致小鼠神经毒性效应的关系

  胡宏涛, 张玥, 赵颖, 曹玉民, 周远忠, 蒋智钢, 范奇元

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 666-672+682. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0084

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  目的 探究Parkin介导的自噬与锰致小鼠神经毒性效应的关系。方法 将80只8周龄SPF级C57B6雄性小鼠随机分为4组，即对照组以及低、中、高剂量组，每组20只，腹腔注射MnCl₂·4H₂O溶液，连续染毒4周。染毒结束后，检测小鼠运动及学习记忆能力，小鼠全血及中脑中锰蓄积量，小鼠大脑纹状体内线粒体损伤情况，大脑中多巴胺水平，Parkin、LC3蛋白水平。结果 小鼠染锰后中脑及全血中锰蓄积量均增高，其中中、高剂量组均明显高于对照组（P<0.05）。与对照组相比，高剂量组小鼠运动及学习记忆功能受损，转棒停留时间、自主交替率及第一象限停留时间均减少（P<0.05）,逃避潜伏期时间增加（P<0.05）。与对照组相比，高剂量组多巴胺水平降低（P<0.05）。随着染锰浓度升高，小鼠纹状体细胞中线粒体损伤加重，与对照组相比，通过透射电镜发现，高剂量组小鼠纹状体细胞中线粒体外膜凹凸不平，内膜嵴减少、模糊不清。随着染锰浓度升高，小鼠脑内海马中自噬水平先升高后降低。与对照组相比，中、高剂量组Parkin蛋白含量减少（P<0.05）。随染锰浓度升高，LC3Ⅱ/Ⅰ比值先升高后下降，高剂量组明显低于对照组（P<0.05）。随染锰浓度升高，α-syn蛋白含量逐渐升高，与对照组相比，中、高剂量组α-syn蛋白含量明显升高（P<0.05）。结论 锰致小鼠神经系统损伤可能与Parkin介导的自噬途径受阻有关。
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  组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A对大鼠体外循环术后急性肺损伤的保护作用

  代树丽, 王波, 王勇, 唐金清, 朱文霞, 张红

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 673-682. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0087

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  目的 探究曲古霉素A(TSA)对大鼠体外循环肺损伤的影响及作用机制。方法 将30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CPB肺损伤组(I/R组)、CPB肺损伤+TSA给药50 ng/kg组(TSA1组)、CPB肺损伤+TSA给药100 ng/kg组(TSA2组)、CPB肺损伤+TSA给药150 ng/kg组(TSA3组),每组各6只。Sham组仅行血管穿刺置管，I/R组和TSA组构建CPB模型，TSA组还需术前使用曲古霉素A。体外循环前(T1)、开放肺门后10 min(T2)和实验结束时(T3)查血气，计算氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)。取左肺组织HE染色后观察形态和病理损伤评分，ELISA法测肺组织匀浆和肺泡灌洗液中炎症因子含量，WB法测HDAC2、AC-H3及NF-kB P65表达。结果 肺功能指标OI在T2、T3时刻表现为TSA组高于I/R组，TSA组中TSA3组最高，RI与之相反(P<0.05);病理损伤评分表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低(P<0.05);肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β含量以及BALF中TNF-α、总蛋白含量均表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低(P<0.05);肺组织中HDAC2表达表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低，AC-H3的表达与之相反(P<0.05);NF-κBp65在胞核内表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低，胞质内与之相反(P<0.05)。结论 TSA可减轻大鼠体外循环肺损伤，且存在浓度依赖性，其机制可能是增加了组蛋白乙酰化，降低NF-κBp65在细胞核内的表达，从而减轻肺部炎症反应。
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  DM-[Ch][Tau]对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用

  江玲, 欧水平, 赵长阔, 何雅韵, 胡荣誉, 杨松烨, 王森

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 683-690. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0085

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  目的 研究5,6-二溴去甲斑蝥素单酸甲酯(DM)-牛磺酸胆碱离子液体([Ch][Tau],DM-[Ch][Tau])瘤内注射对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用。方法 采用CCK-8法评价DM、[Ch][Tau]及联用体外抗H22肝癌细胞活性。皮下接种H22肝癌细胞构建移植瘤小鼠模型，将25只BALB/c荷瘤小鼠随机分为模型组(生理盐水)、[Ch][Tau]组、NCTD组(去甲斑蝥素)、DM组和DM-[Ch][Tau]组，每2日给药1次，连续给药治疗1周，观察小鼠及其皮下移植瘤生长情况，计算体重、瘤体积、瘤重和抑瘤率。HE染色观察肿瘤组织病理形态，TUNEL检测肿瘤细胞凋亡，免疫组化染色检测瘤组织BAX、Bcl-2的表达。结果 DM、[Ch][Tau]对H22增殖均具有抑制作用，IC50分别为1.13和234.30μg/mL,DM和[Ch][Tau]联用对H22的抑制作用强于DM,DM-[Ch][Tau]([Ch][Tau]浓度=300μg/mL)IC50为0.84μg/mL。与模型组相比，[Ch][Tau]组、NCTD组、DM组、DM-[Ch][Tau]组的抑瘤率是6.81%、27.82%、39.07%、64.55%;[Ch][Tau]组小鼠肿瘤在给药后仍迅速增长，NCTD组与DM组肿瘤生长速度缓慢，有一定抑制作用，DM-[Ch][Tau]组小鼠肿瘤生长受到显著抑制，肿瘤组织消融坏死，肿瘤生长显著低于模型组(P<0.05)。各组肿瘤组织均局部可见坏死，坏死面积DM-[Ch][Tau]>DM组>NCTD组>模型组。[Ch][Tau]组、模型组、NCTD组、DM组、DM-[Ch][Tau]组的细胞凋亡率为(17.66±13.31)%、(1.05±1.32)%、(26.31±11.89)%、(46.97±19.18)%、(52.85±24.737)%。各组对肿瘤组织中凋亡基因Bax蛋白均有一定的激活作用，DM-[Ch][Tau]组Bax/Bcl-2的比值最高，肿瘤细胞凋亡作用最强。结论 DM-[Ch][Tau]注射剂对H22肝癌移植瘤小鼠具有明显的抗肿瘤作用，为DM-[Ch][Tau]注射剂制剂研发提供实验数据。
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  中医药治疗慢性肾脏病合并肿瘤的用药规律

  祝昌昊, 杨精华, 唐阁, 郭望, 王耀光

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 691-696+713. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0096

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  目的 基于数据挖掘方法探讨中医药治疗慢性肾脏病(CKD)合并肿瘤临床遣方用药规律。方法 收集2017年10月至2022年9月天津中医药大学第一附属医院国医堂专家门诊治疗慢性肾脏病合并肿瘤的处方，应用Microsoft Excel 2022、SPSS 26.0及SPSS Modeler 18.0进行中药使用频数、性味、分类、归经、关联规则及核心药对分析。结果 最终纳入180个处方进行统计分析，涉及中药214味，药物频次3 017次。药性以寒温平为主，药味以甘苦辛为主，归经多为肝脾肺胃经，其中药物频次较高的是补虚药、清热药、活血化瘀药、利水渗湿药。基于关联规则分析提示核心药物为四君子汤、五苓散、当归补血汤、生脉散加入补气升阳、活血化瘀药物加减而成，聚类分析得到4个核心药物组合。结论 中医药治疗慢性肾脏病合并肿瘤以扶正祛邪为总的治则，以疏利少阳三焦为治疗大法，融合补肾健脾、调理中焦、疏肝理气、利湿泄浊、活血化瘀、清热解毒等治法，标本兼顾，临证疗效显著，值得借鉴与学习。
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  心脏超声组织多普勒成像早期识别脓毒性心功能障碍的价值

  敖万萍, 张玮, 高飞, 付豹, 傅小云

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 697-702. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0089

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  目的 比较传统二维超声和组织多普勒成像（TDI）对早期识别脓毒性心脏功能障碍的价值。方法 纳入2015年1月至2017年1月就诊于遵义医科大学附属医院重症医学科并诊断为脓毒症或脓毒性休克的患者，分为脓毒症组（n=40）和脓毒性休克组（n=30）,以性别、年龄及体重指数匹配的健康人群作为对照组（n=40）,并在入院24 h内同时进行床旁传统二维超声和TDI检查，并收集相关超声指标。结果 3组研究对象比较发现，脓毒症组和脓毒性休克组的心率及体温均较对照组明显升高；脓毒性休克组平均动脉压（MAP）较对照组明显降低；与脓毒症组相比，脓毒性休克组血Lac、cTn-I、CRP及PCT水平更高，机械通气和使用缩血管药物（去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺）的比例更高，心率明显增加及MAP明显降低。传统二维超声检测的心功能指标LVEDD、LVESD、LVEF、RVs、RVd在3组之间无显著统计学差异，脓毒症组和脓毒性休克组的E₂/A₂和E₃/A₃明显低于对照组，且脓毒性休克组E₂/A₂明显低于脓毒症组。TDI检测发现，Am、e′、a′在3组中无显著统计学差异；脓毒症组和脓毒性休克组的Sm、Em、Em/Am、s′、e′/a′明显低于对照组，LVMPI和RVMPI在脓毒症组和脓毒性休克组明显高于对照组；脓毒性休克组的Sm、Em/Am、s′、e′/a′低于脓毒症组，但脓毒性休克组的LVMPI明显高于脓毒症。结论 传统二维超声和TDI均可早期检测到脓毒症心脏舒张功能异常，而在心脏收缩功能方面，TDI更具优势。
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  超声联合超声造影在合并桥本甲状腺炎C-TIRADS4类甲状腺结节中的诊断价值

  罗丽娟, 蔡燕, 马洪清, 华宇羽, 文静

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 703-713. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0091

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  目的 应用单因素及多因素分析结合风险预测模型探讨超声(US)联合超声造影(CEUS)对合并桥本甲状腺炎(HT)C-TIRADS4类甲状腺结节的诊断价值。方法 取2021年6月至2023年12月于贵州医科大学附属医院行US及CEUS,并经手术病理结果证实的桥本甲状腺炎合并甲状腺结节患者，按7∶3比例，训练集256例，验证集111例。构建预测模型列线图，绘制校准曲线评估模型校准度，通过受试者工作特征(ROC)曲线分析评估其鉴别效能，构建临床决策曲线(DCA)评估模型临床应用价值。结果 多因素Logistic回归分析结果显示：边缘不规则、边缘模糊、微钙化、肿瘤最大直径≤10 mm、造影后边界不清、向心性增强、晚于周围组织增强、增强后结节活动度差及有增强环等可能是结局的影响因素。绘制具有9个独立预测因子的列线图，ROC曲线显示模型准确度良好。拟合优度检验结果提示模型拟合良好。决策曲线显示进行干预的净获益高于对所有人干预和不干预。结论 US征象中边缘不规则、边缘模糊、微钙化、肿瘤最大直径≤10 mm为合并HT甲状腺结节的独立危险因素；CEUS征象中造影后边界不清向心性增强、晚于周围组织增强、增强后结节活动度差及有增强环对合并桥本甲状腺炎甲状腺癌的诊断价值较高。
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  神经重症患者留置鼻胃管或鼻肠管进行肠内营养的效果比较

  曹飘, 熊冰婕, 张霞, 梁涛, 张骏

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 714-718+724. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0094

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  目的 探讨神经重症患者分别经鼻胃管和鼻肠管两种方式进行肠内营养支持的疗效。方法 收集2020年1月至2022年1月入住遵义医科大学附属医院神经重症监护室142例进行肠内营养支持患者的临床资料，其中70例患者给予鼻胃管管饲，为A组，72例患者给予鼻肠管管饲，为B组。分别比较两组患者肠内营养支持前、支持10 d后营养指标(血清总蛋白、血清白蛋白、血清前白蛋白)以及胃肠道并发症(腹泻、胃潴留、胃黏膜出血)发生率和预后。结果 营养状况：肠内营养10 d后，B组患者营养指标(总蛋白、白蛋白、前白蛋白)水平均明显提高，差异有统计学意义(P<0.001);A组患者血清总蛋白水平显著升高，差异有统计学意义(P<0.05),而白蛋白、前白蛋白水平无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05);营养支持10 d后进行两组组间比较发现，B组各营养指标改善情况均优于A组，差异有统计学意义(P<0.001)。肠道并发症：B组患者胃潴留、腹泻及胃黏膜出血发生率明显低于A组，差异均有统计学意义(P<0.05)。影响预后指标：B组新发肺部感染率、呼吸机使用时间、抗生素使用时间、急性生理与慢性健康评分(acute physiology and chronic health evaluation, APACHEⅡ)明显优于A组，差异均有统计学意义(P<0.05);住院时间两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 与经鼻胃管加强营养比较，经鼻肠管途径提高神经重症患者营养指标效果较为显著，能降低并发症发生率，缩短抗生素使用时间，可能对患者预后有所改善。
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  4种方式治疗三叉神经第一支带状疱疹性神经痛的疗效比较

  张德新, 张桂友, 文松, 曹嵩

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 719-724. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0092

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  目的 对比研究临床常用的4种方式治疗三叉神经第一支带状疱疹性神经痛的疗效。方法 分析遵义医科大学附属医院疼痛科2020年7月至2023年7月诊断为三叉神经第一支带状疱疹性神经痛的病人52例，根据治疗方案分为4组，SNB组(眶上神经阻滞)10例，S-PRF组(眶上神经脉冲射频)12例，TG-PRF组(三叉神经节脉冲射频)13例，PNS组(眶上神经电刺激)17例。对比4组术前、术后NRS评分及疼痛爆发次数、普瑞巴林和曲马多用量、PSQI评分。结果 疼痛情况：与术前对比，4组患者术后1、4、12周的NRS评分及疼痛爆发次数较术前均降低(P<0.05)。组间对比，术后4周，SNB组NRS评分高于其他3组，PNS组评分最低(P<0.05));术后12周，PNS组NRS评分及疼痛爆发次数低于其他3组(P<0.05)。睡眠情况：与术前对比，4组患者术后1、4、12周的PSQI评分较术前均降低(P<0.05)。组间对比，术后12周，PNS组PSQI评分低于其他3组(P<0.05)。用药情况：与术前对比，只有PNS组术后12周的普瑞巴林用量较术前降低。组间对比，术后12周，PNS组普瑞巴林用量明显低于其他3组(P<0.05)。与术前对比，4组患者术后1、4、12周的曲马多用量较术前均降低(P<0.05)。组间对比，术后12周，PNS组曲马多用量明显低于其他3组。PNS组带状疱疹后遗神经痛(PHN)发生率低于其他3组(P<0.05)。结论 4种治疗方式均能缓解疼痛、改善睡眠、减少止痛药用量及降低PHN发生率，但从远期效果上看，眶上神经电刺激的效果优于其它3种治疗方式。
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  绞股蓝在治疗呼吸系统疾病中的应用

  张灵, 张倩茹, 刘代顺

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 725-735. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0093

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  绞股蓝不仅在传统医学中有着广泛应用，同时在现代科学研究中对呼吸系统疾病治疗方面也显示出独特的潜力。因此，本文综述了绞股蓝的植物分类学特征及其在民族医学中的历史用途，突出其在多种传统治疗中的角色。详细讨论了绞股蓝的植物化学特性，包括其主要活性成分的基础物质、来源及合成途径。深入分析了绞股蓝对呼吸系统疾病的治疗作用，同时结合网络药理学方法，揭示了其潜在的治疗机制和作用靶点。最后通过文献计量学分析，评估了近年来关于绞股蓝治疗呼吸系统疾病研究的趋势与发展。本文通过多角度综述，系统总结了绞股蓝治疗呼吸系统相关疾病的研究进展以及应用前景，为绞股蓝的临床研究和应用提供了理论基础和科学依据。
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  超声在胸膜疾病诊治中的临床应用进展

  蔡维玲, 申永春, 文富强

  遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 736-740. https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0095

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  胸膜疾病是临床上常见的疾病之一，其诊治仍存在一些难点，比如诊断的准确性有待提高、治疗难度大且容易复发等，给临床带来挑战。近年来，超声在胸膜疾病诊治领域的运用日益增多，从仅用于胸腔积液的发现与定位，到现在逐渐推广到临床胸腔操作的引导、临床疗效的预测与临床治疗的指导，在一定程度上影响了胸膜疾病的诊疗模式。本文就超声在胸膜疾病诊治中的临床应用进展进行综述，分析超声在胸膜疾病诊治方面的应用，探讨其优点和不足，以期为临床胸膜疾病的诊治提供新的思路和方法。