淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后保护效果评估

黄美容, 卢琴, 杨慧, 张宁晴, 闵迅, 黄健

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遵义医科大学学报 ›› 2024, Vol. 47 ›› Issue (07) : 653-658+665. DOI: 10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0090

淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后保护效果评估

  • 黄美容, 卢琴, 杨慧, 张宁晴, 闵迅, 黄健
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摘要

目的 表达纯化淋病奈瑟菌NHBA蛋白,通过鼻腔免疫途径制备其多克隆抗体并对NHBA抗血清的免疫保护效果进行评估。方法 构建NHBA蛋白原核表达菌株并进行目的蛋白的表达及纯化。小鼠随机分为2组:NHBA组:NHBA蛋白+霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂;磷酸盐缓冲液(PBS)组:PBS+CTB佐剂。通过对小鼠进行鼻腔免疫NHBA蛋白制备其多克隆抗体,ELISA测定免疫后血清中IgG抗体效价。蛋白免疫印迹法鉴定NHBA蛋白在淋病奈瑟菌菌株中的表达情况。利用血清杀菌活性实验、调理吞噬杀伤实验及抗体粘附抑制实验评估NHBA抗血清的免疫保护效果。结果 成功表达纯化NHBA蛋白。鼻腔免疫小鼠后血清中产生了高滴度的IgG抗体。蛋白印迹实验结果显示抗血清能识别淋病奈瑟菌菌株中天然表达的NHBA蛋白。血清杀菌活性实验和调理吞噬杀伤实验的有效杀菌滴度分别为1/200、1/400。抗体粘附抑制实验结果显示NHBA抗血清能有效抑制淋病奈瑟菌粘附ME-180细胞。结论 淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后获得的抗血清具有免疫保护效果,未来可以作为淋病奈瑟菌鼻黏膜疫苗的有效靶点。

关键词

淋病奈瑟菌 / 奈瑟菌肝素结合抗原 / 疫苗 / 鼻腔免疫 / 免疫保护

中图分类号

R759.2

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黄美容, 卢琴, 杨慧, 张宁晴, 闵迅, 黄健. 淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后保护效果评估. 遵义医科大学学报. 2024, 47(07): 653-658+665 https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2024.0090

基金

国家自然科学基金资助项目(NO:82260330)

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