2024年, 第45卷, 第03期　
刊出日期：2024-05-30

  

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  江苏近30年审定粳稻品种间的遗传多样性分析

  沈雨晴, 张晨雨, 纪萌萌, 陈玘, 杨华, 宋锦花, 冯嘉欣, 朱虹, 张亿, 吕甜, 冯志明, 胡珂鸣, 陈宗祥, 左示敏

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 1-16. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.001

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  采用79个SSR标记[包含《水稻真实性SSR鉴定标准》(GB/T 39917-2021)中推荐的48个标记]对江苏1989-2021年间审定和推广的230份粳稻品种进行遗传多样性分析。结果表明：79个SSR标记在供试材料中共扩增出599条多态性片段，单个标记平均检测出8个多态性位点(变幅为3～19个), 38个SSR标记在供试品种群体中具有较高多态性信息含量(PIC),平均为0.55 (变幅为0.009～0.813)。供试品种间的遗传相似系数均值为0.605 (变幅为0.330～0.971),显示江苏粳稻品种间的亲缘关系总体较近。对品种标记基因型数据进行聚类分析，供试粳稻品种被分为10个类群，其中第10类群品种数占比80.9%,绝大多数是最近5年育成的，说明江苏当前推广的粳稻品种间遗传多样性更低。中熟中粳品种间的遗传多样性总体上高于迟熟中粳、早熟晚粳和中熟晚粳这3种生态型，中熟晚粳品种与其他3种生态型品种间的遗传相似性最低。品种间遗传相似性随时间的推进呈现明显递增趋势，近5年育成的多数品种间的遗传相似性显著高于之前育成品种，且与10年前品种在遗传组成上已发生明显变化。就不同育成单位而言，嘉兴市农业科学研究院、太湖地区农业科学研究所、连云港市农业科学院、江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所及江苏省农业科学院宿迁农科所育成的品种之间以及与其他9个主要单位育成的品种之间存在较大的遗传差异。这一研究为江苏粳稻育种中亲本的选择及遗传多样性丰富的粳稻新品种选育提供理论参考。
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  2C类蛋白磷酸酶基因OsPP2C49调控水稻干旱和高温胁迫响应的机制研究

  朱子杰, 卜柳冰, 王雨鑫, 徐佳婷, 刘丹彤, 缪军

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 17-27. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.002

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  水稻是最重要的粮食作物之一，干旱、高温、盐等不利因素均会严重影响水稻产量。脱落酸(ABA)作为一种胁迫响应激素，参与调控多种非生物胁迫应答。以ABA信号组分A亚族2C类蛋白磷酸酶基因OsPP2C49为研究对象，探究其调控水稻干旱和高温胁迫的响应机制。结果表明：敲除OsPP2C49基因显著提高水稻在干旱和高温条件下的存活率，而过量表达会导致存活率显著降低。OsPP2C49的表达可被不同逆境胁迫诱导。OsbZIP10、OsbZIP40和OsbZIP42可结合OsPP2C49的启动子，激活OsPP2C49的转录。OsbZIP10、OsbZIP40和OsbZIP42的表达亦可被干旱和高温显著诱导，推测OsPP2C49在胁迫条件下的诱导表达是由不同bZIP转录因子介导的。这一研究可为培育耐旱和耐高温的水稻品种提供新的遗传信息。
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  稻秆规模化高效收储运体系建设与评价——以江西省恒湖垦殖场为例

  吴强建, 曲斌, 吁安, 邹华, 陈莎莎, 戴珍, 丁博文, 甄峰, 陈柳萌

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 28-35. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.003

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  为加快推进秸秆综合利用、健全秸秆收储运体系，以江西省恒湖垦殖场为研究对象，分别对稻秆收集、存储过程及经济成本进行调查研究，构建适宜万t以上规模稻秆的收储运体系。结果表明：（1）自然条件下晾晒第4 d田间稻秆含水率≤20%,打捆机可入场作业；（2）优化打捆机田间作业参数，保障稻秆质量稳定和安全储存(草捆密度≥150 kg·m^-3,含杂率≤5%);（3）优化稻秆堆场设计，提升堆储能力，保障堆场稻秆安全稳定；（4）随着储存时间的推移，稻秆的腐败程度逐渐增加，变异系数以纤维素含量最大，且无膜覆盖大于有膜覆盖，底层大于顶层和中层；（5）围绕稻秆收集、存储、运输等关键环节建立稻秆收储运体系经济模型，评估该体系经济成本，集中型机械收储运模式总经济成本约290元·t^-1。这一研究可为建设高效的秸秆收储运体系、秸秆综合利用产业发展提供技术支撑。
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  荞麦NRAMP基因家族鉴定及生物信息学分析

  张乐晶, 王亚娟, 程远芳, 王斌, 王佩瑾

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 36-43. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.004

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  为研究荞麦(Fagopyrum esculentum Moench)自然抗性相关巨噬细胞蛋白(NRAMP)家族成员结构与功能，借助生物信息学手段，从荞麦全基因组数据库中筛选并鉴定荞麦NRAMP家族基因序列，进而对该家族成员的蛋白质理化性质、基因结构、保守结构域、保守基序、亚细胞定位、磷酸化位点、系统进化关系、二级结构和三级结构进行分析。结果表明：在荞麦全基因组中共鉴定出10个NRAMP基因，命名为FeNRAMP1-FeNRAMP10,多数荞麦NRAMP家族成员蛋白质的氨基酸数介于361～605个，跨膜结构数4～12不等，且亚细胞定位除FeNRAMP10定位于液泡膜上外，其他均定位于细胞膜上。进化树分析结果表明，在进化上越接近于FeNRAMP,其基因结构和保守基序也更为相似。除FeNRAMP9蛋白不含有苏氨酸(Thr)磷酸化位点外，其余9个FeNRAMP蛋白的氨基酸序列均含有潜在的丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)磷酸化位点，大部分荞麦NRAMP蛋白的二级结构形式主要是α-螺旋。启动子元件分析表明，多数荞麦NRAMP基因启动子含有参与基因转录、光响应、激素响应等元件。
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  香樟bZIP基因家族鉴定及表达分析

  朱渊铭, 张培兰, 林宇清, 陈丝雨, 苏宝川, 邹双全

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 44-54+81. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.005

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  碱性亮氨酸拉链(bZIP)基因能响应多种非生物胁迫，为探究香樟(Cinnamomum camphora)bZIP基因是否具有调控非生物胁迫的能力，对其进行全基因组鉴定和系统进化分析，并分析其保守基序、基因结构、保守结构域、理化性质及顺式作用元件。结果表明：香樟中共有56个bZIP基因(CcbZIP),分为10个亚族。同一亚家族的基因保守基序相似，而不同亚家族的基因保守基序存在较大差异。56个CcbZIP基因不均匀地分布在12条染色体上，且存在片段复制事件，香樟与毛果杨(Populus trichocarpa)的共线基因最多。CcbZIP基因家族含有光响应元件最多，还含有大量干旱、低温、厌氧等非生物胁迫响应元件和激素类响应元件。表达量分析显示，土壤肥力差的环境下多数CcbZIP基因在枝和叶中高表达，施肥后土壤肥力增强而基因表达量降低。
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  虾原肌球蛋白联合脂多糖诱导的小鼠哮喘气道炎症模型的研究

  高翔, 莫艳, 朱嘉豪, 董耀, 陈永鑫, 徐良玉, 侯瑞涛, 方蕾

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 55-63. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.006

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  为明确脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)联合致敏原诱导的哮喘模型类型，建立虾原肌球蛋白(shrimp tropomyosin, ST)联合LPS诱导的小鼠哮喘气道炎症模型，并与卵清蛋白(ovalbumin, OVA)联合弗氏完全佐剂(complete Freund’s adjuvant, CFA)诱导的中性粒细胞哮喘模型或ST联合铝佐剂诱导的T2型嗜酸性粒细胞哮喘模型比较。结果表明：与对照组相比，ST联合LPS组小鼠肺组织气道炎症、气道上皮黏液分泌、肺泡灌洗液细胞总数均增加，肺泡灌洗液中以嗜酸性粒细胞为主，肺组织IL-17A含量和肺组织IL-1β、IL-5、IL-17A、Eotaxin、Mu5ac mRNA表达水平升高，肺组织气道上皮E-CDH蛋白表达水平和肺组织Cdh1 mRNA表达水平降低，气道周围ARG-1蛋白表达水平和肺组织Arg-1 mRNA水平升高，地塞米松给药能部分改善ST联合LPS诱导的气道炎症、黏液高分泌和细胞因子IL-17A表达水平，但对肺组织Cdh1、IL-5、IL-1β表达没有显著作用。综上，虾原肌球蛋白联合脂多糖小鼠模型是处于嗜酸性粒细胞哮喘型向中性粒细胞哮喘型过渡阶段的一种模型。
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  基于NLRP-3炎症小体探讨附子理中丸对伊立替康诱导的大鼠腹泻抗炎止泻作用

  罗菲, 郭建宏, 窦玉玉, 覃洪含, 唐汉庆, 李嘉慧, 梁凌玲, 潘斌, 黄永毅

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 64-71. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.007

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  为探讨附子理中丸通过NLRP-3炎症小体途径的抗炎止泻作用机制，将Wistar大鼠分为对照组、模型组、小檗碱组、IKK-β抑制剂组（简称抑制剂组）以及附子理中丸低、中、高剂量组(分别为10、20、40 g·kg^-1)。模型组、小檗碱组、抑制剂组及低、中、高剂量组经腹腔注射伊立替康（irinotecan, CPT-11）溶液，建立CPT-11诱导的大鼠腹泻模型。建模后，小檗碱组、抑制剂组及低、中、高剂量组灌胃相应的药物，模型组、对照组给予等容量的蒸馏水，连续灌胃30 d后取材检测相关指标。结果表明：与对照组相比，模型组结肠组织病理变化及其超微结构损伤严重；IL-1β、IL-18、TNF-α水平及NLRP-3、Caspase-1、ASC、GSDMD的mRNA相对表达量和NLRP-3、Caspase-1、ASC蛋白相对表达量均显著升高。与模型组相比，各给药组均可不同程度地改善上述指标和病理变化。这一研究提示附子理中丸可抑制NLRP-3炎症小体的激活，从而改善肠道炎症与腹泻。
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  鼠抗人DCP单克隆抗体的类型转换与表达

  廖凯, 张智萍, 丁笠, 张新跃

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 72-81. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.008

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  为建立抗体类型转换和表达体系，以最新制备的1株IgM类抗体——鼠抗人DCP单克隆抗体7C2为研究对象，首先从7C2杂交瘤细胞中克隆IgM轻重链可变区，再将IgM可变区序列与鼠IgG1恒定区序列融合克隆至真核表达载体，并转入293细胞系中。利用蛋白质免疫印迹技术，成功检测到IgG1抗体在细胞内的表达并分泌至培养上清。在进一步优化密码子、宿主细胞和信号肽等影响抗体表达的因素后，建立了双质粒瞬转和基于双顺反子表达方式的稳转表达体系，可用于将鼠源IgM类抗体转换为IgG类抗体并进行表达。该研究为拓展非IgG类抗体的应用范围提供重要途径，同时为提高重组抗体在真核体系中的表达效率提供参考。
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  近红外技术结合参数轨迹策略快速评价土茯苓质量

  吕蒙莹, 万夏芸, 帅锦浩, 王杨, 刘晓庆, 严欢, 赵娜

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 82-89. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.009

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  为建立一种能快速测定土茯苓中落新妇苷含量的方法，运用近红外漫反射光谱技术(NIRs)采集不同产地土茯苓NIR光谱，并采用高效液相色谱(HPLC)法测定土茯苓中主要生物活性成分落新妇苷含量。利用偏最小二乘法(PLS),结合NIR光谱和有效成分含量建立落新妇苷的定量模型。针对落新妇苷PLS模型的参数优化，提出一种参数轨迹优化策略，该策略集成4种预处理方法、潜变量因子数设置为1～10、间隔偏最小二乘法(iPLS)和反向间隔偏最小二乘法(BiPLS)的变量筛选方法。结果表明：参数轨迹策略比常用的分步策略更高效准确，通过新策略得到3个预测性能较好的模型。此外，还建立了偏最小二乘判别分析(PLS-DA)模型来区分土茯苓样品的地理来源。综上，NIR结合PLS模型的参数轨迹策略可作为一种快速、可靠和经济的原料检测和产品质量控制方法。
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  不同饵料对“六月黄”中华绒螯蟹食用品质和风味物质的影响

  张莎莎, 汪涛, 夏杰, 王剑桥, 徐峻杰, 董小敬, 苗淑彦, 孙龙生

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 90-100. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.010

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  为比较不同饵料对“六月黄”中华绒螯蟹(简称六月黄)食用品质和风味物质的影响，分别选取投喂配合饲料、冰鲜鱼、黑水虻[(亮斑扁角水虻(Hermetiaillucens linnaeus)]和冰鲜鱼+黑水虻(简称鱼+虻) 4组的六月黄，测定其食用品质和风味物质等指标。结果表明：冰鲜鱼组肥满度显著高于其他组，鱼+虻组肝胰腺指数显著低于其他组；冰鲜鱼组和配合饲料组体节肉蛋白质含量显著高于其他组，而鱼+虻组附肢肉蛋白质含量显著高于配合饲料组和黑水虻组；肝胰腺中脂肪含量远高于肌肉且冰鲜鱼组和鱼+虻组显著高于配合饲料组，而冰鲜鱼组和黑水虻组肝胰腺水分含量显著低于配合饲料组；冰鲜鱼组肌肉和肝胰腺中二十二碳六烯酸(DHA)含量及n-3/n-6值均显著高于其他组；肌肉和肝胰腺中主要呈味核苷酸以腺苷酸(AMP)为主，冰鲜鱼组肌肉中肌苷酸(IMP)含量显著高于其他组，配合饲料组体节肉鸟苷酸和腺苷酸滋味活性值(TAV)与冰鲜鱼组相当，配合饲料组肝胰腺中鸟苷酸和腺苷酸的TAV值最高；配合饲料组和冰鲜鱼组附肢肉味精当量(EUC)显著高于其他两组，鱼+虻组肝胰腺EUC显著低于其他3组；挥发性物质测定结果表明，肌肉和肝胰腺中均含有癸醛和壬醛，而反式-2,4-癸二烯醛、反-2-辛烯醛、苯甲醛和2-壬酮等物质只在肝胰腺中出现，其中冰鲜鱼组肝胰腺中十一醛和苯甲醛明显高于其他组。综上，投喂冰鲜鱼对提升六月黄中华绒螯蟹的食用品质和风味有明显优势。
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  毛头鬼伞发酵产物抑菌特性的初步研究

  周九玲, 崔月花, 李青, 耿士忠

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 101-107+129. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.011

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  为探究毛头鬼伞发酵产物的抑菌特性，采用管碟法测定毛头鬼伞胞内和胞外发酵产物对4种食源性致病菌的抑菌活性。结果表明：毛头鬼伞发酵产物中主要抑菌成分为胞外产物，且相同浓度的胞外产物对革兰阳性菌单核细胞增生李斯特菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果显著好于革兰阴性菌大肠埃希菌和沙门菌；对单核细胞增生李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肠炎沙门菌的最低抑菌浓度分别为15.60、31.25、32.15、62.50 mg·mL^-1;在酸性环境中胞外产物具有抑菌活性，且以pH 3.5时活性最高；不同温度处理胞外产物后对4种致病菌的抑菌活性无显著变化；胞外产物中极性部分对4种致病菌的抑菌活性强于弱极性部分。经Cleanert IC-RP25 （简称RP）柱处理后，结果显示抑菌活性物质主要为小分子物质。综上，该研究为今后毛头鬼伞发酵产物中抑菌活性物质的分离纯化提供了依据，也为毛头鬼伞发酵产物的开发利用奠定了理论基础。
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  青海省蕨麻根腐病调查及病原真菌分离鉴定

  李军乔, 李晨芹, 闫格

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 108-119. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.012

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  蕨麻是我国青藏高原特有的植物资源，近年来根腐病对蕨麻生产构成了一定威胁。2019-2021年6～7月，分别对青海西宁市、海北藏族自治州和黄南藏族自治州等地成株期蕨麻根腐病进行调查，对具有典型症状特征的病样，采用组织分离法和单孢分离法获得病原真菌，以柯赫氏法则对其致病性进行验证；通过形态学和分子生物学等方法对蕨麻根腐病病原真菌进行鉴定。结果表明：蕨麻根腐病具有典型症状特征(黑斑、褐变、软化、腐烂、附着菌丝),病害多发生于蕨麻块根膨大期及收获期；蕨麻根腐病病情分级标准可分为0-5个等级；不同种植年限、不同地区蕨麻根腐病病情存在一定的差异，株发病率和病情指数与种植年限均呈正相关；分离鉴定发现病原真菌均为镰刀菌属(Fusarium),包含锐顶镰刀菌(F.acuminatum)、三线镰刀菌(F.tricinctum)、变红镰刀菌(F.incarnatum)、燕麦镰刀菌(F.avenaceum)、木贼镰刀菌(F.equiseti)和念珠镰刀菌(F.torulosum)。该研究为蕨麻根腐病的诊断及防控提供了基础理论依据。
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  樱桃果实采后致腐病原菌鉴定及其致病性研究

  孙文馨, 经盛红, 施恒松, 杨丽娜, 朱峰, 董京萍, 纪兆林

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 120-129. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.013

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  为有效防止采后樱桃腐烂，减少果品损失，先后对4批次室温贮藏的我国山东和美国产地新鲜健康甜樱桃进行观察，对初现病斑和腐烂樱桃果进行病原菌分离，采用分子生物学方法对其菌株进行鉴定，并接种健康樱桃果实进行致病性测定。结果表明：4批次从贮藏期开始腐烂的樱桃果实中共分离出12株真菌和16株细菌代表菌株，其中10株真菌具致病性，涉及6个种，分别鉴定为Alternaria sp.、Fusarium sp.、Epicoccum sorghinum、Dothiorella viticola、Nothophoma quercina和Paraconiothyrium brasiliense; 8株细菌具一定的致病性但致病力较弱，涉及6个种，分别鉴定为Pantoea sp.、Bacillus sp.、Tatumella sp.、Gluconobacter sp.、Phaseolibacter sp.和Sphingomonas sp.。不同产地采后腐烂樱桃分离的真菌和细菌种类不同，其致病力也存在差异。这一研究可为樱桃采后致腐病原的进一步防治以及采后防腐保鲜技术研发提供参考。
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  草莓红叶病病原鉴定及其生物学特性研究与防控药剂筛选

  凌焕贵, 杨峰, 尹俞蓉, 陈宸, 陈夕军

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 130-139. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.014

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  红叶病是一种新发现的草莓真菌病害，近年各地均有发生，给草莓生产造成严重损失。为明确草莓红叶病致病菌种类及其生物学特性，探究病原菌侵入方式，并筛选防控草莓红叶病的化学药剂，采集辽宁丹东地区的草莓红叶病样品，利用组织分离、孢子悬浮液接种、形态学与分子生物学鉴定等方法明确其病原菌种类及侵染方式，探索室内条件下温度、pH、碳源和氮源对病原菌生长的影响，测定6种杀菌剂对病原菌的毒力。结果表明：草莓红叶病的致病菌为蔷薇新拟盘多毛孢（Neopestalotiopsis rosae）,可通过伤口侵入；N.rosae在25℃、pH 7.0条件下最适合生长，以可溶性淀粉、葡萄糖或蔗糖为碳源，以牛肉膏或硫酸铵为氮源；咪鲜胺、咯菌腈、吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑和戊唑醇对N.rosae的抑制效果较好，EC₅₀值分别为0.022 8、0.087 3、1.263 6、3.123 9和5.304 6μg·mL^-1,嘧菌酯效果较差，EC₅₀值为120.482 3μg·mL^-1。这一研究为草莓红叶病的防控提供理论依据。
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  紫光对设施草莓朱砂叶螨种群的控制作用

  郑佳寅, 曲文雅, 陈向荣, 吴晓霞, 赵明, 高红胜, 周福才

  扬州大学学报（农业与生命科学版）. 2024, 45(03): 140-146. https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.015

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  朱砂叶螨是草莓上重要害虫，非化学控制是草莓绿色生产的重要手段。为探讨紫光对朱砂叶螨的驱避作用，利用计算机模拟RGB值与虚拟光波长的关系，筛选对朱砂叶螨有驱避作用的最佳光波长。采用波长410 nm的紫光照射草莓植株，设置照射时段00:00-06:00、06:00-12:00、12:00-18:00和18:00-24:004个处理和不同光照时间，研究不同照射时段和光照时间对朱砂叶螨的驱避作用及对发育历期的影响，以无紫光照射为对照。在设施草莓植株上放置紫色灯带，每天18:00-24:00开灯，每7 d调查1次草莓上朱砂叶螨虫量，计算校正虫口减退率。结果表明：朱砂叶螨对波长410 nm光的选择率最低(3.89%)。每天18:00-24:00时段紫光照射对草莓朱砂叶螨的驱避作用最强，校正虫口减退率显著高于其他时段。紫光对盆栽草莓朱砂叶螨有较好的驱避作用，紫光照射7 d后朱砂叶螨校正虫口减退率达69.33%,不同叶位的校正虫口减退率之间无显著差异。紫光照射草莓叶片8 d后，朱砂叶螨发育历期较对照延长28.01%。紫光对设施草莓上朱砂叶螨有较好的驱避作用，对照草莓上朱砂叶螨数量是紫光照射的2.38倍，其校正虫口减退率与光照时间呈显著正相关。综上，紫光对草莓朱砂叶螨有较强的驱避作用，并能延长朱砂叶螨的发育历期，每天18:00-24:00使用紫光照射对设施草莓上朱砂叶螨有较好的控制作用。