鼠抗人DCP单克隆抗体的类型转换与表达

廖凯, 张智萍, 丁笠, 张新跃

扬州大学学报(农业与生命科学版) ›› 2024, Vol. 45 ›› Issue (03) : 72-81. DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.008

鼠抗人DCP单克隆抗体的类型转换与表达

  • 廖凯, 张智萍, 丁笠, 张新跃
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摘要

为建立抗体类型转换和表达体系,以最新制备的1株IgM类抗体——鼠抗人DCP单克隆抗体7C2为研究对象,首先从7C2杂交瘤细胞中克隆IgM轻重链可变区,再将IgM可变区序列与鼠IgG1恒定区序列融合克隆至真核表达载体,并转入293细胞系中。利用蛋白质免疫印迹技术,成功检测到IgG1抗体在细胞内的表达并分泌至培养上清。在进一步优化密码子、宿主细胞和信号肽等影响抗体表达的因素后,建立了双质粒瞬转和基于双顺反子表达方式的稳转表达体系,可用于将鼠源IgM类抗体转换为IgG类抗体并进行表达。该研究为拓展非IgG类抗体的应用范围提供重要途径,同时为提高重组抗体在真核体系中的表达效率提供参考。

关键词

单克隆抗体 / 基因工程 / 抗体类型转换 / 表达条件优化

中图分类号

R392

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廖凯, 张智萍, 丁笠, 张新跃. 鼠抗人DCP单克隆抗体的类型转换与表达. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2024, 45(03): 72-81 https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2024.03.008

基金

江苏省研究生科研创新计划项目(KYCX21-3206)

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