为了解我国广州地区犬流感病毒(canine influenza virus, CIV)的流行特征及其潜在的公共卫生风险，本研究采集具有流感样症状的宠物犬鼻拭子，利用犬肾细胞(MDCK)培养分离病毒，并采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对分离株进行鉴定；试验动物为4周龄BALB/c小鼠，分为对照组和感染组，分别滴鼻接种相同剂量的DMEM液和甲型流感病毒(IAV)病毒液，观察其临床症状并检测各脏器病毒载量，同时通过温度敏感性试验测定病毒的体外复制特性。结果：成功分离到一株H3N8亚型犬流感病毒(命名为IAV-2022-GZ),小鼠感染后表现为行动迟缓、被毛粗乱、体重降低，对照组(经DMEM处理)体重增长正常；感染组的小鼠肺脏和气管中病毒载量较高，提示该分离株在小鼠肺脏中可有效复制并对小鼠产生一定的致病潜力；细胞敏感性试验显示，该毒株对温度敏感，符合热敏感性毒株特征。综上，本研究对H3N8亚型犬流感病毒的部分生物学特性进行探究，为流感病毒跨物种传播风险评估及综合防控提供了参考数据。