海门山羊MSTN基因克隆、生物信息学分析及单碱基编辑的研究

夏潇潇, 王佳琳, 李玲, 佰伍加, 宋志贤, 岳恒, 曹少先, 袁玉国

畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (05) : 24-30.

海门山羊MSTN基因克隆、生物信息学分析及单碱基编辑的研究

  • 夏潇潇, 王佳琳, 李玲, 佰伍加, 宋志贤, 岳恒, 曹少先, 袁玉国
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摘要

为探明海门山羊不同组织中肌肉生长抑制素(MSTN)基因表达规律及其编码蛋白结构特点,通过克隆海门山羊MSTN基因CDS序列并分析其生物特点,运用实时荧光定量PCR技术分析MSTN基因在不同组织中的表达水平,在MSTN基因第2、3外显子上设计3个单碱基编辑靶位点,将构建的sgRNA质粒分别与胞嘧啶碱基编辑器YE1-BE3-FNLS电转入培养的海门山羊胎儿成纤维细胞中,筛选48 h后提取细胞基因组DNA,对PCR扩增靶位点序列进行Sanger测序和TA克隆分析。结果:海门山羊MSTN基因的CDS序列编码375个氨基酸,具有高度保守性。海门山羊不同组织中MSTN基因表达水平存在差异,其中骨骼肌的表达量最高;3条sgRNA均可在MSTN基因外显子上进行单碱基编辑,编辑效率分别为25%、37%和29%。结论:研究结果为进一步利用单碱基基因编辑技术培育MSTN基因突变海门山羊新品系提供了新的依据。

关键词

海门山羊 / 肌肉生长抑制素 / 单碱基编辑

中图分类号

S827

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夏潇潇, 王佳琳, 李玲, 佰伍加, 宋志贤, 岳恒, 曹少先, 袁玉国. 海门山羊MSTN基因克隆、生物信息学分析及单碱基编辑的研究. 畜牧与兽医. 2025, 57(05): 24-30

基金

江苏省种业振兴“揭榜挂帅”项目(JBGS[2021]025); 江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD); 高等学校学科创新引智计划项目(D18007); 扬州市市校合作专项(YZ2023205)

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