非洲猪瘟病毒蛋白pS183L的原核表达及多克隆抗体制备

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畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (02) : 112-117.

余群, 邹艳丽, 陈欢, 刘珊, 苗雨润, 任炜杰, 王振忠, 何佳依, 高晓宇, 钱莺娟, 吴晓东, 郑龙三

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摘要

旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pS183L的多克隆抗体。根据公布的毒株ASFV China/2018/Anhui XCGQ基因序列设计引物，酶切连接法构建重组质粒pET-28a-S183L;经鉴定成功的质粒转化大肠杆菌Rosetta,诱导表达后经镍柱亲和层析纯化后获得重组蛋白pS183L,免疫小鼠并制备抗pS183L的多克隆抗体。通过ELISA鉴定多克隆抗体效价大于1∶128 000;Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)表明，该多克隆抗体能识别293T和PK15细胞外源表达蛋白及ASFV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)内源表达蛋白。综上，本研究成功制备抗pS183L多克隆抗体，为深入研究ASFV pS183L的功能提供了关键生物材料。