旨在通过比较东佛里生奶绵羊精液冷冻前后代谢组学的差异，进一步探究精子冷冻损伤潜在机制，为优化奶绵羊精液冷冻稀释液配方提供一定的理论基础。用假阴道法采集精液混匀后分为12组，其中6组作为冻前组，6组作为冻后组。利用液相色谱质谱(LC-MS)联用的非靶向代谢组学技术检测分析差异代谢物，并基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对差异代谢物进行代谢通路富集分析。结果显示：东佛里生奶绵羊精液中共检测到4 113种代谢物；与冻前组相比，冻后组中70种代谢物发生了显著变化，主要为脂质和类脂分子，如甘油磷脂、鞘脂、异戊烯醇脂；根据差异代谢物在代谢通路上的富集程度筛选出2条代谢通路，分别为嘌呤代谢通路、癌症中的胆碱代谢通路。综上所述，精液冷冻过程显著影响了精子膜结构、脂类氧化分解以及腺苷代谢过程，从而导致精子受到损伤，精液品质下降。