为探究伪狂犬病病毒（pseudorbies virus, PRV）与猪肺泡巨噬细胞及小肠上皮细胞的相互作用，将PRV感染猪肺泡巨噬细胞株3D4/21及小肠上皮细胞株IPEC-J2,测定其感染后病毒滴度及0～48 h内各时间点病毒gE基因拷贝数，观察细胞病变（CPE）和免疫荧光，采用荧光定量PCR（RT-qPCR）、ELISA检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和白介素-6（IL-6）,对PRV感染后0、6、12、18 h样本进行转录组测序（RNA-seq）分析。结果显示：PRV感染3D4/21细胞及IPEC-J2细胞96 h时，病毒滴度分别为10^-8.16 TCID₅₀/0.1 mL、10^-7.76 TCID₅₀/0.1 mL,病毒gE基因拷贝数分别在18、24 h达到最大，CPE分别在10、12 h开始出现，病毒蛋白表达随感染时间延长逐渐增加；TNF-α、IL-6和IL-1β表达量在PRV感染后均逐渐升高；PRV感染3D4/21细胞及IPEC-J2细胞后，经RNA-seq联合分析，在0、6、12、18 h的4个时间点筛出2种细胞共有差异表达基因分别为8 313、6 999、6 693、5 714个，其中Ras关联域家族成员6（RASSF6）、锌指蛋白667（ZNF667）、激肽超家族蛋白3C（KIF3C）、早期应答基因3（IER3）显著变化基因可能与细胞炎症反应有关，且RT-qPCR验证与RNA-seq分析结果一致。基因本体论（GO）分析显示差异基因富集到细胞过程、生物调控、细胞代谢调节等；京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集显示差异基因主要涉及癌症通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、Toll样受体（TLRs）信号通路等，其中参与炎症的Toll样受体4（TLR4）-髓样分化因子88（MYD88）-核转录因子кB（NF-кB）通路验证结果与KEGG通路分析数据变化趋势总体一致。提示：PRV感染会影响3D4/21细胞及IPEC-J2细胞的炎症反应。本研究为进一步探索PRV的致病机制提供了参考。