基于P32蛋白的山羊痘病毒抗体荧光微球检测方法的建立

孟卫芹, 王金良, 吴信明, 唐娜, 李通, 石竞楠, 董帅, 沈志强

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畜牧与兽医 ›› 2024, Vol. 56 ›› Issue (04) : 89-94.

基于P32蛋白的山羊痘病毒抗体荧光微球检测方法的建立

  • 孟卫芹, 王金良, 吴信明, 唐娜, 李通, 石竞楠, 董帅, 沈志强
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摘要

为建立一种山羊痘病毒(GTPV)抗体快速检测方法,试验将携带GTPV结构蛋白P32基因的重组质粒pET28a-P32转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后获得了重组蛋白,纯化后经Western blot鉴定表明该蛋白具有良好的特异性和反应原性。以荧光微球为标记材料对P32蛋白进行标记,通过优化反应条件制备了快速检测GTPV抗体的荧光微球免疫层析试纸条,并对其性能进行评价。结果:该试纸条与山羊副流感病毒3型(CPIV3)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)的阳性血清均无交叉反应;阳性血清稀释至800倍仍能检出阳性,敏感性较高;批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,稳定性较好;与ELISA检测方法对比的总符合率为92.5%。综上,本试验建立的荧光微球试纸条可用于GTPV抗体的快速检测和流行病学调查。

关键词

山羊痘病毒 / P32蛋白 / 荧光微球 / 抗体

中图分类号

S852.65

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孟卫芹, 王金良, 吴信明, 唐娜, 李通, 石竞楠, 董帅, 沈志强. 基于P32蛋白的山羊痘病毒抗体荧光微球检测方法的建立. 畜牧与兽医. 2024, 56(04): 89-94

基金

山东省羊产业技术体系岗位专家项目(SDAIT-10-07); 滨州市农社领域科技创新政策引导计划项目(2023SHFZ004)

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