猪萨佩罗病毒(PSV)VP1蛋白是位于病毒粒子表面的结构蛋白，发挥主要的抗原效应。为了弄清PSV HNHB-01株VP1基因的表达与分子特征，本研究设计针对VP1基因的特异性引物，通过RT-PCR扩增获得VP1基因，并重组到真核表达载体pCAGGS上，经Western blot、间接免疫荧光鉴定，成功表达VP1蛋白。随后基于PSV HNHB-01株全基因序列以及VP1基因序列与其他参考毒株的基因序列构建遗传进化树，分析遗传进化关系。结果表明：实验室分离的HNHB-01株与2017年分离的HNXX-01株亲缘关系最近，与日本株JPSV-1315关系接近；HNHB-01 VP1基因与国内2016-2017年流行的毒株HNXX-01、PSV-A2、JXXY-a2的VP1基因高度同源，与国外2009年流行的日本毒株JPSV1315的VP1基因亲缘关系较近；HNHB-01株VP1氨基酸与HNXX-01株VP1氨基酸同源性最高，同源性为99.32%。三级结构分析表明，VP1蛋白存在3条位于蛋白结构外侧的抗原表位区，对应的氨基酸序列分别为20～30 aa、90～100 aa和265～275 aa。本研究为PSV感染的诊断与预防提供依据，并为今后研究VP1基因的功能和开发疫苗奠定基础。