弓形虫529重复序列检测方法的比较

殷位刚, 朱银银, 杨佩才, 张洪英

畜牧与兽医 ›› 2023, Vol. 55 ›› Issue (12) : 111-116.

弓形虫529重复序列检测方法的比较

  • 殷位刚, 朱银银, 杨佩才, 张洪英
作者信息 +
History +

摘要

旨在通过比较针对弓形虫529 bp重复序列片段(Rep-529)的环介导等温扩增(LAMP)和荧光定量PCR(qPCR),筛选出较优的弓形虫DNA检测方法,并初步应用于宠物猫弓形虫感染检测。试验以含有弓形虫Rep-529的质粒作为模板,比较文献报道和自主设计的引物组的最低检测限,并用其他病原DNA进行交叉反应性测试,用筛选出的最优引物组对宠物猫粪中弓形虫DNA进行检测。结果表明:以包含Rep-529的质粒为模板比较检出限,LAMP 529-11引物组检测限最低,为10~3 copies/μL;其次为文献报道的LAMP RE引物组和qPCR引物组,检测限均为10~4 copies/μL;LAMP 529-3和2021引物组的检测限最高,均为10~5 copies/μL;各引物组对隐孢子虫、贾第鞭毛虫、旋毛虫、大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、细小病毒DNA均无扩增;用LAMP 529-11引物组,对39只宠物猫弓形虫总检出率为33.33%(13/39),其中29份粪便中检出11份阳性(37.93%,11/29),10份肛拭子中检出2份阳性(20.00%,2/10)。总之,以弓形虫Rep-529重复序列为靶基因,本研究筛选获得的LAMP 529-11引物组快速、敏感且特异,在30 min内对弓形虫DNA进行有效扩增;用该法检测发现,33.33%的宠物猫正在排出卵囊,对环境和人类具有较大的潜在污染和传染风险。

关键词

弓形虫 / 感染 / 分子监测 / LAMP / qPCR

中图分类号

S852.7

引用本文

导出引用
殷位刚, 朱银银, 杨佩才, 张洪英. 弓形虫529重复序列检测方法的比较. 畜牧与兽医. 2023, 55(12): 111-116

基金

江苏省地病协会项目(X202130)

评论

Accesses

Citation

Detail

段落导航
相关文章

/