研发一种水包油型灵芝多糖纳米乳(GLP-NE)佐剂，初步应用于非洲猪瘟病毒P72重组抗原制剂研究，以提升P72免疫制剂稳定性和有效性。本研究利用伪三元相图法确定最佳组方，采用剪切搅拌、超声2种乳化方法筛选制备GLP-P72纳米乳的工艺参数，并检验其安全性、物理性状及免疫效果。结果表明，灵芝多糖纳米乳佐剂为水包油型且符合纳米乳佐剂要求，粒径为(167.4±0.1)nm,黏度为4.2 s·(0.4 mL)~(-1),1 500 r·min~(-1)剪切搅拌20 min可制备出较为稳定的纳米乳。该佐剂经济有效，乳化方法简单稳定，可使GLP-P72纳米乳具有较好的稳定性和免疫效果，并对中药成分纳米乳佐剂的研发和制备提供借鉴。