非洲猪瘟病毒数字PCR检测方法的建立及比较

赵晓娜, 谭笑, 朱忠武, 周萍, 祝贺, 陆冠亚, 史敏, 沈炜, 唐泰山, 祝长青, 孔繁德

畜牧与兽医 ›› 2023, Vol. 55 ›› Issue (10) : 89-94.

非洲猪瘟病毒数字PCR检测方法的建立及比较

  • 赵晓娜, 谭笑, 朱忠武, 周萍, 祝贺, 陆冠亚, 史敏, 沈炜, 唐泰山, 祝长青, 孔繁德
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摘要

为建立一种特异性强、灵敏度高、重复性好的非洲猪瘟病毒(ASFV)检测方法,根据ASFV保守区域设计引物探针,在荧光PCR检测方法的基础上,建立了检测ASFV的微滴数字PCR方法,对其特异性及线性关系进行评估,以阴性样品和低拷贝样品分别测定该方法的空白检测限(LOB)和最低检测限(LOD)。结果显示:该方法有较好的线性关系(R~2=0.999),与其他6种猪常见病毒及5种动物组织无交叉反应,LOB为1.6 copies/μL,LOD为3 copies/μL。利用建立的数字PCR、C1荧光PCR,以及世界动物卫生组织(WOAH)提供的荧光PCR和常规PCR方法对50份不同来源的样品进行检测,结果表明,建立的ASFV数字PCR检测方法具有高效、特异、灵敏等特点,可用于非洲猪瘟监测和口岸动物疫病防控。

关键词

非洲猪瘟 / 数字PCR / 荧光PCR

中图分类号

S852.65

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赵晓娜, 谭笑, 朱忠武, 周萍, 祝贺, 陆冠亚, 史敏, 沈炜, 唐泰山, 祝长青, 孔繁德. 非洲猪瘟病毒数字PCR检测方法的建立及比较. 畜牧与兽医. 2023, 55(10): 89-94

基金

海关总署科研项目(2019HK018,2020HK160,2022HK041); 南京晓庄学院项目(2019NXY23)

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