旨在分离鉴定牛场具有呼吸道症状奶牛的溶血性曼氏杆菌病原及其分离株的血清型、耐药基因和毒力基因携带情况。本研究对531份呼吸道症状奶牛鼻拭子进行细菌分离纯化，将疑似菌株进行lktC基因鉴定，同时进行血清型鉴定和16S rRNA测序分析，利用10种抗生素进行耐药性试验，并选择11种毒力基因研究溶血性曼氏杆菌毒力基因的携带情况，利用小鼠攻毒试验确定其致病性。结果显示：共分离出16株溶血性曼氏杆菌，血清型鉴定为A2型2株、A6型4株，A1型7株，未定型3株；药敏试验发现，分离株均对氨苄西林和红霉素耐药；毒力基因鉴定显示16株溶血性杆菌中14株均携带11种毒力因子；致病性试验发现，菌株2114F8、2020Y1和2010Q5接种后小鼠后，小鼠于36 h内陆续死亡，从死亡小鼠肺中检测到溶血性曼氏杆菌。本研究结果为溶血性曼氏杆菌引起的牛呼吸道疾病综合征的防控提供了理论依据。