养殖鲫鲤疱疹病毒2型的鉴定及病毒囊膜蛋白ORF131多抗的制备

耿金柱, 董雨豪, 黄昊, 范志明, 万夕和, 刘永杰

畜牧与兽医 ›› 2023, Vol. 55 ›› Issue (06) : 69-75.

养殖鲫鲤疱疹病毒2型的鉴定及病毒囊膜蛋白ORF131多抗的制备

  • 耿金柱, 董雨豪, 黄昊, 范志明, 万夕和, 刘永杰
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摘要

为了解鲤疱疹病毒2型(cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2)在南京地区养殖场鲫鱼中的发病情况,对南京某渔场疑似CyHV-2感染鱼,采集鳃、肾脏等组织进行解旋酶基因(hel)PCR扩增测序及遗传变异分析;通过蔗糖密度梯度离心从发病鲫鱼组织中提纯病毒粒子,电镜观察其形态;对CyHV-2的10种囊膜蛋白编码基因进行测序,并基于生物信息学分析选择理想的囊膜蛋白进行原核表达,免疫小鼠制备抗血清。结果显示:患鱼组织hel基因检测阳性,其序列与参考株ST-J1毒株hel基因序列(GenBank登录号:JQ85364)高度同源(99.67%),并位于同一进化分支;利用蔗糖密度梯度离心结合Western blot检测发现,病毒粒子存在于40%~46%蔗糖层,电镜观察显示直径在160 nm左右;10种囊膜蛋白中开放阅读框131 (ORF131)囊膜蛋白具有一段连续B细胞表位且抗原性良好,将ORF131原核表达、免疫小鼠后制备的抗血清ELISA效价达1∶4 000。本研究为南京地区CyHV-2感染的检测和防控提供了依据。

关键词

鲤疱疹病毒2型 / 鉴定 / 病毒纯化 / 囊膜蛋白 / 抗体制备

中图分类号

S943

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耿金柱, 董雨豪, 黄昊, 范志明, 万夕和, 刘永杰. 养殖鲫鲤疱疹病毒2型的鉴定及病毒囊膜蛋白ORF131多抗的制备. 畜牧与兽医. 2023, 55(06): 69-75

基金

江苏省现代农业产业技术体系建设项目(JATS[2021]417)

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