为确定新疆塔城地区某奶牛场部分断奶犊牛出现咳嗽、流脓性鼻涕、腹泻等症状的发病病因，本试验通过对采集到的发病犊牛鼻拭子样品进行分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因和oppD/F基因PCR扩增与测序、药敏试验等。分离培养显示3株分离株在改良Thiaucourt's琼脂培养基平板上生长出典型的“煎蛋样”菌落，狄氏染色菌落中心呈深蓝色。生化试验中分离株不发酵葡萄糖与甘露醇，不水解精氨酸，不分解尿素，明胶液化试验为阴性。PCR扩增分离株16S rRNA基因测序结果显示，分离株与GenBank数据库中牛支原体16S rRNA基因序列的相似性在98.73%以上；牛支原体特异性基因oppD/F阳性且相似性达99.74%以上。通过药敏试验从9种药物里选择出替加环素、红霉素2种最为敏感的药物。研究结果表明，造成此次犊牛肺炎的病原菌为牛支原体，为临床防治牛支原体病提供了参考。