中国高校科技期刊信息汇聚平台

2024年, 第44卷, 第08期　
刊出日期：2024-08-20
  

  • 全选
    |
  • 清肾颗粒通过调控外泌体、miR-330-3p以及CREBBP表达抑制小鼠肾纤维化
    戴荣, 曹泽平, 刘传娇, 葛永, 程梦, 王伟丽, 陈义珍, 张磊, 王亿平
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1431-1440.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨清肾颗粒对腺嘌呤诱导的肾纤维化小鼠模型及尿酸刺激下NRK-49F细胞的作用及其调控外泌体、miR-330-3p和CREBBP的机制。方法 动物实验：构建腺嘌呤诱导的肾纤维化小鼠模型，分为正常组、模型组和清肾颗粒组（8.0 g·kg-1·d-1）,6只/组，灌胃12周。采用尾静脉注射腺相关病毒载体，实验结束后收集双侧肾组织。观察小鼠肾组织外泌体标记蛋白CD9,Hsp70,TSG101蛋白水平变化；Western blotting及免疫荧光检测小鼠肾组织Col-III、α-SMA、FN和E-cad表达变化；HE和Masson染色观察小鼠肾组织病理学变化。细胞实验：构建尿酸刺激下的NRK-49F细胞模型（尿酸400μmol/L,SD大鼠灌胃制备清肾颗粒含药血清用于细胞实验，分为正常组、模型组和清肾颗粒含药血清组。观察NRK-49F细胞中外泌体标记蛋白CD9,Hsp70,TSG101蛋白水平变化；Western blotting及免疫荧光检测NRK-49F细胞中Col-III、α-SMA、FN和E-cad表达变化；双荧光素酶报告基因检测miR-330-3p与CREBBP靶向关系；RT-qPCR和Western blotting检测NRK-49F细胞中miR-330-3p与CREBBP表达变化。结果 动物实验中，Western blotting结果显示，与正常组相比，模型组CD9、Hsp70、TSG101蛋白水平升高（P<0.05）；与模型组相比，清肾颗粒组CD9、Hsp70、TSG101蛋白水平降低（P<0.05）。Western blotting及免疫荧光结果显示，与正常组相比，模型组Col-III、α-SMA、FN表达增加，E-cad表达减少（P<0.05）；与模型组相比，清肾颗粒组Col-III、α-SMA、FN表达减少，E-cad表达增加（P<0.05）。肾脏病理检查显示，清肾颗粒可以明显减轻小鼠肾组织纤维化（P<0.05）。RT-qPCR结果显示，尾静脉注射腺相关病毒病毒载体抑制miR-330-3p表达，增加CREBBP水平，减轻肾纤维化（P<0.05）。双荧光素酶报告基因结果显示，CREBBP是miR-330-3p的靶点（P<0.05）。RT-qPCR和Western blotting结果显示，与正常组相比，模型组miR-330-3p表达增加，CREBBP表达减少（P<0.05）；与模型组相比，清肾颗粒组miR-330-3p表达减少，CREBBP表达增加（P<0.05）。细胞实验结果与动物实验结果趋势一致。结论 清肾颗粒通过干预外泌体，降低miR-330-3p水平，增加CREBBP表达抑制肾纤维化。
  • 开心散通过减轻前额叶皮质铁死亡缓解小鼠的阿霉素化疗性抑郁
    欧阳明子, 崔佳琦, 王慧, 梁正, 皮大锦, 陈利国, 陈前军, 吴迎朝
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1441-1449.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 明确中药复方开心散缓解乳腺癌阿霉素化疗性抑郁的疗效，并分析其药理机制。方法 将40只雌性BALB/c小鼠通过原位注射4T1细胞建立乳腺癌小鼠模型，将小鼠随机分为对照组、模型组、开心散低剂量组和开心散高剂量组，10只/组。通过旷场试验和高架十字迷宫实验行为学分析、抑郁相关因子血清学检测、转录组学分析、透射电镜病理分析和铁死亡相关因子检测分析阿霉素诱导的化疗性抑郁产生的病因以及开心散的作用机制。利用SH-SY5Y细胞系构建体外模型并使用铁死亡抑制剂Fer-1进行阳性对照，验证动物实验结果。结果 开心散显著逆转阿霉素化疗所致的抑郁样行为（P<0.001）、逆转抑郁相关血清学的改变（P<0.05）；转录组学结果显示，开心散缓解化疗性抑郁与调控前额叶皮质组织氧化应激、脂质代谢和铁离子结合等过程有关；病理学分析、铁死亡相关因子检测结果显示，开心散能减轻阿霉素化疗所致的前额叶皮质组织铁死亡（P<0.01）。体外实验结果也显示，开心散含药血清和铁死亡抑制剂均能逆转阿霉素诱导的神经细胞铁死亡（P<0.001）。结论 开心散通过减轻乳腺癌阿霉素化疗所致的大脑前额叶皮质组织铁死亡，进而缓解化疗性抑郁。
  • 黄芩清热除痹胶囊通过PTEN/PI3K/AKT信号通路改善痛风性关节炎大鼠的炎症反应及尿酸、脂质代谢失衡
    张先恒, 刘健, 韩琦, 陈一鸣, 丁香, 陈晓露
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1450-1458.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探究黄芩清热除痹胶囊（HQC）对痛风性关节炎（GA）大鼠炎症反应及尿酸、脂质代谢的影响，并探讨其可能机制。方法 随机将60只SD大鼠分为6组：正常组，模型组，HQC低、中、高剂量组，秋水仙碱组（n=10）；以单钠尿酸盐注射右踝关节腔进行GA大鼠造模，HQC低、中、高剂量组及秋水仙碱组予相应剂量药物灌胃，模型组予等量生理盐水，连续7 d。造模后4、8、24、48、72 h检测各组大鼠足趾肿胀度；HE染色法进行滑膜组织学分析；ELISA检测血清中白细胞介素（IL）-10、IL-18、肿瘤坏死因子（TNF）-α、转化生长因子（TGF）-β1、脂联素（APN）、瘦素（LP）、抵抗素（RS）、内脂素（VF）的表达，检测滑膜中APN、LP、RS、VF的表达；生化法检测血清中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、血尿酸（BUA）的水平；RT-qPCR检测滑膜中磷酸酶与紧张素同源物（PTEN）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(AKT) mRNA的表达；Western blotting检测PTEN、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组足趾肿胀度升高（P<0.05），且在48 h达到高峰；HE染色显示大量炎性细胞浸润和滑膜组织增生；TNF-α、TGF-β1、IL-18、TC、TG、LP、RS、VF、BUA、p-PI3K、p-AKT的表达增加（P<0.05）,IL-10、APN、HDL-C、PTEN的表达降低（P<0.05）。与模型组比较，HQC和秋水仙碱可降低TNF-α、TGF-β1、IL-18、TC、TG、LP、RS、VF、BUA、p-PI3K、p-AKT的表达（P<0.05），升高IL-10、APN、HDL-C、PTEN的表达（P<0.05），减轻滑膜组织病理损伤，改善足趾肿胀度。结论 HQC可改善GA大鼠炎症反应及尿酸、脂质代谢失衡，可能与抑制PTEN/PI3K/AKT信号通路有关。
  • 康柏西普可逆转TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞发生上皮间质转化：基于调节TGF-β/Smad信号通路
    朱梦云, 王剑锋
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1459-1466.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨康柏西普（conbercept）对转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导人晶状体上皮细胞（HLECs）发生上皮间质转化（EMT）的逆转机制。方法 体外培养HLEC-SRA01/04细胞并分为对照组、TGF-β2组、conbercept组、TGF-β2+conbercept组。采用MTT法、流式细胞术、划痕实验、Transwell检测细胞增殖、凋亡与迁移，Western blotting和qRT-PCR检测EMT相关上皮细胞标记物E-Cadherin、α-SMA、snail、细胞外基质和TGF-β/Smad信号通路相关基因的表达。结果 TGF-β2+conbercept组EMT程度明显减轻，细胞间充质及细胞外基质标志物α-SMA、snail、collagenⅠ、collagenⅣ、FN1的表达量均明显减少，与TGF-β2组的差异有统计学意义（P<0.05）。上皮细胞相关标志物E-Cadherin的蛋白及mRNA的表达上调（P<0.05）。Transwell结果显示，与TGF-β2组相比，TGF-β2+conbercept组细胞迁移能力减弱（P<0.05）。此外，TGF-β2诱导HLEC-SRA01/04细胞发生EMT过程中发生Smad2/3磷酸化水平升高现象可被康柏西普抑制（P<0.01）。结论 康柏西普可能通过TGF-β/Smad信号通路抑制HLEC-SRA01/04细胞EMT过程，具有预防及治疗PCO的能力。
  • 血根碱通过调控Nrf2/NF-κB通路缓解小鼠溃疡性结肠炎
    赵娜, 沈梦迪, 赵睿, 奥迪, 骆泽谭, 张银亮, 徐志东, 范方田, 郑海伦
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1467-1475.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨血根碱（SA）对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）的作用机制。方法 随机将56只雄性C57BL/6小鼠分为空白对照组、模型组（DSS组）、SA低剂量组（DSS+SA-L,SA 1 mg/kg）、SA中剂量组（DSS+SA-M,SA 5 mg/kg）、SA高剂量组（DSS+SA-H,SA 10 mg/kg）、柳氮磺吡啶组（DSS+SASP,SASP 400 mg/kg）、SA高剂量组+Nrf2抑制剂ML385组（DSS+SAH+ML385,SA 10 mg/kg+ML385 30 mg/kg）,8只/组。除空白对照组外，均采用3.5%DSS诱导建立UC模型，SA干预组和柳氮磺吡啶组给与对应药物灌胃治疗，通路抑制剂组SA 10 mg/kg灌胃同时腹腔注射ML385 30 mg/kg。通过监测小鼠体质量变化、疾病活动指数（DAI）评分、结肠长度测量、HE染色评估小鼠炎症；检测结肠组织中活性氧（ROS）水平；比色法检测结肠组织中丙二醛含量（MDA）; RT-qPCR检测结肠组织中炎性因子；Western blotting法检测结肠组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap-1)、磷酸化p65蛋白（p-p65）、p65、紧密连接蛋白（occludin、ZO-1）蛋白表达。结果 与DSS组相比，SA治疗可缓解DSS组小鼠体质量下降、结肠长度缩短、DAI评分升高（P<0.05）。HE染色显示，DSS组结肠腺体结构破坏，SA可明显改善结肠隐窝结构。RT-qPCR显示，SA干预组结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-6水平下降（P<0.05）,ROS、MDA下降（P<0.05）。Western blotting结果显示，结肠组织中Nrf2、HO-1、occludin、ZO-1蛋白表达上升（P<0.05）,Keap-1、p-p65蛋白表达下降（P<0.05）,p65无明显变化（P>0.05），且DSS+SA-L、DSS+SA-M、DSS+SA-H组各指标变化呈剂量依赖性。Nrf2通路抑制剂ML385降低高剂量组SA对UC小鼠结肠黏膜的改善作用。结论 SA可改善UC样小鼠肠炎，作用机制可能与激活Nrf2通路，抑制Nrf2介导的NF-κB通路有关。
  • 桑黄酮G通过调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制胃癌细胞的生长、迁移和侵袭
    耿志军, 杨晶晶, 牛民主, 刘馨悦, 施金冉, 刘亦珂, 姚新宇, 张雨路, 张小凤, 胡建国
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1476-1484.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨桑黄酮G(KG)对胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用和分子机制。方法 通过CCK-8实验、细胞克隆形成实验、裸鼠背部成瘤和Ki-67免疫组织化学染色评估不同浓度KG对胃癌细胞增殖与生长的影响；应用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒、Western blotting分析凋亡相关蛋白表达和Tunel染色评估KG对胃癌细胞凋亡的影响；使用Transwell迁移和侵袭实验与Western blotting分析基质金属蛋白酶表达检测KG对胃癌细胞迁移和侵袭的作用；利用免疫印迹技术和rescue实验验证PI3K/AKT/mTOR通路在KG调控胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭的作用。结果 KG以浓度依赖性抑制胃癌细胞的增殖和减少细胞形成克隆数（P<0.05）;KG上调凋亡细胞比例，促进cleaved caspase-3、Bcl2-Bax表达并下调Bcl2水平（P<0.05）;KG干扰胃癌细胞的迁移和侵袭，并且抑制基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达（P<0.05）。机制验证显示，KG抑制PI3K/AKT/mTOR通路的激活，且PI3K/AKT/mTOR通路的激活剂IGF-1逆转了KG对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响（P<0.05）。结论 KG至少部分是通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路的激活影响胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。
  • 隔山消治疗溃疡性结肠炎的机制：基于UPLC-QE-MS、网络药理学及代谢组学技术
    于官正, 程炜强, 涂星, 张满, 李鸿, 聂娟
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1485-1496.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 基于UPLC-QE-MS与网络药理学挖掘隔山消防治溃疡性结肠炎（UC）的靶点及通路，并结合代谢组学技术探讨作用机制。方法 采用UPLC-QE-MS技术鉴定隔山消醇提物化学成分，基于Swiss Target Prediction、GeneCards、Pubchem等数据库筛选相应靶点，获取核心PPI，进行GO、KEGG富集分析。将40只雄性C57小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组（0.2 g/kg）、隔山消组（2.28 g/kg），每组10只，除正常组外，其余各组自由饮用2.5%DSS诱导UC模型，造模期间给药组给予药物灌胃干预。通过体质量变化率、DAI得分评价治疗效果；HE及AB-PAS染色观察结肠组织病理变化；Western blotting技术检测JAK2、STAT3蛋白水平；代谢组学技术鉴别差异代谢物并挖掘代谢通路。结果 鉴定出隔山消醇提物化学成分240个，其中甾体类（高含量）19个，得到隔山消（甾体类）靶点177个，UC基因5406个，隔山消与UC交集基因117个，JAK2、STAT3等为核心PPI，在脂质与动脉粥样硬化等通路富集显著。动物实验结果显示，经隔山消治疗后，小鼠体质量变化率上升、DAI评分显著下降（P<0.05），肠组织病理改变明显缓解，JAK2、STAT3蛋白水平显著降低（P<0.05）。鉴定出正常组、模型组及隔山消组之间交集差异代谢物83个，以甘油磷脂、类花生酸、氨基酸成分为主，与甘油磷脂代谢等通路相关。整合分析显示隔山消治疗UC的核心靶点参与了代谢物的调节。结论 隔山消可通过调节JAK2、STAT3等核心靶点表达及内源性代谢物水平来缓解脂质及氨基酸代谢紊乱，发挥治疗UC的作用。
  • SPAG5在胃癌细胞恶性增殖中的生物学作用
    庞一丹, 刘雅, 陈思嫒, 张荆雷, 曾今, 潘元明, 安娟
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1497-1507.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 在胃癌组织及癌旁组织中分析SPAG5的表达情况，通过干扰SPAG5分析其在胃癌细胞生长中的生物学作用。方法结合TCGA分析，免疫组织化学、免疫荧光染色分析SPAG5及MKi67在胃癌及癌旁组织中的表达模式，利用胃癌细胞AGS和MGC803进行体外细胞生物学实验，分别设置空白对照组和干扰组，采用慢病毒干扰，其中空白对照转染shCtrl，干扰组转染shSPAG5。通过Celigo、MTT和克隆形成实验、凋亡检测分析敲减SPAG5基因后对胃癌细胞生长的影响。结果 Proteinatlas数据库、TCGA数据库分析结果发现SPAG5在胃癌中高表达，KM-plot及GEPIA数据库分析SPAG5在肺腺癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、宫颈癌、膀胱癌中高表达，免疫组化发现SPAG5在胃癌中高表达（P<0.001），免疫组化和免疫荧光共聚焦证明SPAG5与MKi67存在显著相关性（R=0.393,P<0.001）。Realtime-PCR及Westernblotting结果显示SPAG5在MKN74、BGC823、MGC803、SGC7901和AGS等细胞中表达水平较高（P<0.01）。敲减SPAG5后mRNA和蛋白的表达下降，Celigo、MTT和克隆形成实验结果显示敲减SPAG5抑制胃癌细胞增殖（P<0.01），流式凋亡分析发现敲减SPAG5促进胃癌细胞凋亡（P<0.001）。结论SPAG5和MKi67在胃癌组织中的表达具有相关性，干扰SPAG5基因可以抑制胃癌细胞的增殖。SPAG5与患者预后相关，可能成为胃癌的潜在标志物。
  • 茵陈蒿汤治疗肝纤维化的核心功能成分群以及潜在通路
    陈星梅, 刘琴文, 李镱, 钟晓宇, 樊奇灵, 马柯, 罗柳婷, 官道刚, 朱志博
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1508-1517.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 基于网络药理学和体外实验分析验证茵陈蒿汤（YCHD）治疗肝纤维化（HF）的核心功能成分群（CFCG）以及潜在通路。方法 在DisGeNET、Genecards、CMGRN和PTHGRN提取了HF的PPI数据，使用Cytoscape 3.9.1构建权重网络。从TCMSP中收集茵陈蒿汤所有化学成分，用PreADMET Web服务器和SwissTargetPrediction选择茵陈蒿汤潜在活性成分和靶点。构建融合模型获取功能效应空间并评估有效蛋白，得到CFCG，再进一步对所有目标进行GO和KEGG通路富集分析。细胞实验：体外培养人肝星状细胞（LX-2），分别设置空白组（不加TGF-β1刺激）、对照组NC(20 ng/mL TGF-β1刺激)和化合物组（0、50、100、200μmol/L）,CCK-8实验检测药物敏感性，qPCR实验检测化合物对LX-2中Ⅰ型胶原Α1(COL1A1)的影响，Western blotting实验分析评估化合物在TGF-β1刺激下对LX-2中潜在通路的影响，验证潜在治疗机制。结果 分析得到1005个致病基因，茵陈蒿汤潜在活性成分和靶点分别有226个和1529个，核心功能成分群有52个。根据模型计算结果，选取得分最高的乙酸苄酯、香草酸、苯甲酸甲酯、虎杖苷、月桂酸、阿魏酸进行CCK-8验证发现在200μmol/L内无细胞毒性；在qPCR实验中，与TGF-β1组相比苯甲酸甲酯、虎杖苷、月桂酸和阿魏酸能够抑制TGF-β1诱导的LX-2活化。GO和KEGG分析及Western blotting验证发现，这4种成分在200μmol/L浓度时对PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、ERK、p-ERK、P38 MAPK、p-P38 MAPK有不同程度的抑制。结论 茵陈蒿汤抗肝纤维化可能是其中的乙酸苄酯、香草酸、苯甲酸甲酯、虎杖苷、月桂酸、阿魏酸等成分通过抑制PI3K-AKT和MAPK通路实现的。
  • 清心解瘀颗粒抗动脉粥样硬化的药效学及调控机制
    张珊苑, 蔡巧燕, 祁江晗, 殷恺馨, 何晨晨, 高铸烨, 张铃, 褚剑锋
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1518-1528.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 基于网络药理学探讨清心解瘀颗粒（QXJYG）抗动脉粥样硬化（AS）的药效学及其调控机制。方法 通过网络药理学挖掘QXJYG抗AS的关键靶点和信号通路。采用高脂喂养合并腹腔注射维生素D3的方式构建AS大鼠模型，将造模成功后的30只大鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组（13.15 mg·kg-1·d-1）、低剂量组（0.99 g·kg-1·d-1）、中剂量组（1.98 g·kg-1·d-1）、高剂量组（3.96 g·kg-1·d-1），每组6只；另外将6只SD大鼠给予正常饮食作为对照组。实验动物干预8周后，通过小动物超声检测大鼠腹主动脉血管内径、血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数，通过HE染色检测大鼠腹主动脉病理形态，通过全自动生化仪检测每组大鼠的血脂水平，通过ELISA检测试剂盒测定血清中AngⅡ、ET-1、TXA2、PGI2、ox-LDL含量。采用免疫组化法检测大鼠腹主动脉中LOX-1、PPARγ、RXRα、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达。结果 与正常组相比，模型组的腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数升高（P<0.05），血管内径减小（P<0.05），且平滑肌细胞增生、排列紊乱，TC、LDL-C、AngⅡ、ET-1、TXA2含量显著升高（P<0.05）,HDL-C、PGI2含量显著下降（P<0.05）。与模型组相比，QXJYG和阿托伐他汀干预后，显著降低腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数（P<0.05），增大血管内径（P<0.05），减轻平滑肌细胞排列紊乱情况，显著降低TC、LDL-C,AngⅡ、ET-1、TXA2(P<0.05)，显著升高HDL-C、PGI2含量（P<0.05），通过网络药理学预测发现QXJYG可能通过调控脂质，PPAR和NF-κB等信号通路发挥抗AS的作用。与正常组相比，模型组的ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,PPARγ、RXRα蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组相比，QXJYG干预后，ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,PPARγ、RXRα表达显著升高（P<0.05）。结论 QXJYG显著改善AS大鼠脂代谢紊乱，扩大腹主动脉血管内径，减小腹主动脉血管壁厚度，抑制腹主动脉血管病理损伤，调节血管收缩和舒张功能。QXJYG发挥抗AS的作用机制可能是抑制血脂中ox-LDL水平，降低LOX-1的表达，激活PPARγ、RXRα蛋白，抑制P65的磷酸化，从而降低VCAM-1、ICAM-1蛋白表达。
  • 基线水平CCL19+树突状细胞可有效预测肺腺癌患者免疫治疗的敏感性
    朱名扬, 王博康, 张秀森, 周克旭, 苗泽宇, 孙江涛
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1529-1536.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨肺腺癌微环境基线水平CCL19+树突状细胞（CCL19+DC）与肺腺癌患者接受免疫治疗疗效及肺腺癌患者CD8+T细胞浸润的相关性。方法 回顾性分析2020年1月～2023年12月在河南科技大学第一附属医院住院的肺腺癌患者资料，并收集行免疫治疗的肺腺癌患者组织标本96例。应用免疫荧光法检测96例肺腺癌组织中CCL19+DC及CD8+T细胞的浸润状况。受试者工作特征（ROC）曲线评估基线水平CCL19+DC对肺腺癌免疫治疗疗效预测价值，并进行敏感性分析。采用卡方检验分析肺腺癌组织中基线水平CCL19+DC与免疫疗效及CD8+T细胞浸润的相关性。采用Pearson相关性分析评价基线水平CCL19+DC表达与细胞毒性T细胞（CTL）浸润相关性。将PC9肺腺癌细胞、CD8+T细胞及DC（过表达CCL19和/或抗PD-1处理）进行分组体外共培养，采用流式细胞学方法检测T细胞各表面分子（GranzymeB、Perforin、IFN-γ、Ki-67）表达情况。结果 免疫荧光结果显示，PR/CR组（Respond）的患者肺腺癌组织中CCL19+DC浸润高于PD/SD组（Unrespond）患者，表现出更好的免疫治疗疗效，ROC曲线下面积为0.785，敏感度为75.6%，特异度为62.8%。CCL19+DC高表达患者肺腺癌组CD8+T细胞表面分子Granzyme B（P<0.01）、Perforin（P<0.01）、IFN-γ（P<0.01）及Ki-67（P<0.001）表达均高于CCL19+DC低表达患者。肺腺癌组织基线水平CCL19+DC的表达与免疫治疗疗效具有显著的相关性（P=0.003），与CTL细胞浸润呈正相关（r=0.6657,P<0.001）,CCL19+DC丰富度与CD8+T细胞的浸润具有显著的相关性（P=0.007）。与对照组相比，转染过表达CCL19质粒及单独使用anti-PD1处理组中CD8+T淋巴细胞杀伤及增殖功能标志物增加（P<0.01）。使用anti-PD1联合转染过表达CCL19质粒处理组中CD8+T淋巴细胞杀伤及增殖功能标志物水平显著增加（P<0.001）。结论 在免疫治疗背景下，肺腺癌微环境中基线水平CCL19+DC的表达与肺腺癌患者免疫治疗疗效及CTL细胞浸润呈正相关，并且肺腺癌微环境中CCL19+DC可以提升CD8+T细胞杀伤及增殖功能标志物水平，发挥潜在抗肿瘤免疫作用。因此，肺腺癌微环境中基线水平CCL19+DC可以有效预测肺腺癌免疫治疗的敏感性。
  • 血根碱通过调控STUB1/GPX4诱导直肠癌细胞发生铁死亡
    张银亮, 骆泽谭, 赵睿, 赵娜, 徐志东, 奥迪, 丛古一, 刘新宇, 郑海伦
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1537-1544.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探究血根碱（SAN）对结直肠癌细胞增殖及铁死亡的影响。方法 SW620和HCT-116细胞体外培养，在SW620细胞加入浓度分别为0、0.5、1、1.5、2、2.5、3μmol/L的SAN,HCT-116细胞加入0、0.5、0.75、1、1.25、1.5、1.75、2μmol/L的SAN。采用CCK8法检测检测细胞活力，并计算出IC50；检测SAN对细胞的增殖抑制作用采用集落克隆实验；Transwell实验观测SAN对细胞侵袭迁移力的影响；ROS检测试剂盒通过流式细胞仪分析细胞ROS含量的变化；丙二醛（MDA）检测盒来检测脂质过氧化物的产生。氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽定量试剂盒测定谷胱甘肽（GSH）水平。Western blotting法检测铁死亡相关蛋白（STUB1、GPX4）的表达。结果 CCK8、集落克隆的结果显示，SAN可显著抑制SW620和HCT-116细胞增殖（P<0.05）;Transwell实验结果显示，SAN可抑制SW620和HCT-116细胞侵袭迁移能力（P<0.05）；流式细胞术检测显示：SAN显著促进SW620和HCT-116细胞内ROS的产生（P<0.05）;MDA检测结果显示，SAN可使SW620和HCT-116细胞内MDA含量增加（P<0.05）;GSH检测结果显示，SAN使SW620和HCT-116细胞内GSH下降（P<0.05）;Western blotting结果显示，SAN可通过调控STUB1下游蛋白GPX4的下调（P<0.05）。结论 SAN可通过调节STUB1/GPX4诱导结直肠癌细胞发生依赖性铁死亡，提供了新治疗结直肠癌的靶点以及实验依据。
  • Swertiamarin通过抑制肠上皮细胞细胞凋亡改善TNBS诱导的实验性结肠炎
    刘硕, 李静, 吴兴旺
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1545-1552.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 本研究旨在探讨Swertiamarin(STM)通过拮抗肠上皮细胞凋亡改善CD样结肠炎的作用和机制。方法 体外建立TNF-α刺激的Caco-2细胞凋亡模型，分为3组：对照组（Con）、TNF-α刺激组（TNF-α）和STM干预组（STM），通过Tunel染色、免疫印迹、免疫荧光和上皮电阻检测等方法，评估STM对细胞凋亡和屏障功能的影响。体内建立TNBS诱导的CD样结肠炎小鼠模型，分为3组：WT、TNBS和STM组，利用小鼠体质量变化、疾病活动指数评分、炎症评分和黏膜组织中炎症因子含量分析STM对结肠炎的作用；通过通透性、细菌移位率和紧密连接蛋白表达与定位观察STM对肠屏障功能的影响；使用Tunel染色和免疫印迹检测凋亡相关蛋白水平评估STM对上皮细胞凋亡的作用。体内外研究验证PI3K/AKT通路在STM抗肠上皮细胞凋亡中的调控作用。结果 体外研究中TUNEL染色结果显示，STM显著得减少TUNEL着色的Caco-2细胞的比例（P<0.05）；免疫印迹数据显示，STM组中cleavedcaspase3和Bax的表达低于TNF-α组（P<0.05），而Bcl2的水平则增高（P<0.05）；肠屏障完整性和功能检测显示，STM恢复了TEER值（P<0.05）、促进了紧密连接蛋白（ZO1和claudin 1）的定位正常化和表达水平的上调（P<0.05），以及抑制了促炎因子（IL-6和CCL3）的表达（P<0.05）。体内研究显示STM能缓解结肠炎和肠屏障功能障碍，具体表现为体重下降、疾病活动指数（DAI）评分、炎症评分和促炎因子（IL-6和CCL3）释放以及肠屏障通透性、结肠TEER、细菌移位和紧密连接蛋白（ZO1和Claudin-1）定位与表达均得到了改善（P<0.05）。机制上，STM在体和体外均抑制了p-PI3K和p-AKT的表达（P<0.05），且PI3K/AKT通路的激活剂（740YP）阻遏了STM抗TNF-α诱导的Caco-2凋亡作用（P<0.05）。结论 STM至少部分是通过抑制PI3K/AKT通路的激活，拮抗肠上皮细胞细胞的凋亡，进而改善肠屏障功能障碍和实验性结肠炎。
  • 双氢青蒿素通过促进活性氧的产生增强鼻咽癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性
    从小凡, 陈腾, 李硕, 王媛媛, 周龙云, 李小龙, 张配, 孙小锦, 赵素容
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1553-1560.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探究双氢青蒿素（DHA）与顺铂（DDP）联合应用对耐DDP鼻咽癌细胞株HNE1/DDP增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法 CCK-8法检测不同浓度DHA(0、5、10、20、40、80、160μmol/L)和不同浓度DDP(0、4、8、16、32、64、128μmol/L)处理24 h和48 h后HNE1/DDP细胞的存活率；采用Compusyn软件计算DHA与DDP的联合指数。将HNE1/DDP细胞分为对照组、DHA组、DDP组、DHA联合DDP组，给药处理24 h后，CCK-8、EdU和集落克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞增殖和集落克隆形成能力；流式细胞术检测细胞凋亡情况和细胞内活性氧（ROS）水平；Western blotting检测凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3表达水平。ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸预处理后，检测其对DHA联合DDP诱导的细胞增殖、凋亡的影响。结果 不同浓度DHA和不同浓度DDP均能明显抑制HNE1/DDP细胞活力，DHA(5μmol/L)联合DDP(8、16、32、64、128μmol/L)的联合指数均小于1。与DHA或DDP单独处理组相比，DHA联合DDP组细胞活力下降（P<0.01），集落形成数和EdU阳性染色细胞减少（P<0.01），细胞凋亡率和细胞内ROS水平升高（P<0.01），细胞凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3的表达水平增加（P<0.05），而N-乙酰半胱氨酸预处理可部分逆转DHA联合DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用（P<0.01）。结论 DHA增强DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用，其机制可能与细胞内ROS的积累有关。
  • 基于序列缺失的MRI多序列特征填补与融合互助模型：鉴别高低级别胶质瘤
    吴垂杏, 钟伟雄, 谢金城, 杨蕊梦, 吴元魁, 许乙凯, 王琳婧, 甄鑫
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1561-1570.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨基于序列缺失的MRI多序列特征填补与融合互助模型应用于高级别胶质瘤（HGG）与低级别胶质瘤（LGG）鉴别的性能表现。方法 回顾性收集305例胶质瘤患者（189例HGG,116例LGG）的MRI图像，分别勾画出T1加权成像（T1WI）、T2加权成像（T2WI）、T2液体翻转恢复衰减（T2＿FLAIR）和T1WI增强图像（CE＿T1WI）的感兴趣区（ROI），提取出4个ROI的影像组学特征。利用本研究提出的基于序列缺失的MRI多序列特征填补与融合互助模型对含有缺失数据的特征矩阵进行填补与融合双向学习得到互助模型。采用五折交叉验证方法和准确率（ACC）、平衡准确率（BAcc）、ROC曲线下的面积（AUC）、特异性和灵敏度评价该模型的鉴别能力。所提模型与其他非完整多模态分类模型在鉴别HGG与LGG上进行定量比较，对本文提出的特征填补与融合方法学习得到的潜在特征进行类可分性实验，观察样本在二维平面的分类效果，采用收敛性实验验证该模型的可行性。结果模型序列缺失率为10%时，其在鉴别HGG与LGG的ACC、BAcc、AUC、特异性、灵敏度分别为：0.777、0.768、0.826、0.754和0.780，融合的潜在特征在类可分性实验中有优秀表现，该算法可迭代至收敛。缺失率为30%、50%时，分类性能也优于其他方法。结论 基于序列缺失的MRI多序列特征填补与融合互助模型在HGG和LGG的分类任务中具有优异的性能表现。与其他非完整多模态分类模型相比，该模型在鉴别HGG和LGG的分类性能更优，适用于非完整模态的多模态数据的处理。
  • 金银花提取物对小鼠阿霉素肝脏损伤的保护作用
    张钰明, 夏士程, 张淋淋, 陈梦茜, 刘晓婧, 高琴, 叶红伟
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1571-1581.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 通过网络药理学与分子对接技术探讨金银花对阿霉素（DOX）肝脏损伤的保护作用和机制，并运用DOX诱导小鼠肝脏损伤实验进行验证。方法 通过网络药理学方法获得金银花靶点与疾病靶点之间的交集基因。利用STRING数据库构建交集基因PPI网络，利用Cytoscape软件进行分析，筛选核心靶点。采用DAVID数据库进行生物信息学分析，分子对接技术对核心成分和核心靶点进行验证。运用DOX诱导小鼠肝脏损伤验证网络药理学的预测结果。检测小鼠血清ALT、AST水平和肝脏组织HYP、ROS水平，HE染色和Masson染色观察肝脏组织病理变化，ELISA检测肝脏组织TNF-α、IL-6、COL-IV水平，Western blotting检测肝脏组织P53蛋白表达水平。结果 从交集的43个基因中筛选出12个核心靶点，涉及癌症通路、IL-17信号通路、TNF等信号通路。分子对接结果显示，10个核心成分可以与不同的核心靶点结合。小鼠实验显示，与Sham组相比，DOX组血清AST和ALT水平升高（P<0.001）;HE和Masson染色显示肝脏损伤和肝脏纤维化，ROS、TNF-α、IL-6、HYP、COL-IV和P53蛋白水平升高（P<0.001）。与DOX组相比，金银花处理组血清AST和ALT水平降低（P<0.001），肝脏损伤和肝脏纤维化改善，肝脏组织ROS、TNF-α、IL-6、HYP和COL-IV水平和P53蛋白表达降低（P<0.001），肝脏组织氧化应激、炎症和纤维化均减轻。结论 金银花可通过作用于Trp53、TNF、IL-6靶点减轻肝脏氧化应激、炎症和纤维化程度，减轻DOX诱导的肝脏损伤。
  • 三百棒通过调控PI3K/Akt信号通路改善胶原诱导性类风湿性关节炎大鼠的血管翳
    向珊, 张宗星, 江露, 刘道忠, 李玮怡, 包卓玛, 田瑞, 陈丹, 袁林
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1582-1588.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨三百棒醇提物（TAAE）通过PI3K/Akt信号通路改善胶原诱导性（CIA）大鼠血管翳的治疗作用及其机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤多苷片组（TGT）、三百棒醇提物低剂量组（TAAE-L）、三百棒醇提物中剂量组（TAAE-M）、三百棒醇提物高剂量组（TAAE-H）,10只/组。除正常组外，对其余大鼠采用二次免疫法建立CIA大鼠模型。二次免疫结束后，三百棒醇提物组和雷公藤多苷组按相应剂量灌胃给药，1次/d，连续35 d。采用关节炎指数（AI）评分评估大鼠关节炎症程度；HE染色法观察膝关节滑膜病理变化；ELISA检测细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）的水平；Western blotting法检测各组大鼠滑膜组织中PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt、血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮抑制因子内皮抑素（ES）、缺氧诱导因子1-α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶（MMP1、MMP3、MMP9）蛋白含量的变化；RT-PCR检测各组大鼠滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、VEGF、HIF-1α、PI3K、Akt mRNA水平。结果 与模型组相比较，TAAE和TGT组大鼠的足肿胀度和AI评分降低（P<0.05），膝关节病理变化明显改善，新生血管生成减少，血清中炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）水平降低（P<0.01）。Western blotting实验结果显示，与模型组相比较，TAAE的干预上调ES蛋白水平，下调p-PI3K、p-Akt、MMP1、MMP3、MMP9、VEGF、HIF-1α蛋白水平，差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。TAAE还降低了TNF-α、IL-6、IL-1β、PI3K、Akt、VEGF、HIF-1α mRNA水平，差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。TAAE-H组与TGT组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 TAAE可通过PI3K/Akt信号通路调控HIF-1α、VEGF、ES、MMP1、MMP3、MMP9等蛋白的表达，改善CIA大鼠关节症状，抑制RA血管翳形成。
  • 蒙花苷通过抑制TLR4/NF-κB通路抑制小鼠脊髓损伤后小胶质细胞活化介导的神经炎症和神经元凋亡
    肖林雨, 段婷, 夏勇生, 陈悦, 孙洋, 许轶博, 徐磊, 闫兴洲, 胡建国
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1589-1598.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨蒙花苷（LIN）在脊髓损伤（SCI）后对激活小胶质细胞介导的炎症和神经元凋亡的神经保护作用和潜在机制。方法 将50只8～10周龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组（Sham组）、脊髓损伤模型组（SCI组）和LIN药物治疗组（12.5、25、50 mg/kg）,10只/组。使用巴索小鼠评分量表（BMS）、斜板实验和脚印分析评估SCI小鼠的运动功能恢复情况；通过HE染色和LFB染色分别评估脊髓组织损伤面积和髓鞘化面积。采用Nissl染色、免疫荧光及Western blotting观察损伤脊髓组织前角运动神经元的保留情况。体外实验通过LPS诱导BV2细胞建立体外炎症模型，同时给予蒙花苷进行干预，将BV2细胞分为对照组（Con-B）、脂多糖组（LPS-B）及蒙花苷组（LIN-B）。通过免疫荧光、Western blotting、RT-qPCR及ELISA检测体内外小胶质细胞活化及炎症因子的释放情况，进一步采用Western blotting验证信号通路的改变。构建体外BV2细胞和HT22细胞共培养模型，分为Con-H组、LPS-H组以及LIN-H组。采用Western blotting检测激活小胶质细胞介导的HT22细胞凋亡情况。结果 行为学检测发现，LIN组小鼠BMS评分显著提高，承受的斜板高度更高，后肢行走协调且足迹清晰（P<0.05）。组织学染色结果显示，LIN组小鼠脊髓组织损伤面积减少，髓鞘化面积增加，并且小鼠脊髓前角运动神经元的数量增加（P<0.05）。体内外实验证实，LIN显著抑制小胶质细胞的活化和炎症因子（iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β）的释放，并减少了体内神经元的凋亡（P<0.05）。Western blotting显示LIN抑制小胶质细胞活化可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。体外共培养实验结果显示，LIN的干预能够减少炎症介导的神经元凋亡数量（P<0.05）。结论 LIN可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制小胶质细胞的激活，减轻神经炎症，改善SCI后的神经元凋亡，提高SCI小鼠运动能力，发挥其神经保护作用。
  • Notch1信号通过调控细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解参与子宫腺肌病的发生及发展
    温小慧, 黄诗雅, 刘学红, 李坤寅, 关永格
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1599-1604.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 基于Notch1信号观察子宫腺肌病（AM）在位内膜及Ishikawa细胞系糖酵解相关因子和蛋白的表达，并探讨子宫腺肌病的发生机制。方法 收集AM(AM组，n=8)及子宫肌瘤（CON组，n=8）在位子宫内膜组织，通过临床特征评估两组子宫内膜的可比性，qRT-PCR和Western blot检测其Notch1信号及糖酵解相关因子和蛋白的表达，通过葡萄糖和乳酸试验检测其葡萄糖和乳酸的含量；建立过表达Notch1的Ishikawa细胞慢病毒稳转株，CCK-8检测其细胞存活率，Transwell迁移和侵袭实验检测其迁移和侵袭能力，细胞外酸化速率检测其糖酵解储备。结果 与CON组子宫内膜组织比较，AM组糖类抗原125(CA125)水平明显高于CON组（P<0.01）,AM患者在位子宫内膜组织Notch1、HK2和PDHA的mRNA相对表达量增加（P<0.01或P<0.05）,Notch1、GLUT1、HK2、PKM和PDHA蛋白相对表达量均显著升高（P<0.01或P<0.05），葡萄糖含量显著下降、乳酸水平显著升高（P<0.01或P<0.05）。与对照病毒空载体（ov-NC）比较，过表达Notch1的Ishikawa细胞慢病毒稳转株（ov-Notch1）的细胞存活率显著升高（P<0.05），细胞迁移和侵袭细胞数量显著增加（P<0.05），酵解容量和酵解储备显著升高（P<0.01或P<0.05）。结论 Notch1信号可能通过调控细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解过程，进而参与AM的发生发展。
  • 血小板特异性Rictor敲除抑制小鼠血小板生成和活化及血栓形成
    龙清, 杨峻, 刘安玲
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1605-1611.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探究Rictor对血小板活化和血栓形成的影响。方法 利用PF4-Cre、Rictorfl/fl转基因小鼠，构建血小板特异性Rictor敲除小鼠和野生型小鼠，分别设为敲除组和对照组（总实验小鼠n=65），用于后续实验。Western blotting检测小鼠Rictor蛋白、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT的表达水平。血常规检测敲除和对照组小鼠血小板数目。尾静脉出血实验检测敲除和对照小鼠止血功能。构建静脉血栓模型检测Rictor敲除对血栓形成的影响。使用ADP和凝血酶刺激血小板，检测Rictor敲除对血小板聚集的影响。流式细胞术分析敲除组和对照组血小板在静息态和活化态整合素αIIbβ3与CD62P的表达水平。检测血浆中PF4水平。vWF免疫组化标记巨核细胞。用APC-CD41抗体孵育敲除和对照小鼠的巨核细胞，流式细胞术检测细胞倍体。扫描电镜检测敲除和对照组血小板在胶原表面的伸展变化。结果 与对照小鼠相比，血小板Rictor特异性敲除小鼠AKT磷酸化降低（P<0.001），血小板生成减少（P<0.05），血栓形成受到抑制（P<0.05），血小板对ADP和凝血酶刺激的活化水平降低（P<0.01）,P-选择素蛋白表达水平（P<0.05）、整合素αIIbβ3活化程度（P<0.01）受到抑制，血小板伸展受到抑制（P<0.01）,PF4的血浆含量降低（P<0.05），骨髓中巨核细胞数量减少（P<0.01），倍体降低（P<0.05），前血小板平均面积减少（P<0.01）。结论 血小板特异性敲除Rictor抑制血小板生成和活化，进而减少血栓形成。抑制mTORC2活性可能是一种潜在的抗血栓靶标。
  • 睡眠性状与特发性正常压力脑积水的因果关联：一项两样本双向孟德尔随机化研究
    钟帷韬, 李伟松, 李泽霖, 王强, 张旺明
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1612-1619.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 利用双向孟德尔随机化研究方法探索睡眠性状与特发性正常压力脑积水之间的因果关系。方法 采用GWAS catalog、芬兰公共数据库和MRCIEU GWAS数据库中8种睡眠性状的全基因组关联分析数据作为暴露，芬兰公共数据库中特发性正常压力脑积水（iNPH）的全基因组关联分析数据作为结局，使用逆方差加权法（IVW）作为主分析方法来评估睡眠性状与特发性正常压力脑积水之间的因果关系。敏感性分析方法采用Cochrane Q检验进行异质性检验和采用MR Egger-intercept检验来检测潜在的水平多效性。同时，进行反向孟德尔随机化分析特发性正常压力脑积水与睡眠性状的因果关联。结果 主分析方法IVW法显示经常白天小睡会增加iNPH的发病风险（OR=3.3393,95 CI%:1.0646-10.4742,P=0.0270）。Cochrane Q检验显示结果无潜在的异质性、MR Egger-intercept检验显示结果无水平多效性（P>0.05）。外部验证复现了这一结果（OR=2.5660,95 CI%:1.1680-5.6373,P=0.0189）、（OR=4.0424,95 CI%:1.5709-10.4024,P=0.0038）。反向MR分析提示罹患iNPH不会影响睡眠性状。结论 白天小睡的频率和特发性正常压力脑积水存在因果关联，对于老年人群，减少每周白天小睡的频率有助于降低iNPH的发生风险。
  • ORY-1001靶向赖氨酸特异性去甲基化酶1下调胶质母细胞瘤Notch/HES1通路的表达并发挥抗肿瘤作用
    杨红丽, 向亚运, 谭婷婷, 雷阳
    南方医科大学学报. 2024, 44(08): 1620-1630.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    目的 探究赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)抑制剂ORY-1001对胶质母细胞瘤（GBM）的抑瘤作用和机制。方法 从公开数据库（TCGA和HPA）下载相关数据，分析LSD1在GBM和正常脑中的表达情况。将24只雌性BALB/c小鼠，随机分为对照组与ORY-1001组，12只/组。肿瘤细胞种植后，每7 d用400μg/kg ORY-1001进行灌胃，检测肿瘤生长和动物生存时间，评估ORY-1001对GBM的抗肿瘤效应。检测A490 nm值测定ORY-1001对GBM细胞活力的影响。Western blotting检测ORY-1001对LSD1表达的影响。利用慢病毒试剂，构建稳定敲降LSD1的GBM细胞（sh-LSD1），并通过动物成瘤实验评估沉默LSD1在活体动物内的作用以检测LSD1药物抑制获得的表型特异性。运用生物信息学方法分析与LSD1相关的基因及通路。Western blotting检测沉默LSD1及不同剂量ORY-1001治疗后Notch/HES1通路的表达。通过慢病毒转染，构建稳定过表达Notch1(oeNotch1)的U87细胞。测定过表达Notch1后，ORY-1001对GBM动物模型肿瘤生长及生存时间的影响。通过ChIP揭示ORY-1001对Notch/HES1通路的具体调控机制。结果 LSD1在GBM中高表达，并与患者的预后呈负相关（P<0.001）。ORY-1001治疗以及LSD1基因沉默都使荷瘤动物肿瘤负荷减轻（P<0.05）和生存时间延长（P<0.001），对多种GBM细胞的活力均表现出抑制作用（P<0.05）。ORY-1001呈剂量依赖性地抑制LSD1的表达。Notch通路富集了与LSD1抑制相关的差异基因，LSD1沉默及ORY-1001治疗后Notch/HES1通路表达显著下调（P<0.05），逆转了ORY-1001对GBM的抗肿瘤作用（P<0.05）。结论 ORY-1001通过抑制GBM中LSD1的表达而下调Notch/HES1通路，并发挥抗肿瘤效应。
2025年, 第45卷, 第06期
刊出日期：2025-06-25
在线期刊
Copyright 中国高校科技期刊信息汇聚平台 2024-2025
技术支持：北京玛格泰克科技发展有限公司
京ICP备05021913号-19