Bscl2基因敲除对细胞增殖和DNA损伤修复能力的影响

张丛俏, 黄翔, 张伟杨, 安智渊, 田盼, 万能, 任来峰, 郭晋锋

遵义医科大学学报 ›› 2025, Vol. 48 ›› Issue (03) : 234-242. DOI: 10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2025.0038

Bscl2基因敲除对细胞增殖和DNA损伤修复能力的影响

  • 张丛俏, 黄翔, 张伟杨, 安智渊, 田盼, 万能, 任来峰, 郭晋锋
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摘要

目的 探讨Bscl2基因敲除对细胞增殖和DNA损伤修复能力的影响。方法 构建Bscl2基因敲除小鼠模型,胰酶消化法分离胚胎发育14.5 d (E14.5 d)的MEF细胞;免疫荧光染色法对分离培养的MEF细胞进行纯化鉴定;PCR扩增技术结合琼脂糖凝胶电泳对培养细胞及小鼠基因型进行鉴定,并将细胞及小鼠分为野生组(WT wild type)及Bscl2基因敲除组(KO knockout);使用台盼蓝染色法和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)免疫荧光标记法检测两组细胞增殖能力;用γH2AX免疫荧光染色法评估两组细胞及小鼠组织在双链断裂损伤诱导后的DNA损伤修复能力。结果 分离E14.5 d MEF细胞,成功构建小鼠MEF细胞系。Bscl2基因敲除MEF细胞的增殖能力明显低于野生型,Bscl2基因敲除MEF细胞及小鼠活体组织的DNA损伤修复能力较野生型明显减弱。结论 敲除Bscl2基因抑制小鼠MEF细胞的增殖,降低小鼠细胞及组织的DNA损伤修复能力。

关键词

先天性脂肪营养不良2型基因 / 胚胎成纤维细胞 / 细胞增殖 / DNA双链断裂 / DNA修复

中图分类号

R363

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张丛俏, 黄翔, 张伟杨, 安智渊, 田盼, 万能, 任来峰, 郭晋锋. Bscl2基因敲除对细胞增殖和DNA损伤修复能力的影响. 遵义医科大学学报. 2025, 48(03): 234-242 https://doi.org/10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2025.0038

基金

山西省自然科学基金资助项目(NO:202403021211128); 山西省卫生健康委科研基金(NO:2024108)

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