目的 探讨人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜损伤后的修复及纤维化抑制的影响。方法 酶消化法提取HAMSCs体外培养，取P3代细胞通过生长特征、免疫荧光鉴定表面标记分子和三系分化能力进行鉴定。32只动情期SD大鼠随机均分为IUA组、HAMSCs组、G-CSF和H+G组。乙醚麻醉后行背部开口，IUA组从近卵巢端向左侧子宫腔内注射1 mL无水乙醇作用90 s, 1 mL生理盐水冲刷子宫2次，右侧子宫注射等体积生理盐水作为假手术自身对照(Sham对照)。在造模后第7天和第10天进行2次治疗，每次注射体积均为0.2 mL。其中IUA组注射PBS,HAMSCs组宫腔灌注含1×10～6个细胞的PBS;G-CSF组灌注含20μg G-CSF的PBS;H+G组则在G-CSF灌注后再行HAMSCs灌注。各组大鼠在第2次治疗结束7 d后处死取子宫角备用。HE、Masson染色法检测各组大鼠子宫内膜的修复情况；qRT-PCR和免疫组化法检测各组大鼠子宫中TGF-β1、SMAD3、SMAD7、β-catenin、孕酮受体(PR)及雌激素受体(ER)的表达情况；另取32只大鼠同样分组造模后与正常雄鼠交配，计算其怀孕率和胚胎数。结果 所获细胞经生长特性、细胞表面分子和分化能力的鉴定符合MSCs特征。IUA组大鼠子宫出现水肿、充血等现象，其余各组大鼠子宫形态均在一定程度上得以恢复，子宫内膜厚度和腺体数目从高到低依次为Sham对照、H+G组、HAMSCs组、G-CSF组、IUA组。Masson染色结果显示，在纤维化面积占整个子宫内膜面积的比例上，从高到低依次为IUA组、G-CSF组、HAMSCs组、H+G组、Sham对照。qRT-PCR结果显示，Sham对照TGF-β1、SMAD3和β-catenin mRNA最低，在IUA组中表达最高(P<0.05)。与IUA组相比，HAMSCs、G-CSF和H+G处理不同程度降低TGF-β1、SMAD3和β-catenin mRNA表达，尤其H+G组的表达水平接近于Sham对照水平(P<0.05)。SMAD7、PR和ER mRNA的表达趋势则与TGF-β1、SMAD3、β-catenin相反(P<0.05)。免疫组化结果显示，与IUA组相比，HAMSCs、G-CSF和H+G处理可以降低TGF-β1、SMAD3和β-catenin表达而升高SMAD7、PR和ER表达(P<0.05)。怀孕率和胚胎数计数结果显示，IUA组怀孕率为0,HAMSCs、G-CSF、H+G可以提高怀孕率和胚胎数(P<0.05)。结论 HAMSCs移植及G-CSF宫腔灌注可能通过TGF-β1/SMAD3/β-catenin信号促进IUA大鼠子宫内膜损伤后的修复并抑制其纤维化，并且H+G处理的治疗效果优于单一的HAMSCs和单一G-CSF处理。