猪萨佩罗病毒VP4蛋白多克隆抗体制备及功能验证

钟祖昌, 李本强, 陶洁, 程靖华, 石迎, 刘佩红, 唐攀, 焦嘉杰, 刘惠莉

畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (04) : 78-84.

猪萨佩罗病毒VP4蛋白多克隆抗体制备及功能验证

  • 钟祖昌, 李本强, 陶洁, 程靖华, 石迎, 刘佩红, 唐攀, 焦嘉杰, 刘惠莉
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摘要

为深入揭示猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus, PSV)致病机制,以毒株SHCM2019为研究对象,原核表达VP4蛋白并制备多克隆抗体。根据VP4氨基酸序列进行PSV遗传进化分析,然后将VP4基因与原核表达载体连接,经诱导表达得到可溶性VP4蛋白。纯化后的VP4蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)验证其反应性。ELISA结果显示,多克隆抗体效价达1∶128 000;Western blot和IFA结果表明,其能特异性识别和结合PSV,说明重组VP4蛋白具有较好的免疫原性和反应原性。本研究成功表达了VP4蛋白并制备了多克隆抗体,为VP4蛋白功能研究奠定基础。

关键词

猪萨佩罗病毒 / VP4蛋白 / 原核表达 / 多克隆抗体

中图分类号

S852.651

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钟祖昌, 李本强, 陶洁, 程靖华, 石迎, 刘佩红, 唐攀, 焦嘉杰, 刘惠莉. 猪萨佩罗病毒VP4蛋白多克隆抗体制备及功能验证. 畜牧与兽医. 2025, 57(04): 78-84

基金

上海市农业科技创新项目(2023-02-08-00-12-F04612); 上海市农业科学院动物疾病防控卓越团项目(沪农科卓[2022]012)

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