为调查造成阿勒泰部分地区双峰驼乳房炎的3种主要致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌)及其毒力基因、耐药情况，本研究通过临床检查及加州乳房炎检测(CMT)法调查阿勒泰地区双峰驼乳房炎的流行情况，采集388份乳样进行致病菌的分离鉴定，通过PCR及药敏检测其毒力及耐药情况。调查结果显示，双峰驼乳房炎总感染率为15.98%,其中散养驼临床型和隐型乳房炎平均感染率分别为4.40%、21.30%,集约化养殖场分别为20.00%、17.19%。从25份病乳中共分离鉴定出154株菌，其中粪肠球菌33株，占21.43%;大肠杆菌11株，占7.14%;金黄色葡萄球菌4株，占2.60%。毒力基因检测结果显示，随机选择的4株大肠杆菌分离株中检测出irp2(75%)、fyuA(75%) 2种毒力因子；4株金黄色葡萄球菌分离株中检出clfa(100%)、sea(75%)、fnbB(75%)、hla(50%)、hlb(50%) 5种毒力因子；随机选择的12株粪肠球菌中检出gelE(83.30%)、ace(83.30%)、efaA(75%)、agg(50%)、esp(25%)5种毒力因子。药敏结果显示，大肠杆菌分离株对阿米卡星耐药率高达100%,对哌啦西啉与氨苄西林耐药率为75%,对头孢唑啉、头孢噻吩、头孢呋辛、头孢哌酮、氧氟沙星、卡那霉素的耐药率为50%,对链霉素、妥布霉素和庆大霉素的耐药率为25%。金黄色葡萄球菌分离株对青霉素G耐药率100%,对克林霉素耐药率为50%,对苯唑西林、红霉素、万古霉素、氯霉素、四环素、诺氟沙星、环丙沙星和左氟沙星的耐药率为25%,对米诺环素和呋喃妥因全部敏感。粪肠球菌分离株对青霉素和呋喃妥因较为敏感，而对万古霉素、四环素、诺氟沙星、环丙沙星敏感的菌株占比均低于41.70%,对氯霉素与四环素的耐药菌株占33.30%,诺氟沙星和左氟沙星的耐药菌株均占25%,耐万古霉素和环丙沙星的菌株均占16.70%。本研究结果可为双峰驼养殖企业提供帮助，助力双峰驼养殖业发展。