目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS）快速检测增菌报阳后无菌液体病原菌的临床应用价值。方法 收集河北省人民医院肉汤增菌培养阳性的无菌体液标本412份。报阳后的标本进行涂片革兰染色镜检，同时接种固体培养基进行培养，35℃培养4～6 h长出菌膜，35℃培养18～24 h长出单个菌落，应用质谱仪VITEK MS分别对菌膜和菌落进行鉴定，以质谱鉴定菌落的结果作为参考标准，分析菌膜的鉴定符合率。结果 VITEK MS（菌落）共鉴定出412株病原菌，包括革兰阳性球菌212株（51.45%）、革兰阴性杆菌172株（41.75%）和真菌28株（6.80%）。与VITEK MS（菌落）鉴定结果相比，VITEK MS（菌膜）总体鉴定符合率为91.50%（377/412）,革兰阳性球菌鉴定符合率为89.15%（189/212）,革兰阴性杆菌鉴定符合率为94.19%（162/172）,差异均有统计学意义（χ²=36.553、24.319、10.299,均P<0.05）;真菌鉴定，VITEK MS（菌膜）鉴定符合率为92.86%（26/28）,差异无统计学意义（χ²=2.074,P=0.150）。结论 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对报阳后的无菌体液标本进行4～6 h菌膜鉴定，可进一步缩短病原菌鉴定时间，快速准确提供鉴定结果，为临床侵袭性感染疾病的诊疗提供早期依据。