2024年, 第8卷, 第05期　
刊出日期：2024-10-15

  

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  E.coli O78和LAB对牦牛肠道上皮细胞MAPK/Zonulin通路的影响

  吴庆侠, 任晓丽, 常振宇, 张敬博, 王硕, 刘瑞冬, 董海龙

  高原农业. 2024, 8(05): 469-478. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.001

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  为探究牦牛致病性大肠杆菌（E.coli O78）和乳酸杆菌（LAB）对牦牛肠道上皮屏障MAPK/Zonulin通路的影响作用，采用牦牛上皮细胞作为实验模型，Transwell构建单层上皮细胞屏障，设立阴性对照组（Control组）、阳性对照组(Model组，加入1×10⁵ CFU E.coli O78)、低剂量组乳酸杆菌组(LLAB组，加入1×10⁵CFU E.coli O78和1×10⁵ CFU LAB)、高剂量乳酸杆菌组(HLAB组，加入加入1×10⁵ CFU E.coli O78和1×10⁷CFU LAB)，采用RT-qPCR和Western-blot技术测定各组P38、ERK、JNK、Zonulin的基因和蛋白表达水平。结果：与Control组相比，Model组的P38、ERK、JNK、Zonulin的基因表达水平极显著上升（P<0.01），而其蛋白表达水平呈现显著上升的趋势（P<0.05）；与Model组相比，LLAB组P38的基因表达水平极显著下降（P<0.01）,ERK、JNK、Zonulin的基因表达水平表现显著下降的趋势（P<0.05）,P38、ERK、Zonulin的蛋白表达水平则呈现极显著下降的趋势（P<0.01）,JNK的蛋白表达水平表现为显著下降（P<0.05）；与Model组相比，HALB组P38、ERK、JNK的基因的表达水平表现为显著下降（P<0.05）,Zonulin的基因表达水平表现为极显著下降（P<0.01）,P38、ERK、JNK、Zonulin的蛋白表达水平呈现极显著下降的趋势（P<0.01）。结论：E.coli O78可通过上调MAPK通路关键基因P38、ERK、JNK的基因表达水平，同时上调Zonulin蛋白使肠道屏障受损；LAB可以减轻E.coli O78引起的肠道屏障受损，这一作用是通过下调MAPK通路关键基因P38、ERK、JNK的基因表达水平，同时下调Zonulin蛋白表达水平来实现的。
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  西藏甘蓝型春油菜的光响应与光温利用效率分析

  蒙祖庆, 王琴, 宋丰萍

  高原农业. 2024, 8(05): 479-489. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.002

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  本研究旨在揭示西藏甘蓝型油菜在高海拔下的环境适应性。选用3个不同生育期的油菜品系在3个不同海拔实验点种植，研究其生育期及叶片光响应能力。结果表明：种植海拔改变了油菜的生育进程及光温利用。高海拔区（墨竹工卡3 843 m）温度较低，油菜的生育期延长。高海拔光辐射量较高，油菜叶片细胞排列紧密，叶绿素含量及组分含量增加，但受光抑制影响，净光合速率较低。参试油菜品系光能利用均在低海拔（林芝2 970 m）达最大值，其次中海拔（拉萨3 630 m），高海拔的光能利用效率最低。早熟品系在不同海拔下的光能利用效率为0.042～0.110 g M^J-1，中熟品系为0.045～0.118 g MJ^-1，晚熟品系为0.044～0.119 g MJ^-1。参试油菜品系的温度利用效率均在中海拔具有较高值，其次是低海拔，最低在高海拔。早熟品系在不同海拔下的温度利用效率为0.77～1.24 kg hm-2℃^-1，中熟品系为0.82～1.18 kg hm-2℃^-1，晚熟品系为0.80～1.54 kg hm-2℃^-1。本研究结果为解决高海拔区甘蓝型油菜种植的限制因子奠定理论基础。
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  巨柏苗木对干旱胁迫的生长响应

  何宇静, 高智远, 张露, 杨小林

  高原农业. 2024, 8(05): 490-495. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.003

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  为探索巨柏苗木对干旱胁迫的响应，本文以1 a生巨柏容器苗为试验材料进行了干旱胁迫试验，研究了不同水分梯度（5水分梯度）对巨柏苗木生长指标和存活状况的影响。结果表明:干旱胁迫对巨柏苗高、地径和根系生长均有显著影响。连续干旱导致巨柏苗高、地径、总根长、须根数及地上部分干物质增长量逐渐减少，但随着胁迫强度的增加，高径比下降，根冠比上升，生物量的分配趋势向地下部分转移，均表现出了巨柏苗木抗旱性；胁迫强度与存活状况和存活时间负相关，≥50%的田间持水量可满足1 a生巨柏苗木成活且日均需水量不低于20.24 g，极重干旱胁迫的苗木平均仅能存活35 d。
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  巨柏生长过程分析

  刘盛赟, 普隽坤, 张欢, 杨小林

  高原农业. 2024, 8(05): 496-501. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.004

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  为研究巨柏生长特征及规律，制定有效经营保护措施，本文以朗县天然分布区的巨柏平均标准木为研究对象，采用树干解析法，分析了其自然条件下生长变化规律。研究结果表明：129 a生巨柏标准木的树高、胸径与材积总生长量分别为12.4 m、25.2 cm与0.2 090 m³；树高连年生长量和平均生长量曲线相交于118 a，达到树高成熟年龄；120 a胸径连年生长量已出现最大值0.51 cm，而平均生长量最大值仍未出现；巨柏材积平均生长量和连年生长量曲线相交于105 a，此时理论上巨柏达到数量成熟；巨柏生长过程分为3个阶段，1～80 a为幼树期，80～120 a为速生期，120 a后为近成熟期；近成熟期后随着树龄增长，巨柏树高、胸径及总生长量仍在增长，但生长速度逐渐减慢，最终可成千年古树。
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  不同基质对3种柳树扦插繁殖的影响

  张晨龙, 韩艳英, 叶彦辉

  高原农业. 2024, 8(05): 502-510. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.005

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  研究不同基质对白柳、金丝柳和乌柳3种柳扦插繁殖的影响。结果表明：不同扦插基质对白柳、金丝柳和乌柳插穗的存活率、新生枝条长度、平均根长、生根数和生物量都有显著性影响。3种柳树插穗在混合土基质下的存活率均达到95%以上，在沙土基质下存活率最低，但沙土对3种柳树插穗生根平均根长促进作用最为明显，3种柳树插穗在沙土基质下的生根情况相比较于其它两种基质更为优良，最高生根数可以达到15.2条。本试验通过研究不同基质下3种柳树的扦插繁殖情况，从而寻找3种柳树的较优的基质配置，为西藏白柳、金丝柳和乌柳的繁殖培育和产业化培育发展提供支撑。
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  青稞多糖对大米淀粉糊化、流变、结构和体外消化特性的影响

  祝亚辉, 闫海亮, 金思源, 赵思潮, 刘磊, 刘瑜

  高原农业. 2024, 8(05): 511-519. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.006

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  为了研究青稞多糖对大米淀粉性质的影响，向大米淀粉中添加不同比例的青稞来源多糖，采用快速黏度分析仪、差示量热扫描仪等对大米淀粉的糊化、流变、结构和体外消化特性进行研究。结果表明：添加不同质量分数青稞多糖有助于提高大米淀粉的热稳定性；青稞多糖通过与大米淀粉分子交联提高混合体系的黏弹性；体外消化实验结果显示青稞多糖的添加可以降低大米淀粉消化率。研究结果为进一步利用和控制大米淀粉的糊化特性以及青稞多糖在淀粉基食品中的应用提供了理论依据。
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  高海拔设施茶园中不同茶树品种生长特性比较

  罗维叶, 王贞红, 加永平措, 马智恒, 田岗, 叶倩琳

  高原农业. 2024, 8(05): 520-526. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.007

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  为研究高海拔地区不同品种茶苗生长特性，筛选适宜高海拔地区的优良茶树品种及栽培方法，试验以设施茶园里5个不同品种1 a生实生苗为研究对象，梨茶间作下相同品种的1 a生实生苗为对照，测定其苗高、地径、叶面积及新生芽和新生叶片数量等指标。结果表明：设施茶园中不同品种茶苗福选9号、安吉白茶、黄金芽长势较好，与其它两个品种存在明显差异性。5个茶苗品种在设施茶园模式里的长势均高于梨茶间作模式，说明高海拔地区设施茶园种植模式比梨茶间作更适合茶苗生长发育。
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  印度梨形孢培养基的优化

  柴国柱 , 袁芳 , 田景琴 , 张保鑫

  高原农业. 2024, 8(05): 527-532. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.008

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  目前培养印度梨形孢多采用马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基。为获得更适合印度梨形孢生长的培养基，研究固、液两种培养方式下，马铃薯、桃子、西瓜、草莓、苹果、玉米、红色圣女果和黄色圣女果8种天然有机添加物对印度梨形孢形态和生长速度的影响。结果表明，在添加200 g/L玉米的固体培养基中，印度梨形孢菌丝体生长最快；在玉米液体培养基中，菌丝体多呈大小比较一致、圆而紧密的菌丝球，培养至5 d，菌丝体鲜重、干重最高，分别为24.09 g、1.98 g；玉米是促进印度梨形孢生长的最佳天然有机添加物，马铃薯其次，PDA中培养至第5 d，菌丝体生物量达到最大，鲜重、干重分别为16.37 g、1.24 g。研究结果可为高效培养生产印度梨形孢提供重要理论依据。
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  藏猪耳组织成纤维细胞的分离、培养与冻存

  刘博华, 王运路, 尼玛群宗, 刘楠, 次仁德吉, 加布, 徐业芬, 罗桑多杰

  高原农业. 2024, 8(05): 533-539. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.009

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  藏猪是青藏高原特有的生态猪种，是我国珍贵的地方种质资源。为了保护藏猪种质资源，本试验通过组织块贴壁法和胰酶消化法对藏猪耳部成纤维细胞进行分离培养、传代与冻存，绘制其生长曲线，使用台盼蓝染色法进行细胞活力检测，并进行真菌细菌、病毒和支原体污染检测。结果显示，两种方法均长出梭形、纺锤形或星形的成纤维细胞，发现使用组织块贴壁法培养成纤维细胞比胰酶消化法更易生长、形态学特征和活力更好，冻存复苏的细胞可以正常贴壁生长和传代；其生长曲线为典型的“S”型，潜伏期存在3 d，对数生长期从第4 d开始持续到第8 d，从第9 d开始进入生长抑制期；台盼蓝染色检测活力发现冻存前后成纤维细胞的生长活率在90%以上，且发现不存在真菌细菌、病毒和支原体污染。本试验成功对藏猪耳组织成纤维细胞进行分离纯化培养与冻存，可为体外藏猪克隆提供材料，并为完善藏猪成纤维细胞种质资源库奠定基础。
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  牦牛KSR2基因的双荧光素酶质粒构建及其与bta-miR-22-3p的靶向验证

  王硕, 张敬博, 刘瑞冬, 任晓丽, 董海龙

  高原农业. 2024, 8(05): 540-547. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.010

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  为了鉴定牦牛体内bta-miR-22-3p与KSR2之间的靶向关系，本研究采用miRNA Base数据库对牦牛体内bta-miR-22-3p的序列进行分析，并用Target scan软件预测牦牛bta-miR-22-3p于KSR2基因的3’UT R可能存在的结合位点，然后采用PCR扩增出包含bta-miR-22-3p结合位点的牦牛KSR2基因3'非编码区（3’UTR）片段，并构建出KSR2基因的3’UTR的野生型双荧光素酶报告基因质粒和突变型双荧光素酶报告基因质粒，并将其与bta-miR-22-3p mimics、mimics NC共转染至人胚肾细胞（HEK 293T细胞）中，检测其双荧光素酶活性。miRNA Base数据库中bta-miR-22-3p的序列为AAGCUGCCAGUUGAAGAACU G;Target scan预测出bta-miR-22-3p共有包括KSR2基因在内的568个潜在靶基因，其中包括612个保守位点和190个低保守位点，并且在KSR2基因3’UTR的829-836 bp处存在潜在的bta-miR-22-3p的结合位点；构建的野生型质粒和突变型质粒经双酶切后释放出大小315 bp的条带，测序结果与预期一致，说明质粒构建成功；bta-miR-22-3p mimics能够显著降低（P<0.01）KSR2野生型质粒双荧光素酶的活性。最终说明，牦牛KSR2基因3’UTR双荧光素酶报告基因载体构建成功，并且该基因与bta-miR-22-3p存在靶向关系。
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  拉萨市牦牛数量调查分析与马镇朗巴村牦牛错峰出栏的初步研究

  郎文超, 旦增云丹, 阿秀兰, 任子利

  高原农业. 2024, 8(05): 548-553. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.011

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  为进一步优化拉萨市各县区牦牛畜群结构，推广牦牛错峰出栏，调查分析了拉萨牦牛数量并在马镇朗巴村进行为期90 d的牦牛育肥试验。试验选用体重相近、体况良好的24头成年健康牦牛，随机选取牦牛分为以下3组；对照组饲喂（精料+青稞草）、试验1组饲喂（青贮燕麦草+精料+青稞草）和试验2组饲喂（干燕麦草+精料+青稞草）。调查结果表明：拉萨牦牛主要分布在拉萨市当雄县和林周县及墨竹工卡县，新生犊牛数量最多的县区是当雄县。育肥试验结果表明，对照组牦牛平均每头牛增重3.83 kg，试验组1牦牛平均每头牛增重19.47 kg，试验1组效果明显好于对照组（P<0.05），添加青贮燕麦草的试验组1相比添加干燕麦草的试验组2增重效果更明显（P<0.05）试验结果表明，错峰出栏模式提高反季节出栏牦牛重量和优化了不同饲料对牦牛在短期育肥下的增重效果，也是增加农牧民收入的有效措施。
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  西藏2020年区域协调发展能力研究

  赵帅, 周芳, 王雪

  高原农业. 2024, 8(05): 554-562. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.012

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  为探究西藏区域协调发展能力情况，本文以西藏为研究对象，在新时代三大目标“基本公共服务均等化”、“基础设施通达程度比较均衡”和“人民基本生活保障水平大体相当”的基础上选择适合西藏的区域协调发展指标体系。采用变异系数法和线性加权模型等来评估2020年的区域协调发展能力。结果如下：西藏各地级市之间，拉萨处于良好协调，山南和昌都处于初级协调；日喀则处于濒临失调，阿里处于中度失调，林芝处于严重失调，那曲处于极度失调阶段。本文仅仅测度区域协调发展能力，并不代表实际经济发展水平。相信随着我国的持续发展，西藏不仅经济发展越来越好，西藏各地级市的区域协调发展能力也会越来越好。
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  基于DEA模型的西藏林芝乡村旅游发展效率分析

  赵佩燕, 李雪, 郭英之

  高原农业. 2024, 8(05): 563-570. https://doi.org/10.19707/j.cnki.jpa.2024.05.013

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  近年来，乡村旅游产业成为推动西藏林芝市乡村振兴的重要手段，通过加强基础设施建设、提升乡村旅游服务设施、家庭旅馆的建立以及农牧民旅游就业培训等方式提升林芝市乡村旅游经济。本文选用DEA模型的方法，以2017-2021年期间林芝市乡村旅游发展为研究对象，对林芝市乡村旅游产业效率进行实证研究。研究结果表明：（1）2017、2018以及2020年林芝市乡村旅游发展综合效率和规模效率均小于1，出现投入冗余与产出不足，2020年技术效率小于1、其他年份均等于1,2019和2021年规模效率以及综合效率都等于1呈DEA强有效；（2）2017-2021年林芝市乡村旅游发展效率处于动荡上升趋势，动荡年份为2020年，其他年份呈逐步趋于良好发展状态，林芝市乡村旅游发展模式值得其他地市借鉴。