利用荧光素酶报告基因法研究转录因子USF1结合调控马鹿MicroRNA PC-5p-4811基因启动子机制

高仰, 韩青, 吴玄烨, 索婧媛, 金庆梅, 刘学东, 郑冬

野生动物学报 ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (01) : 63-71.

利用荧光素酶报告基因法研究转录因子USF1结合调控马鹿MicroRNA PC-5p-4811基因启动子机制

  • 高仰, 韩青, 吴玄烨, 索婧媛, 金庆梅, 刘学东, 郑冬
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摘要

为了探究转录因子上游刺激因子1(USF1)调控马鹿(Cervus elaphus)microRNA PC-5p-4811(miR-4811)基因转录的机理,综合运用核心启动子和转录因子结合位点生物信息学预测分析、基因克隆、点突变和双荧光素酶报告基因法等技术研究USF1结合miR-4811启动子分子机制和功能。结果显示:(1)截切突变证实马鹿miR-4811基因的核心启动子位于上游-3 174~-2 966 bp;(2)转录因子USF1在-3 378~+73 bp区域共有2个DNA结合位点(-3 046~-3 031 bp、-3 045~-3 018 bp),均位于miR-4811核心启动子内;(3)USF1作为激活因子可直接结合上述位点激活miR-4811核心启动子上调双荧光素酶报告基因转录表达。研究结果揭示了USF1参与调节microRNA基因转录表达的机理,并为后续USF1/miR-4811调节轴参与调控鹿茸再生发育机制提供了重要基础数据。

关键词

USF1 / 马鹿 / MicroRNA PC-5p-4811 / 启动子 / 转录调控

中图分类号

Q953

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高仰, 韩青, 吴玄烨, 索婧媛, 金庆梅, 刘学东, 郑冬. 利用荧光素酶报告基因法研究转录因子USF1结合调控马鹿MicroRNA PC-5p-4811基因启动子机制. 野生动物学报. 2025, 46(01): 63-71

基金

国家自然科学基金面上项目(31671283)

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