为确定广东省某动物园1只患病海南坡鹿（Rucervus eldii hainanus）的致病菌并探究其主要生物学特性，采集患病坡鹿脓汁，通过细菌分离纯化、形态学观察、16S rRNA基因测序分析和生化试验鉴定对分离株进行种属鉴定；通过药敏试验和毒力基因检测对分离菌进行生物学特性分析。结果显示：该菌株菌落形态呈微弱β溶血、光滑湿润、乳白色、中间凸起且边缘整齐；革兰氏染色呈圆形革兰氏阳性短杆状菌。16S rRNA基因测序分析显示，该菌与10株化脓隐秘杆菌（Trueperella pyogenes）参考菌株同源性在98.81%以上；生化试验鉴定显示，分离菌对蔗糖、麦芽糖和葡萄糖等呈阳性，对乳糖、鼠李糖和甘露醇等呈阴性。综合以上结果确定该分离株为化脓隐秘杆菌。药敏试验结果显示，该菌对青霉素、头孢曲松和头孢克肟等抗菌药物耐药。毒力基因检测结果显示，分离株携带Plo-g2、Plo-g1、NanP、NanH、FimA、FimE和FimC七种毒力基因。研究结果可为野生动物源化脓隐秘杆菌的防治提供参考依据，为化脓隐秘杆菌的进一步研究提供素材。