为探明海门山羊不同组织中肌肉生长抑制素(MSTN)基因表达规律及其编码蛋白结构特点，通过克隆海门山羊MSTN基因CDS序列并分析其生物特点，运用实时荧光定量PCR技术分析MSTN基因在不同组织中的表达水平，在MSTN基因第2、3外显子上设计3个单碱基编辑靶位点，将构建的sgRNA质粒分别与胞嘧啶碱基编辑器YE1-BE3-FNLS电转入培养的海门山羊胎儿成纤维细胞中，筛选48 h后提取细胞基因组DNA,对PCR扩增靶位点序列进行Sanger测序和TA克隆分析。结果：海门山羊MSTN基因的CDS序列编码375个氨基酸，具有高度保守性。海门山羊不同组织中MSTN基因表达水平存在差异，其中骨骼肌的表达量最高；3条sgRNA均可在MSTN基因外显子上进行单碱基编辑，编辑效率分别为25%、37%和29%。结论：研究结果为进一步利用单碱基基因编辑技术培育MSTN基因突变海门山羊新品系提供了新的依据。

白酒糟是酿酒产业的副产品，是一种优质的粗饲料资源。白酒糟经微生物发酵后，能改善白酒糟营养特性，提高饲用价值，进而提高白酒糟的利用率。本文综述了发酵白酒糟的营养价值、发酵工艺及对动物生长、免疫、肠道健康的影响，旨在为饲用豆粕减量替代行动的深入实施提供参考。

传统中药具有增强畜禽免疫功能的作用，提取具有免疫调节功能的中药组分添加于饲料，通过恢复并增强机体的免疫功能，来改善畜禽健康状况和对抗畜禽养殖中的疾病。近年来，新发病、病毒变异以及混合感染所带来的复杂多变的养殖环境，给畜禽养殖业带来了极大的威胁，虽然新型疫苗的使用可以对疾病的预防起到良好的效果，但在面临畜禽极度虚弱、患免疫抑制类疾病等情况时仍束手无策。多项研究表明中药免疫增强剂可以改善畜禽对肿瘤、细菌、病毒以及其他有害物质的免疫反应，起到扶正祛邪的作用。在全面“禁抗”的养殖环境下，中药免疫增强剂以其价格低廉、来源丰富、不易产生耐药性、毒副作用小等多种优势脱颖而出，成为热门的新型畜禽免疫增强剂。本文主要从中药免疫增强剂在畜禽中的使用效果及作用机制进行综述，期望为畜禽养殖以及中药免疫增强剂的开发和临床应用提供参考。

猪流行性腹泻病毒(PEDV)的非结构蛋白Nsp6在诱导宿主细胞自噬中起着重要作用。为进一步确定Nsp6蛋白诱导细胞自噬的关键功能域，本研究利用RT-PCR扩增技术获得了Nsp6及其3个分段基因。首先构建了重组原核表达质粒pSUMO-Nsp6,并转化至大肠杆菌Rosetta感受态中，经IPTG诱导并纯化后，所得蛋白用于小鼠免疫，制备抗Nsp6蛋白的多克隆抗体。再将Nsp6及其3个分段基因分别构建至真核表达载体pCMV-HA,并将其转染至IPEC-J2细胞进行真核表达，通过Western blot和双荧光标记法来确定蛋白表达情况。结果：Nsp6蛋白在Rosetta中成功表达，并通过免疫小鼠获得了效价为1∶10 240的多克隆抗体，该抗体具有与PEDV和Nsp6蛋白特异性结合的能力；免疫荧光及Western blot结果表明，Nsp-6及其截短基因在IPEC-J2细胞中成功表达，且与制备的Nsp6多克隆抗体发生特异性结合。综上，本研究原核表达了Nsp6蛋白并制备了相应的特异性抗体，验证了Nsp6及其分段基因的在细胞中的真核表达，为进一步研究Nsp6蛋白的特性和功能奠定了基础。

家禽胚胎干细胞(ESCs)作为具有高度多能性的细胞，在家禽遗传育种和生物医学研究中展现出重要价值。本文综述了家禽ESCs的概念、特点、维持和分化机制，以及它们在疫苗生产、生物反应器、遗传育种和人类医学研究中的应用。随着分子生物学技术的不断进步，家禽ESCs的研究进一步揭示了胚胎干细胞的分化机制，也为未来的生物技术应用提供了新的方向。

旨在调查华中地区(湖北、河南、湖南)规模化猪场猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的流行感染情况。2019—2022年，采集湖北、河南、湖南等省份的45个规模化猪场中具有呼吸道症状猪的口鼻拭子及肺脏、气管、淋巴结组织等临床病料1 895份，对其进行呼吸道病原菌的检测、分离培养、染色镜检、血清型分型鉴定和药敏试验。结果：呼吸道病原菌阳性样品总检出率为39.68%(752/1 895),其中猪链球菌(Streptococcus suis,SS)为20.11%(391/1 895),多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)为7.39%(140/1 895),副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)为6.65%(126/1 895),胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)为14.35%(272/1 895);在保育阶段，SS和GPS的阳性样品检出率较高，在生长育肥阶段，APP和SS的检出率较高；混合感染结果显示，单一感染占比达75.66%(569/752),以SS感染为主，双重感染占比达23.80%(179/752),以SS+GPS和SS+APP为主，三重感染类型占比为0.53%(4/752),只有SS+GPS+APP一种类型；从病料中分离鉴定到218株呼吸道病原菌，其中包括157株SS、15株Pm、20株GPS和26株APP;血清分型鉴定结果显示，SS流行血清型为2型，Pm流行血清型为A和D型，GPS流行血清型为5和4型，APP流行血清型为1型；药敏结果显示，大多数呼吸道分离菌株对于头孢噻呋和氟苯尼考表现敏感，而对于链霉素和庆大霉素则表现耐药。结论：研究结果为华中地区猪呼吸道疾病综合征细菌性病原感染的防控提供了参考。

旨在研究文昌鸡活体度量性状与皮脂重的关系，本文选取120日龄文昌鸡60只，公母各半，测量其体重、体斜长、胸宽、胸深、龙骨长、骨盆宽、胫长、胫围、胸肌厚、皮脂厚、皮脂重指标，运用SPSS 26.0软件分别对公、母鸡的各项指标数据进行相关性分析、通径分析、逐步线性回归分析等。结果表明，文昌鸡公鸡皮脂重与体重、胸肌厚、皮脂厚呈极显著正相关(P<0.01),与体斜长呈显著相关(P<0.05),其中相关性最大的是胸肌厚(R=0.687),其次是体重(R=0.685);母鸡皮脂重与体重、体斜长、胸肌厚、皮脂厚均呈极显著正相关(P<0.01),其中相关系数最大的是体重(R=0.857),其次是皮脂厚(R=0.630)。体重主要通过直接作用影响文昌鸡皮脂重，体斜长主要通过间接作用影响文昌鸡公鸡皮脂重，胫长主要通过间接作用影响文昌鸡母鸡皮脂重。公、母鸡活体可度量性状与皮脂重的最优回归方程分别为：Y_(皮脂重)=396.649+42.279X_(胸肌厚)+0.187X_(体重)+1 213.592X_(皮脂厚)-36.516X_(体斜长),Y_(皮脂重)=193.928+0.264X_(体重)-61.334X_(胫长)。

旨在运用现代生物信息学技术，评估湖羊群体的遗传结构，构建详细的系谱记录。通过对40只湖羊种公羊进行单核苷酸多态性(SNP)位点检测，基于检测结果进行遗传结构分析、主成分分析和进化树构建。结果：在40只种公羊中，共检测得到952 214个SNPs;平均核苷酸多样性在0.212 9～0.242 5之间，平均观测杂合度大于平均期望杂合度，遗传分化程度值在0.370 2～0.452 4之间；状态同源(IBS)遗传距离在0.173 9～0.228 0之间，平均为0.220 9;主成分分析和系统进化树的结果一致，最终可以将40只种公羊分为14个家系，湖羊群体中大部分个体间的亲缘关系较远，具有较高的遗传多样性和选择潜力。本研究在全基因组水平上，分析了湖羊种公羊的遗传结构和亲缘关系，完善了系谱记录，为湖羊场后续育种、配种等提供了科学依据。

旨在探究骨桥蛋白(OPN)基因与贵州黑山羊卵巢颗粒细胞(OGCs)增殖和凋亡间的关系。以贵州黑山羊为研究对象，通过构建OPN基因的4个干扰载体，转染至OGCs,并采用实时荧光定量PCR技术检测不同干扰载体对OPN基因的抑制效率，筛选最佳干扰载体；采用细胞计数试剂盒-8(CCK8)检测细胞增殖活力，细胞划痕试验检测其迁移能力；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测与其相关的繁殖标记基因和凋亡相关基因的表达情况。结果：成功构建了OPN基因的4个干扰载体，与shRNA-NC组相比，shRNA-OPN-222、shRNA-OPN-385和shRNA-OPN-741均极显著抑制了OPN基因的表达(P<0.01),且shRNA-OPN-222抑制效果最佳；CCK8和细胞划痕试验结果表明，与shRNA-NC组相比，shRNA-OPN-222极显著抑制了OGCs的增殖活力和迁移能力(P<0.01);RT-qPCR结果发现沉默OPN基因极显著抑制了核心蛋白聚糖2(DCN2)、细胞色素P450家族19亚家族A肽1(CYP19A1)和雌激素受体1(ESR1)的基因表达(P<0.01),显著促进了β-连环蛋白结合因子2(CTNNB2)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)和Bcl-2关联X蛋白(Bax)的基因表达(P<0.05),对铁蛋白重链1(FTH1)、胱天蛋白酶9(Caspase-9)的基因表达无显著影响。结论：干扰OPN基因，可以有效抑制OGCs的增殖和迁移，降低繁殖相关基因的表达水平，同时促进细胞的凋亡进程，这一研究为进一步阐明OPN基因影响山羊繁殖率的分子机制奠定了基础。

近期研究发现，14.5%的猫过敏患者血清中存在针对新型猫过敏原蛋白——尼曼匹克C2型蛋白（Niemann-Pick type C2,NPC2）的高特异性免疫球蛋白E（IgE）。为了深入解析该蛋白的致敏机制，并开发高效、精准的多表位疫苗，本研究针对猫的新型过敏原NPC2进行了疏水性分析、磷酸化位点预测、糖基化位点预测以及信号肽预测分析；通过NCBI数据库的蛋白质序列比对后建立猫过敏原蛋白NPC2的系统进化发育树；使用SOPMA软件对NPC2蛋白进行二级结构的预测分析，利用Swiss-Model进行了3D结构的同源建模，并与犬过敏原蛋白Can f7的抗原表位进行了比较。结果：猫过敏原蛋白NPC2与美洲狮NPC2蛋白的序列同源率最高，达到99.33%;猫过敏原蛋白NPC2的B细胞线性抗原表位序列为⁸⁵FPIPEADGCKSG⁹⁶、²²VIFKDCG²⁸、¹⁰⁰PIQQGKTYSY¹⁰⁹、⁶⁵VSSQG⁶⁹、¹³²GDKEQ¹³⁶和¹¹⁵VKNEYPS¹²¹,T细胞表位为²⁶DCGSGFGVI³⁴、¹²⁹QLLGDKEQN¹³⁷、⁶VAFVLLALSASGLAE²⁰、⁷¹KALVYGILMGVAVPF⁸⁵和¹¹⁶KNEYPSIKVMVKWQL¹³⁰;猫过敏原蛋白NPC2的构象性表位主要位于无规卷曲区域；此外，猫过敏原蛋白NPC2与犬过敏原蛋白Can f7的抗原表位序列具有一定的相似性，可能具有免疫交叉反应性和交叉保护性。综上，本研究通过生物信息分析获得了猫过敏原蛋白NPC2的B细胞、T细胞优势抗原表位，其结果可为宠物过敏原蛋白的多表位疫苗研究提供理论基础，并为对猫过敏的免疫治疗提供新的干预靶点和策略。

为了研究猪流行性腹泻病毒（PEDV）流行毒株的生物学特性，采集仔猪临床腹泻病料进行病毒分离，结果显示，接种病料的Vero细胞连续盲传3代后可观察到明显的细胞病变，通过间接免疫荧光试验确定导致细胞病变的病毒为PEDV,毒株命名为JMS。通过RT-PCR扩增JMS毒株S基因并进行系统进化树分析发现，JMS属于GⅡb基因型。采用500 TCID₅₀（半数组织细胞感染量）的剂量对3日龄仔猪进行攻毒发现，攻毒仔猪表现出严重的临床症状，并在48 h内死亡，致死率为100%。对仔猪剖检和病理组织切片检查发现，攻毒仔猪肠壁变薄，绒毛结构破损、变短甚至脱落。综上，本研究分离到1株高致病性PEDV毒株，为后续探究PEDV流行毒株生物学特性以及相关疫苗研发奠定了基础。

为了建立一种快速、高效且灵敏的猪流行性腹泻病毒(PEDV)的现场快速检测技术，本研究以荧光量子点标记鼠抗PEDV单克隆抗体并喷涂到结合垫上，将鼠抗PEDV单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体固定到NC膜上，分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条，并对其敏感性、特异性及临床样品检测性能进行考察。结果：所制备的荧光试纸条可在20 min内完成临床样品中PEDV的现场检测，最低检测限为3.3×10~3 TCID_(50)/mL,与猪轮状病毒、猪丁型冠状病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病病毒、沙门菌、金黄色葡萄球菌等常见病原无交叉反应，对50份粪便、粪便拭子和肠道组织等临床样品进行检测，与RT-PCR检测结果的符合率为84.0%。本试验表明该试纸条具有较高的灵敏度和较强的特异性，检测时间短，操作简便，可用于PEDV的现场快速筛查。

通过大肠杆菌表达系统对CRM_(197)-4GnRH重组去势疫苗抗原进行表达，采用不同种类佐剂制备疫苗，研究其对大鼠的免疫去势作用，为获得1种免疫效果好、有效期长、生产成本低的促性腺激素释放激素(GnRH)免疫去势基因工程疫苗提供借鉴。采用白喉毒素无毒突变体(CRM_(197))与4拷贝GnRH串联，将CRM_(197)-4GnRH基因与表达载体连接，并通过优化试验确定大肠杆菌的最优表达条件，用SDS-PAGE和Western blot鉴定目标蛋白的表达情况。将融合蛋白与不同佐剂乳化，制备成9种测试疫苗后分别免疫大鼠，测定血清中GnRH抗体滴度和睾酮浓度。结果显示，重组大肠杆菌的最优表达条件为诱导时间表达5 h,培养基为LB液体培养基，IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L;通过SDS-PAGE和Western blot试验，表明目标融合蛋白已成功表达；动物试验结果表明，重组疫苗水包油包水佐剂组、重组疫苗油包水佐剂组、GnRH+Th抗原(辅助型T细胞抗原)表位(G1抗原)油包水佐剂组测试疫苗免疫大鼠较其他组GnRH抗体滴度显著升高、睾酮浓度显著下降(P<0.05),表明这3种疫苗具有良好的免疫去势作用。研究结果为GnRH免疫去势疫苗的研制奠定了基础。

通过对畜禽屠宰环境和畜禽肉中单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)的污染情况及其分离株生物学特性进行分析，以便为畜禽屠宰和销售环节中LM风险监测提供数据，为防控LM的污染奠定基础。随机采取屠宰场环境、畜禽胴体及污水样品，参照国标方法经增菌、分离，对可疑为LM的菌落进行PCR鉴定，对分离菌株进行血清分型、多位点序列分型(MLST)、生物被膜形成能力、生长曲线和消毒剂最小抑菌浓度(MIC)的分析。结果：1 239份样本检出58株单增李斯特菌，检出率为4.68%,胴体、屠宰环境、屠宰污水在各自样本中检出率分别为4.81%、4.80%、3.48%;58株LM有1/2a(8.62%)、1/2b(44.83%)、1/2c(46.55%)这3种血清型，19种序列型(ST);25株LM分离株生物被膜和生长能力强于参考株；甲醛溶液、苯扎溴铵、碘溶液和氢氧化钠4种消毒剂对7～10株LM分离株的MIC值高于参考株。综上，畜禽屠宰场及农贸市场中存在LM污染，且菌株具有一定的抗逆性。

旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株，荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化，同时选取LSDV保守基因ORF077建立检测LSDV ORF077的标准曲线，检测LSDV ORF140缺失株与野毒株在不同时间点的拷贝数变化，然后通过蛋白质谱技术和免疫共沉淀技术分析140蛋白与宿主细胞内存在相互作用的蛋白，最后敲低此蛋白的基因转录水平检测宿主细胞内细胞因子转录水平的变化。结果：LSDV ORF140缺失株会引起宿主细胞β-catenin基因转录水平显著下调(P<0.000 1)且缺失株拷贝数始终比野毒株高，推测LSDV ORF140基因的存在能激活宿主细胞的Wnt/β-catenin(Wnt/β-连环蛋白信号通路)信号通路，并且该通路的激活会影响LSDV的复制，宿主细胞中的连接斑珠蛋白(JUP)与LSDV 140蛋白存在相互作用，敲低宿主细胞JUP基因转录水平，发现β-catenin基因转录水平下调(P<0.05),感染LSDV后，β-catenin基因转录水平仍处于下调状态，并且检测到此时病毒拷贝数比野毒株高(P<0.05),以此推测LSDV ORF140是通过与JUP结合激活Wnt/β-catenin信号通路，从而影响LSDV的复制。综上，本研究证实LSDV 140蛋白能够与宿主细胞中的JUP蛋白结合，激活Wnt/β-catenin信号通路，从而抑制LSDV的复制，为揭示LSDV与宿主之间的相互作用及LSDV的致病机制提供参考。

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种在自然界及动物胃肠道内广泛存在的条件性致病菌，对畜禽养殖造成严重的经济损失。目前，接种疫苗是防控产气荚膜梭菌感染的主要手段，并有助于减少抗菌药物在畜禽养殖中的使用，减缓细菌耐药性的发展。本文综述了产气荚膜梭菌α、β、ε毒素蛋白作为疫苗抗原成分的应用，重点阐述在灭活疫苗、类毒素疫苗、基因工程活疫苗、纳米颗粒疫苗或佐剂和多表位疫苗5个方面的研究进展，以期为新型疫苗的研制提供参考。

旨在观察猪正常和囊肿卵巢中血管生成素(ANG)的定位和表达情况，探讨ANG的表达与猪卵巢囊肿发生之间的关系。从屠宰场收集250～300日龄的大白猪母猪卵巢，根据形态将其分为正常组和卵巢囊肿组(n=8),通过HE染色对正常卵巢和囊肿卵巢进行形态学观察，利用Western blot检测卵巢中ANG蛋白的表达，采用免疫组织化学法检测卵巢中ANG的定位和表达情况。结果：外观上囊肿卵泡和囊肿黄体体积明显增大，卵泡膜细胞和黄体细胞均出现肿大、间隙不均和脂滴空泡增多的异常现象；Western blot结果表明囊肿卵巢中ANG的表达量极显著升高(P<0.01);免疫组化检测显示ANG在囊肿卵泡膜细胞和囊肿黄体细胞中的表达量明显上升，而在囊肿卵巢正常部位处有腔卵泡膜细胞中的表达量明显减少。结论：ANG与猪卵巢囊肿的发生之间存在关联，提示ANG可以作为一种诊断标志物，为临床上卵巢囊肿的确诊提供帮助。

为了解福建地区致猪腹泻病病毒的流行现状和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的变异情况，2023—2024年从福州市某疑似感染腹泻病毒的规模化猪场采集发病仔猪样品，经RT-PCR进行PEDV、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)核酸检测，并对PEDV阳性病料进行纤突蛋白(S)基因序列扩增和测序，进行遗传演化分析。结果：PEDV、TGEV和PoRV检出率分别为32.29%(31/96)、30.21%(29/96)和4.17%(4/96),其中PEDV和TGEV混合感染17份(17.71%),TGEV和PoRV混合感染1份(1.04%),PEDV、TGEV和PoRV三重混合感染1份(1.04%)。从10份PEDV阳性猪肠道组织样品中获得10株PEDV的S基因序列，全长3 753～4 179 bp,编码1 250～1 392 aa, 10株PEDV的S基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为94.9%～99.8%和83.8%～99.7%。S基因系统发育进化树结果表明，6株属于GⅠb亚型，4株属于GⅡb亚型，且4株PEDV的S基因为独立的一小分支。与经典毒株CV777的S基因序列相比，10株PEDV的S基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为93.6%～96.9%和83.9%～95.9%,存在23个保守氨基酸位点突变，在162 aa处缺失1个氨基酸(R),GⅠb亚型的6株PEDV S蛋白存在10个保守氨基酸位点突变；GⅡb亚型的4株PEDV S蛋白存在45个保守氨基酸位点突变，在59～62 aa处有4个氨基酸(QGVN)插入，163 aa处缺失1个氨基酸(D)。综上，福建某规模化猪场PEDV流行率较高，流行毒株基因型呈现多样性，说明流行株持续变异，临床上应予以高度重视。

目前食品安全问题越来越受到重视，市面上常见的肉源检测方法存在自身的局限性，本研究探索基于线粒体基因ATP酶8亚基(ATP8)和NADH脱氢酶亚基1(ND1)基因检测不同肉源种属，旨在为肉类掺假鉴别新技术的开发提供技术支撑。以猪、牛、羊、鸡、鸭、兔、大鼠和小鼠共8种肉源的DNA作为检测靶标，根据ATP8和ND1基因中种间特异性强的序列来设计引物，采用PCR技术对目标DNA片段进行扩增，利用琼脂糖凝胶电泳对PCR扩增产物进行检测。结果：成功构建了引物组合分别为小鼠+鸡+羊，猪+牛+兔，鸭+大鼠的复合检测体系，能准确鉴别以上8种肉源种属；随机在市场采集里脊肉、开花肠、飘香牛肉、肉肠和肥牛卷共5种样本进行测试，其中里脊肉、开花肠、肉肠与配料表成分一致，飘香牛肉、肥牛卷与配料表成分不一致，证实该方法可应用于市场肉制品检测；该方法有效识别浓度达1 ng/μL。综上，本研究建立了8种肉源的低成本、高效的复合PCR检测体系，可以为食品安全中的肉类掺假鉴别提供帮助。

旨在了解饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊血清抗氧化指标和肌肉脂肪酸含量的影响。选择体重相近的健康4月龄湖羊45只，随机分为3组，各组3个重复，每个重复5只。对照组采用玉米-豆粕型基础饲粮，试验A组采用基础饲粮+10%膨化亚麻籽，试验B组采用基础饲粮+5%膨化亚麻籽+5%微藻粉，试验期为2个月。结果：试验A组谷胱甘肽过氧化物酶活性较对照组显著下调28%(P<0.05);与对照组相比，试验A组和B组显著降低超氧化物歧化酶活性(P<0.05),显著增加过氧化氢和丙二醛含量(P<0.05),显著提高湖羊背最长肌中n-3多不饱和脂肪酸含量(P<0.05),显著降低n-6/n-3多不饱和脂肪酸比值(P<0.05)。本试验结果表明，添加亚麻籽和微藻粉各5%对羊肉品质影响效果最优。

为了解我国部分地区猪场猪轮状病毒(porcine rotavirus, PoRV)的流行情况及分子特征，对2021—2022年我国部分省份的86个规模化猪场的6 472份腹泻样品进行检测，用RT-PCR方法调查PoRV的流行率，并对PoRV阳性样本进行VP7和VP4基因扩增、测序，使用MegAlign软件进行同源性分析，利用MEGA11.0构建系统进化树。结果显示，PoRV的样品阳性率为27.89%(1 805/6 472),猪场阳性率为65.12%(56/86);从98份阳性PoRV样本中扩增出76个VP7片段，G9为优势基因型(42.11%),基因型G5、G26、G3、G4、G1、G2和G11各占26.32%、9.21%、6.58%、6.58%、3.95%、2.63%和2.63%。扩增出的35个VP4基因片段，以P[13]型为主，占57.14%;其次为P[7]、P[23]、P[3]和P[6]型，分别占20%、14.29%、5.71%和2.86%。35个毒株成功鉴定出G/P基因型，G9P[13](28.57%)为优势组合基因型，其他基因型为G5P[13](11.43%)、G4P[13](8.57%)、G9P[23](8.57%)、 G26P[13](5.71%)、G1P[7](5.71%)、G26P[3](5.71%)、G5P[7](5.71%)、G3P[7](2.86%)、G11P[23](2.86%)、G5P[23](2.86%)、G11P[7](2.86%)、G3P[13](2.86%)、G5P[6](2.86%)和G4P[7](2.86%),其中G11P[7]为国内首次鉴定到的基因型。综上，目前PoRV的流行率高且基因型复杂，优势组合基因型为G9P[13]。该结果丰富了PoRV的分子流行病学资料，对我国猪PoRV感染的防控具有重要意义，也为新型疫苗研发提供了参考依据。

肌肉生长发育是畜禽生产性能的重要指标之一，受多种成肌调节因子的影响。表观遗传修饰是指在没有改变DNA序列的情况下，通过改变染色质结构和DNA甲基化等方式来调控基因表达。在动物体肌肉生长发育过程中，表观遗传修饰起着重要的调控作用。本文首先梳理了畜禽肌肉生长发育的影响因子，随后重点论述了DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA这3类表观遗传修饰对畜禽肌肉生长发育的影响，旨在理解畜禽肌肉生长发育的表观遗传调控机制，为进一步指导畜禽肌肉发育调控的生产实践提供理论基础。

旨在通过收集陕西榆林市某羊场具有呼吸道病史的绵羊肺组织样本，开展病原微生物的分离鉴定及药敏试验。样本经培养后分离得到支原体疑似菌株，对可疑菌株进行形态学、生理生化鉴定，确定为疑似绵羊肺炎支原体(Mesomycoplasma ovipneumoniae)。通过16S rRNA特异性引物扩增获得361 bp目的基因片段。经测序后BLAST分析发现，分离菌株的基因片段均与绵羊肺炎支原体的Y98参考株(GenBank登录号：NR＿025989.1)同源性为97.81%,在遗传进化树同一分支，将其命名为绵羊肺炎支原体SY-1菌株。按照梯度稀释SY-1菌液，采用解脲支原体(CCU)计数方法绘制其生长曲线，结果发现绵羊肺炎支原体的最高菌量可达到10～9 CUU。药物敏感性试验结果显示，SY-1对多西环素高度敏感，对环丙沙星中度敏感，对头孢曲松、庆大霉素、苯唑西林、恩诺沙星和阿奇霉素均显示为低敏感度，而对利福平不敏感。本试验为羊场呼吸道疾病的防治和临床用药提供了参考。

乳腺癌是雌性犬中发病率最高的癌症，有极高的转移率、复发率，治疗手段有限且难以完全治愈，本研究旨在探究泊沙康唑对干扰素基因刺激器（STING）激动剂cGAMP抗4T1乳腺肿瘤效应的增效作用。将BALB/c小鼠皮下注射4T1细胞建立乳腺癌移植瘤模型，然后分为Control组、cGAMP单独治疗组、泊沙康唑单独治疗组以及泊沙康唑+cGAMP联用组，观察并记录治疗过程中4T1乳腺肿瘤的体积、小鼠的体重以及生存率；通过流式细胞术评估各组小鼠脾脏和肿瘤引流淋巴结中CD69⁺T细胞的比例；通过高通量转录组测序探究肿瘤内免疫相关基因表达谱的变化。结果：与cGAMP单独治疗组相比，泊沙康唑+cGAMP联用组中小鼠肿瘤体积显著下降，生存率显著提高，且小鼠脾脏和肿瘤附近引流淋巴结中CD69⁺T细胞比例显著升高；在转录组测序中，与cGAMP单独治疗组相比，泊沙康唑+cGAMP组中cGAS-STING通路相关基因、细胞毒性相关基因及T细胞特征基因的富集程度更高。以上结果表明，泊沙康唑增强了cGAMP的体内抗肿瘤效应，改变了肿瘤免疫相关基因表达谱，并促进了cGAS-STING通路及其下游通路相关细胞因子反应的激活，可作为有效的STING通路激活增效剂，增强机体抗肿瘤免疫反应。

通过给放牧条件下泌乳母马补饲赖氨酸和苏氨酸，探究其对泌乳母马血液生化指标的影响，为氨基酸调控泌乳期母马的健康提供参考依据。选择产驹日期相近(5月份),年龄7～9岁，胎次4～5胎，平均体重(428.00±33.42) kg,泌乳30 d的伊犁马母马24匹，随机分为4个组，每组6匹，分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组。在相同的放牧条件下(放牧时间、饮水时间、挤奶时间和放牧草场完全相同),对照组不进行任何氨基酸补喂，试验Ⅰ组每匹马补饲赖氨酸40 g/d+苏氨酸20 g/d,试验Ⅱ组每匹马补饲赖氨酸60 g/d+苏氨酸40 g/d,试验Ⅲ组每匹马补饲赖氨酸80 g/d+苏氨酸60 g/d。整个补饲期为120 d,定期采集母马血液，测定相关生化指标。结果：在蛋白质代谢方面，试验Ⅰ～Ⅲ组母马血液中总蛋白和白蛋白含量均显著低于对照组(P<0.05),尿酸含量分别比对照组提高16.33%、37.20%和17.58%;在糖脂代谢方面，试验Ⅰ～Ⅲ组的总胆红素均极显著高于对照组(P<0.01),葡萄糖和甘油三酯含量均低于对照组；在酶活力方面，试验Ⅰ～Ⅲ组的谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力均极显著低于对照组(P<0.01),碱性磷酸酶和肌酸激酶的活力随着赖氨酸和苏氨酸剂量的增加而呈上升趋势；在矿物质方面，Ca~(2+)、无机磷和Mg~(2+)的含量各组之间均无显著差异(P>0.05),但试验Ⅱ组Fe~(2+)含量最高，与其他3组有显著或极显著差异。综上，在放牧条件下给泌乳母马补饲赖氨酸和苏氨酸可降低其血液中葡萄糖、甘油三酯含量以及谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活力，提高总胆红素、无机磷、Mg~(2+)和Fe~(2+)的含量，促进泌乳母马的健康，以每匹泌乳母马摄入60 g/d的赖氨酸和40 g/d的苏氨酸效果最佳。

有研究证实，霍乱毒素(CT)A1亚基与葡萄球菌G蛋白的D肽偶联构建的融合蛋白CTA1-DD具有良好的佐剂效果。为了获得重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中的表达，将CTA1-DD基因连接到表达载体pHT43中，构建重组枯草杆菌表达载体pHT43-CTA1-DD。将重组载体转化到枯草芽胞杆菌WB600中，用IPTG诱导重组菌表达，发酵液离心后取上清液，通过SDS-PAGE和Western blot方法分析蛋白表达情况。发酵上清液经Ni-IDA琼脂糖树脂纯化，与流感病毒HA抗原混合后共同滴鼻免疫小鼠后采集小鼠血清和支气管肺泡灌洗液检测IgG和IgA的抗体水平。结果显示：重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中能够分泌表达，在发酵罐中发酵36 h情况下蛋白表达量最高，目的蛋白大小在42 kDa左右，蛋白产量最高能到700μg/mL,Western blot检测目的蛋白正确表达。重组蛋白经过Ni-IDA琼脂亲和层析纯化后与HA抗原混和滴鼻免疫小鼠，ELISA结果显示CTA1-DD蛋白组针对HA抗原能够诱导更高的血清IgG和黏膜IgA抗体水平，说明枯草芽胞杆菌表达的CTA1-DD蛋白具有佐剂活性。试验结果为进一步研究CTA1-DD蛋白在黏膜佐剂的大规模生产应用奠定了基础。

在全球气候变暖和现代养殖业快速发展的背景下，肉鸡在生长速度提高的同时其抗逆性减弱，而高温环境给其带来的挑战愈发严峻。肉鸡胚蛋孵化中后期和育雏早期是其基础代谢、体温调节等生理功能完善的关键时期。在鸡胚发育中后期采取适当强度的高温热处理，能够改变出雏肉鸡在高温环境下的体热调节机制，提高肉鸡的抗热性能，减轻高温热应激对其造成的损害，从而提高肉鸡养殖企业的经济效益。

为得到赤羽病病毒(AKV)G1蛋白的截短表达产物作为诊断抗原，通过PCR扩增、酶切、连接、转化等技术手段，成功克隆出优势抗原结合表位区Thr189-Val 397对应的目的基因G1-2。将目的基因克隆至昆虫杆状病毒表达载体pFastBac HTB,将该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞，得到重组穿梭质粒Bacmid-AKV-G1-2,用Cellfectin ReagentⅡ介导转染sf9细胞，获得重组蛋白，Western blot法检测和分析重组蛋白表达情况。软件分析结果表明189～397 aa肽段为亲水性蛋白，存在跨膜区，该蛋白存在多个潜在的磷酸化位点，具有丰富的潜在抗原表位，属于优势抗原肽段，选取该肽段进行截短真核表达，以AKV抗体阳性血清进行Western blot鉴定，重组蛋白能被特异性识别，出现预期蛋白反应条带，表明G1-2蛋白成功表达，分子量约为27 kDa。本研究为进一步开展截短表达产物为抗原的赤羽病病毒诊断试剂研制奠定了基础。

为了研究康乐黄鸡肌肉生长抑制素(MSTN)基因单核苷酸多态性(SNP)的位点分布，进一步探究提供相应的分子标记，用于辅助地方品种选育改良，以康乐黄鸡为试验对象，全血提取DNA,利用PCR扩增反应扩增基因，进行双向测序，测定基因序列。结果显示：MSTN基因第一外显子中，存在1个SNP位点，为C→G碱基突变，该突变位于7号染色体上252 542 bp处，关联分析发现突变纯合子GG型的上市日龄体重显著高于CC型和CG型(P<0.05)。提示：该突变为康乐黄鸡上市体重性状的有利突变，值得进一步研究。

为探究鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus, DTMUV)GDSH07株对1日龄雏麻鸭致病性，本研究利用GDSH07毒株感染细胞，进行病毒传代后纯化，通过PCR扩增NS5和E基因并测序确定该毒株所属流行分支，并测定病毒滴度；用病毒液(TCID_(50)=10~(-6),0.2 mL)攻毒1日龄雏麻鸭，观察各组织器官临床剖检病变，并制成组织切片观察其组织病理变化，荧光定量PCR检测各组织器官的病毒载量。结果显示：将病料研磨液接种至鸭胚成纤维细胞(DEF)和BHK-21细胞后72 h均出现明显细胞病变，遗传演化分析结果显示本研究毒株GDSH07属于国内流行毒株clade2.2分支；1日龄雏鸭攻毒试验中，攻毒组雏鸭各组织器官(肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊、脑)均出现不同程度损伤，其中肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊等组织器官病毒载量均在攻毒后3 d达到峰值，脑在7 d达到峰值，随后逐渐下降。本研究对了解我国当前DTMUV流行株的致病性具有一定意义。

为了探究不同剂量绞股蓝多糖(Gynostemma pentaphyllum polysaccharides, GPP)对热应激引起的小鼠睾丸氧化损伤的保护作用，本研究采用生物化学、酶联免疫吸附、免疫组化等技术分别对空白对照(Con),热应激对照(HS),绞股蓝多糖高(GPP-H)、中(GPP-M)、低剂量(GPP-L)组小鼠的睾丸指数、睾丸细胞凋亡、雄激素受体表达以及生精小管直径、睾丸组织抗氧化能力进行观察和测定分析。结果发现，GPP-L组和GPP-M组血清睾酮含量与HS组相比均显著升高(P<0.05);GPP-M组和GPP-L组的丙二醛(MDA)含量与HS组相比显著降低(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量、过氧化氢酶(CAT)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力与HS组相比显著升高(P<0.05);GPP各剂量组睾丸曲精小管直径与HS组相比均显著增大(P<0.05);各GPP剂量组凋亡细胞累计光密度值/视野下睾丸组织的面积(IOD/Area)较HS组均有所减小，其中，GPP-M组显著减小(P<0.05);各GPP剂量组AR阳性细胞IOD/Area较HS组均有所增大，其中GPP-L和GPP-M组雄性激素受体(AR)表达程度显著增强(P<0.05)。结果表明，GPP可以改善热应激导致的睾丸组织损伤和细胞凋亡，保护AR蛋白的正常表达以及提高热应激小鼠睾丸抗氧化能力，其中GPP-M效果较好。

为探讨鸭昼夜节律相关基因RORB(视黄醇相关孤儿受体B)与鸭蛋重性状的相关性，采用Illumina测序的方法对90只金定鸭RORB基因序列进行测序，以分析RORB基因上3个SNP位点在不同蛋重鸭个体的差异，并与300日龄和450日龄蛋重进行相关性分析；荧光定量PCR的方法检测RORB及相关基因CLOCK、BMAL1和PER2 mRNA在不同蛋重鸭卵巢组中的表达差异。结果表明，RORB基因上Z-35251072和Z-35256947位点的SNP突变与鸭450日龄的蛋重呈显著负相关，Z-35278196位点的SNP突变与鸭300日龄和450日龄蛋重呈显著负相关；RORB和PER2在低蛋重组中的表达显著高于在中蛋重和高蛋重组的表达(P<0.05),而CLOCK和BMAL1在高蛋重组中的表达显著高于中蛋重和低蛋重组的表达(P<0.05)。结果提示，RORB在鸭的蛋重性能中可能发挥重要作用，且可能与昼夜节律相关基因间的相互调节有关，该结果为研究鸭的蛋重性能调控奠定理论基础。

本研究旨在评估荷叶碱(NUC)对高脂饮食比格犬的抗肥胖效果和安全性。试验选取36只成年比格犬，适应性饲喂2周后随机等分为6组：正常饲粮组、含0.1%NUC正常饲粮组、高脂饲粮组、含0.05%NUC高脂饲粮组、含0.1%NUC高脂饲粮组和含0.15%NUC高脂饲粮组。饲喂8周后，进行血常规、血液生化和血液电解质检测，并对腹股沟皮下脂肪组织进行HE染色观察脂肪细胞大小。结果显示：高脂饲粮组的终末体重、体重增量、皮下脂肪厚度、脂肪细胞面积，血中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等均高于正常饲粮组，添加0.1%NUC和0.15%NUC均可逆转这些变化。此外，添加0.1%NUC降低了高脂饮食犬总胆红素(TBIL)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平，添加不同剂量NUC对血常规参数和血清电解质无影响。综上，NUC可改善高脂饮食诱导比格犬的肥胖和肝酶变化，0.1%的添加剂量效果最佳。

旨在利用6-羧基荧光素(6-FAM)与6-FAM单克隆抗体、生物素与链霉亲和素之间的特异性结合，制备可用于nfo酶切割探针的重组酶聚合酶(RPA)反应产物结果可视化的胶体金侧向免疫层析试纸条(GICS)。通过杂交瘤法和诱生腹水法制备了高亲和力的6-FAM单克隆抗体(亲和力常数为5.38×10~9 L/mol),再运用高浓度NaCl破坏试验，确定了胶体金与6-FAM抗体的最佳标记pH值为8.0,最佳抗体标记量为12μg/mL,并使用模拟样本确定了最佳检测(T)线包被缓冲液为0.2 mol/L(pH值5.0)。然后使用RPA nfo反应产物作为实际样本，观察条带的深浅，最终确定在层析液为0.1 mol/L PB(pH值7.4)、T线包被1 mg/mL SA、反应液用量5μL及金标抗体用量10μL条件下，能实现试纸条最佳检测性能。自主研发的胶体金侧向免疫层析试纸条在加样5 min后能出现清晰的条带，与目前商品化试纸条的可视化判定结果一致，能替代现有的商品化试纸条，降低检测成本、缩短检测时间，对建立RPA nfo-GICS及RPA-CRISPR Cas12a-GICS检测方法奠定了基础。

旨在研究饲粮中添加改性凹土对泌乳前期奶牛产奶性能和血液生化指标的影响。选取24头产奶量和泌乳时间相近的荷斯坦奶牛，随机分为2组。对照组饲喂原奶牛场日粮，试验组每天添加15 g/d改性凹土，改性凹土与少量精料混合后单独投喂，对照组饲喂等量精料。试验预饲期7 d,正试期56 d。试验期间每周测定1次乳成分，试验开始和结束时采血样，用于测定血液生化指标。结果表明：与对照组相比，饲粮添加15 g/d改性凹土后奶牛乳蛋白率显著提高(P<0.05),乳糖率显著降低(P<0.05);与试验前相比，饲粮添加15 g/d改性凹土后奶牛血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH-PX)活力显著提高(P<0.05),白介素-6(IL-6)、脂多糖(LPS)含量显著降低(P<0.05)。综上，改性凹土可提高泌乳前期奶牛乳蛋白率和机体抗氧化能力，降低机体炎症反应。

玉米赤霉烯酮(ZEN)是镰刀菌属产生的一种真菌毒素，广泛存在于饲料和饲料原料中，其中玉米及其副产物是ZEN的主要污染对象。鉴于ZEN污染造成的巨大经济损失和健康隐患，迫切需要相关的技术对其进行快速有效脱毒。相较于物理和化学脱毒法的诸多弊端，生物脱毒法因其显著优势被认为是ZEN脱毒技术的最佳方法。本文通过概述ZEN的危害及限量标准，系统总结ZEN在玉米及其副产物中的污染现状，列举了可用于ZEN解毒的微生物，讨论了ZEN脱毒的生物学机制，以期为ZEN生物脱毒技术研究和实际应用提供理论依据。

以原核系统表达的非洲猪瘟病毒p54重组蛋白为免疫原接种BALB/c小鼠，经过细胞融合、间接ELISA筛选和多次亚克隆获得了3株能够稳定分泌抗p54蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系，分别命名为2A4、5F6和RH15。3株单克隆抗体的重链均属于IgG1亚类，轻链均为Kappa型。Western blot和免疫荧光试验(IFA)证明3株单克隆抗体具有良好的反应性，可以用于靶抗原的特异性检测。通过噬菌体展示肽库筛选，确定了单克隆抗体2A4、5F6识别的抗原表位为~(157)NTASQ~(161),RH15识别的抗原表位为~(170)RQRNTYTHKDL~(180),进一步完善了靶抗原的B细胞线性抗原表位信息。

为了研究猪链球菌2型(SS2)核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)的催化特性，利用大肠杆菌BL21(DE3)异源表达猪链球菌2型RNaseⅢ(SS-RNaseⅢ)并通过镍柱亲和层析的方法分离纯化。异源表达研究显示，重组蛋白RNaseⅢ大部分为可溶性表达；催化特性研究显示，RNaseⅢ主要依赖Mg~(2+)或Mn~(2+)发挥催化功能，并在不同离子浓度和pH值环境下具有不同的催化活性；底物特异性研究显示，RNaseⅢ特异性切割长度为30 bp的双链RNA,同时对内源性的rnc mRNA和5S rRNA具有良好的特异性。上述结果表明，相较于其他细菌RNaseⅢ,SS-RNaseⅢ具有独特的催化特性，为深入理解RNaseⅢ如何介导SS2致病机制奠定了基础。

磷酸丙糖异构酶(TPI)是生物体糖酵解的一种关键酶，对大片吸虫获取能量而赖以生存有着十分重要的作用。本试验根据肝片吸虫TPI (GenBank:KC164346.1)的基因序列，设计带有BamHⅠ和XhoⅠ作为酶切位点的引物，以大片吸虫的cDNA为模板，扩增大片吸虫磷酸丙糖异构酶(FgTPI)基因。结果：FgTPI基因开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸，理论等电点pI为8.07;构建的重组表达质粒FgTPI-pET-28a(+)成功在大肠杆菌中表达，重组蛋白的分子量约为32 kDa;重组蛋白免疫BALB/c小鼠，收取多克隆抗体，ELISA检测结果显示，rFgTPI能诱导较高的IgG抗体水平；用感染大片吸虫动物的血清检测重组蛋白的免疫原性，Western blot分析表明，重组蛋白rFgTPI具有良好的免疫原性；生物信息学预测显示，FgTPI主要以α螺旋和β折叠为主，β转角较少，有3个较长的无规则卷曲；通过α-磷酸甘油脱氢酶偶联法测定其活性，发现FgTPI酶促反应最佳pH值为7.5,最适温度为35℃。本试验结果为深入研究FgTPI的生物学功能、评价其作为抗大片吸虫病疫苗候选分子奠定了基础。

旨在研究春季对小尾寒羊、蒙古羊进行同期发情与人工授精处理时，不同外源激素使用对两品种羊繁殖指标和血液生殖激素浓度的影响。挑选春季小尾寒羊、蒙古羊母羊各120只，按不同外源激素处理方法随机均分为4组，其中对照组处理方法为阴道氟孕酮海绵栓(FGA)+撤栓后即注射孕马血清促性腺激素(PMSG),试验Ⅰ组为FGA+撤栓前24 h注射PMSG,试验Ⅱ组为FGA+撤栓前24 h注射PMSG+注射促黄体素释放激素A_3(LHRH-A_3),试验Ⅲ组为FGA+撤栓前24 h注射PMSG+注射LHRH-A_3+稀释精液中添加催产素(OXT)。结果：试验I组与对照组相比，蒙古羊放栓第14天孕激素(P_4)浓度显著升高(P<0.05),卵泡刺激素(FSH)浓度和发情反应率均极显著升高(P<0.01);试验Ⅱ组与试验Ⅰ组相比，小尾寒羊产羔率极显著提高(P<0.01),蒙古羊放栓第14天FSH、促性腺激素释放激素(GnRH)浓度和同期受胎率均极显著升高(P<0.01),同期妊娠率显著提高(P<0.05);试验Ⅲ组与试验Ⅱ组相比，小尾寒羊放栓第14天雌激素(E_2)浓度和同期妊娠率均显著升高(P<0.05),蒙古羊放栓第14天FSH浓度、同期受胎率和同期妊娠率均极显著下降(P<0.01)。综上可见，试验Ⅱ组(FGA+撤栓前24 h注射PMSG+LHRH-A_3)对于提高蒙古羊春季繁殖力效果较好，试验Ⅲ组(FGA+撤栓前24 h注射PMSG+LHRH-A_3+OXT)对于提高小尾寒羊繁殖力效果较好。