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  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 48.
    <正>《2024年版中国科技期刊引证报告(核心版)自然科学卷》以《中国科技论文与引文数据库》(CSTPCD)为基础,采用科学客观的研究方法与评价方式,遴选中国自然科学领域各学科分类重要期刊作为统计来源期刊。2024年版引证报告共收录了在中国(不含港澳台地区)正式出版的1 998种中文期刊和167种英文期刊,其中畜牧、兽医科学类期刊共收录21种,包括19本中文期刊和2本英文期刊,《畜牧与兽医》综合评价总分排名第九位。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 9-14.
    旨在探究澳洲白羊与杜湖羊三元杂交F1代(澳杜湖)公羔在育肥期的生长发育与饲料效率之间的关系。以杜泊羊与湖羊杂交一代为母本,澳洲白羊为父本进行杂交,选取99只澳杜湖公羔(80~180日龄)进行育肥期生长发育性状与饲料效率性状的测定。结果:澳杜湖公羔80~180日龄,体重呈递增态势;经统计分析发现,澳杜湖公羔不同日龄阶段体重与体尺指标整体呈显著正相关(P<0.05),澳杜湖公羔平均日增重为(0.30±0.03)kg,平均日采食量为(1.91±0.16)kg,剩余采食量为(0.00±0.14)kg,饲料转化率为5.41±0.67。研究表明,澳杜湖公羔在120~180日龄为增长高峰期,体重与体尺指标呈显著正相关且与胸围的相关系数最高,剩余采食量与饲料效率性状相关,与生长性状不相关,而饲料转化率与生长性状和饲料效率性状显著相关。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(03): 125-134.
    非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种在家猪和野猪之间传播的高度传染性和致死性的病毒性疾病,该病的病原体是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV),致死率高达100%。近年来,ASF疫情严重威胁着我国生猪产业的健康发展。与之前相比,我国的ASFV流行毒株逐渐由ASFVⅡ型强毒株转变为ASFVⅡ型和Ⅰ型的重组毒株。因此,迫切需要开发具有交叉保护效力的有效疫苗来预防ASFV的感染。ASFV的结构复杂,其基因组是一种大型双链DNA分子,大小在170~193 kb,包含150~167个开放阅读框,编码近200种蛋白。这些蛋白具有复杂的结构、功能以及免疫逃逸机制,使ASF疫苗研发困难重重。截止目前,尚未有针对ASF的有效疫苗或治疗药物问世,仍需要全面解析非洲猪瘟病毒蛋白的结构和功能,深入了解病毒感染机制以及病毒蛋白和宿主蛋白的相互作用。本文旨在综述当前关于ASFV相关蛋白的结构和功能的研究进展,以期为有效预防和控制ASF提供科学依据。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(04): 139-145.
    产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种在自然界及动物胃肠道内广泛存在的条件性致病菌,对畜禽养殖造成严重的经济损失。目前,接种疫苗是防控产气荚膜梭菌感染的主要手段,并有助于减少抗菌药物在畜禽养殖中的使用,减缓细菌耐药性的发展。本文综述了产气荚膜梭菌α、β、ε毒素蛋白作为疫苗抗原成分的应用,重点阐述在灭活疫苗、类毒素疫苗、基因工程活疫苗、纳米颗粒疫苗或佐剂和多表位疫苗5个方面的研究进展,以期为新型疫苗的研制提供参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 132-139.
    传统中药具有增强畜禽免疫功能的作用,提取具有免疫调节功能的中药组分添加于饲料,通过恢复并增强机体的免疫功能,来改善畜禽健康状况和对抗畜禽养殖中的疾病。近年来,新发病、病毒变异以及混合感染所带来的复杂多变的养殖环境,给畜禽养殖业带来了极大的威胁,虽然新型疫苗的使用可以对疾病的预防起到良好的效果,但在面临畜禽极度虚弱、患免疫抑制类疾病等情况时仍束手无策。多项研究表明中药免疫增强剂可以改善畜禽对肿瘤、细菌、病毒以及其他有害物质的免疫反应,起到扶正祛邪的作用。在全面“禁抗”的养殖环境下,中药免疫增强剂以其价格低廉、来源丰富、不易产生耐药性、毒副作用小等多种优势脱颖而出,成为热门的新型畜禽免疫增强剂。本文主要从中药免疫增强剂在畜禽中的使用效果及作用机制进行综述,期望为畜禽养殖以及中药免疫增强剂的开发和临床应用提供参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 140-146.
    家禽胚胎干细胞(ESCs)作为具有高度多能性的细胞,在家禽遗传育种和生物医学研究中展现出重要价值。本文综述了家禽ESCs的概念、特点、维持和分化机制,以及它们在疫苗生产、生物反应器、遗传育种和人类医学研究中的应用。随着分子生物学技术的不断进步,家禽ESCs的研究进一步揭示了胚胎干细胞的分化机制,也为未来的生物技术应用提供了新的方向。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 56-63.
    旨在探讨屎肠球菌Kimate-X对幼犬生长发育、血液学参数、免疫学指标、肠道菌群结构及代谢功能的潜在影响。选用16只2月龄比格犬随机分为对照组和益生菌组,每组8只,对照组饲喂基础饲料,益生菌组在基础饲料中添加屎肠球菌Kimate-X(2×10~9 CFU/d),试验共持续6周,测量体重、体高、体长,对血液学、免疫学指标及宏基因组测序指标进行系统性评估。结果:屎肠球菌Kimate-X显著促进了幼犬的体重增长(P<0.01)和体长发育(P<0.05),显著提高了血液中的红细胞数和血红蛋白浓度(P<0.05),以及高密度脂蛋白浓度(P<0.05);免疫学检测表明,屎肠球菌Kimate-X能提高免疫球蛋白G(IgG)水平(P<0.05),增强免疫功能;通过宏基因组测序分析揭示,屎肠球菌Kimate-X能够调节肠道菌群组成,显著提升有益菌联合乳杆菌(Ligilactobacillus saerimneri)的丰度,有效降低潜在致病菌如大肠杆菌(Escherichia coli)的相对丰度;功能注释分析进一步显示,屎肠球菌Kimate-X能够增强肠道菌群的DNA修复能力,促进能量代谢功能的提升。结论:屎肠球菌Kimate-X对幼犬的生长发育、免疫功能具有显著促进作用,并能有效调节肠道菌群及其代谢功能,展现出良好的应用前景。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 1-8.
    旨在探究骨桥蛋白(OPN)基因与贵州黑山羊卵巢颗粒细胞(OGCs)增殖和凋亡间的关系。以贵州黑山羊为研究对象,通过构建OPN基因的4个干扰载体,转染至OGCs,并采用实时荧光定量PCR技术检测不同干扰载体对OPN基因的抑制效率,筛选最佳干扰载体;采用细胞计数试剂盒-8(CCK8)检测细胞增殖活力,细胞划痕试验检测其迁移能力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测与其相关的繁殖标记基因和凋亡相关基因的表达情况。结果:成功构建了OPN基因的4个干扰载体,与shRNA-NC组相比,shRNA-OPN-222、shRNA-OPN-385和shRNA-OPN-741均极显著抑制了OPN基因的表达(P<0.01),且shRNA-OPN-222抑制效果最佳;CCK8和细胞划痕试验结果表明,与shRNA-NC组相比,shRNA-OPN-222极显著抑制了OGCs的增殖活力和迁移能力(P<0.01);RT-qPCR结果发现沉默OPN基因极显著抑制了核心蛋白聚糖2(DCN2)、细胞色素P450家族19亚家族A肽1(CYP19A1)和雌激素受体1(ESR1)的基因表达(P<0.01),显著促进了β-连环蛋白结合因子2(CTNNB2)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)和Bcl-2关联X蛋白(Bax)的基因表达(P<0.05),对铁蛋白重链1(FTH1)、胱天蛋白酶9(Caspase-9)的基因表达无显著影响。结论:干扰OPN基因,可以有效抑制OGCs的增殖和迁移,降低繁殖相关基因的表达水平,同时促进细胞的凋亡进程,这一研究为进一步阐明OPN基因影响山羊繁殖率的分子机制奠定了基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 31-34.
    旨在研究复合酸化剂对育肥猪生长性能的影响。选取(154±3)d、体重(90.50±1.12)kg的“杜×长×大”三元育肥猪112头,随机分为2组,每组7个重复,每个重复8头猪,公母各半,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加1 500 mg/kg复合酸化剂,试验共70 d,其中预饲期7 d。结果:与对照组相比,试验组平均日采食量(ADFI)无显著差异,料重比(F/G)显著降低(P<0.05),平均日增重(ADG)有升高趋势(P<0.1);试验组粗蛋白质、精氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和缬氨酸的消化率显著提高(P<0.05);试验组猪血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)活性显著降低(P<0.05),球蛋白(GLO)和总胆固醇(CHOL)含量有升高趋势(P<0.1)。结论:在基础日粮中添加1 500 mg/kg复合酸化剂,有助于提高育肥猪的生长性能,增强养分表观消化率并改善育肥猪的血清生化指标。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 144-150.
    猪精液质量检测是影响人工授精技术应用效果的重要环节,目前常用的猪精液保存方式有:常温液态保存(15~20℃)、低温液态保存(4~6℃)和超低温冷冻固态保存(-196℃),这3种方式会对精液质量产生不同程度的影响,尤其是后2种。由于猪精子膜上抗冻胆固醇的含量较其他动物低,所以猪精细胞对低温比较敏感,容易产生低温休克,因此低温对猪精子影响不同于其他物种。一般认为精子运动、形态与分娩率和产仔数直接相关,这也是种猪场常规的精子质量检测项目。本文对近几年国内外养殖场猪精子运动、形态检查项目和实验室猪精子代谢、抗氧化功能、DNA完整性、精子基因、蛋白生物标记等检测项目和参数研究进展以及之间的关联性进行综述,以期为猪精液质量检测评价研究和生产推广提供理论、方法及技术上的支持,更好地推动人工授精技术的发展。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(03): 58-65.
    通过对畜禽屠宰环境和畜禽肉中单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)的污染情况及其分离株生物学特性进行分析,以便为畜禽屠宰和销售环节中LM风险监测提供数据,为防控LM的污染奠定基础。随机采取屠宰场环境、畜禽胴体及污水样品,参照国标方法经增菌、分离,对可疑为LM的菌落进行PCR鉴定,对分离菌株进行血清分型、多位点序列分型(MLST)、生物被膜形成能力、生长曲线和消毒剂最小抑菌浓度(MIC)的分析。结果:1 239份样本检出58株单增李斯特菌,检出率为4.68%,胴体、屠宰环境、屠宰污水在各自样本中检出率分别为4.81%、4.80%、3.48%;58株LM有1/2a(8.62%)、1/2b(44.83%)、1/2c(46.55%)这3种血清型,19种序列型(ST);25株LM分离株生物被膜和生长能力强于参考株;甲醛溶液、苯扎溴铵、碘溶液和氢氧化钠4种消毒剂对7~10株LM分离株的MIC值高于参考株。综上,畜禽屠宰场及农贸市场中存在LM污染,且菌株具有一定的抗逆性。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 49-55.
    旨在观察猪正常和囊肿卵巢中血管生成素(ANG)的定位和表达情况,探讨ANG的表达与猪卵巢囊肿发生之间的关系。从屠宰场收集250~300日龄的大白猪母猪卵巢,根据形态将其分为正常组和卵巢囊肿组(n=8),通过HE染色对正常卵巢和囊肿卵巢进行形态学观察,利用Western blot检测卵巢中ANG蛋白的表达,采用免疫组织化学法检测卵巢中ANG的定位和表达情况。结果:外观上囊肿卵泡和囊肿黄体体积明显增大,卵泡膜细胞和黄体细胞均出现肿大、间隙不均和脂滴空泡增多的异常现象;Western blot结果表明囊肿卵巢中ANG的表达量极显著升高(P<0.01);免疫组化检测显示ANG在囊肿卵泡膜细胞和囊肿黄体细胞中的表达量明显上升,而在囊肿卵巢正常部位处有腔卵泡膜细胞中的表达量明显减少。结论:ANG与猪卵巢囊肿的发生之间存在关联,提示ANG可以作为一种诊断标志物,为临床上卵巢囊肿的确诊提供帮助。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(01): 50-56.
    为探究线粒体自噬受体Bcl-2/腺病毒E1B 19 kDa相互作用蛋白3样(BNIP3L)介导的线粒体自噬对镉致大鼠大脑皮质神经元凋亡的调控作用,利用RNA干扰技术建立大鼠大脑皮质神经元BNIP3L基因沉默模型,并经10μmol/L镉处理12 h, Western blot检测BNIP3L、帕金森氏蛋白2(Parkin)和线粒体凋亡通路相关蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平,免疫荧光染色检测BNIP3L与线粒体标志蛋白TOMM20共定位,透射电镜检测细胞内线粒体自噬体数目,FITC Annexin V染色检测细胞凋亡水平。结果:大鼠大脑皮质神经元经镉处理12 h后,BNIP3L蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),BNIP3L与TOMM20共定位增加,沉默BNIP3L极显著抑制镉致Parkin线粒体转位(P<0.01),抑制镉致细胞内线粒体自噬体形成,极显著促进镉致caspase-9、caspase-3激活和神经元凋亡(P<0.01)。结果表明,BNIP3L介导的线粒体自噬可抑制镉致大鼠大脑皮质神经元凋亡。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 24-30.
    为探明海门山羊不同组织中肌肉生长抑制素(MSTN)基因表达规律及其编码蛋白结构特点,通过克隆海门山羊MSTN基因CDS序列并分析其生物特点,运用实时荧光定量PCR技术分析MSTN基因在不同组织中的表达水平,在MSTN基因第2、3外显子上设计3个单碱基编辑靶位点,将构建的sgRNA质粒分别与胞嘧啶碱基编辑器YE1-BE3-FNLS电转入培养的海门山羊胎儿成纤维细胞中,筛选48 h后提取细胞基因组DNA,对PCR扩增靶位点序列进行Sanger测序和TA克隆分析。结果:海门山羊MSTN基因的CDS序列编码375个氨基酸,具有高度保守性。海门山羊不同组织中MSTN基因表达水平存在差异,其中骨骼肌的表达量最高;3条sgRNA均可在MSTN基因外显子上进行单碱基编辑,编辑效率分别为25%、37%和29%。结论:研究结果为进一步利用单碱基基因编辑技术培育MSTN基因突变海门山羊新品系提供了新的依据。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 55-64.
    乳腺癌是雌性犬中发病率最高的癌症,有极高的转移率、复发率,治疗手段有限且难以完全治愈,本研究旨在探究泊沙康唑对干扰素基因刺激器(STING)激动剂cGAMP抗4T1乳腺肿瘤效应的增效作用。将BALB/c小鼠皮下注射4T1细胞建立乳腺癌移植瘤模型,然后分为Control组、cGAMP单独治疗组、泊沙康唑单独治疗组以及泊沙康唑+cGAMP联用组,观察并记录治疗过程中4T1乳腺肿瘤的体积、小鼠的体重以及生存率;通过流式细胞术评估各组小鼠脾脏和肿瘤引流淋巴结中CD69+T细胞的比例;通过高通量转录组测序探究肿瘤内免疫相关基因表达谱的变化。结果:与cGAMP单独治疗组相比,泊沙康唑+cGAMP联用组中小鼠肿瘤体积显著下降,生存率显著提高,且小鼠脾脏和肿瘤附近引流淋巴结中CD69+T细胞比例显著升高;在转录组测序中,与cGAMP单独治疗组相比,泊沙康唑+cGAMP组中cGAS-STING通路相关基因、细胞毒性相关基因及T细胞特征基因的富集程度更高。以上结果表明,泊沙康唑增强了cGAMP的体内抗肿瘤效应,改变了肿瘤免疫相关基因表达谱,并促进了cGAS-STING通路及其下游通路相关细胞因子反应的激活,可作为有效的STING通路激活增效剂,增强机体抗肿瘤免疫反应。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(01): 1-6.
    旨在筛选牛DNA聚合酶β(DNA polymerase β, POLB)基因核心启动子并对调控该基因表达的转录因子进行预测和鉴定。以牛POLB基因CDS区上游1 751 bp序列为模板,构建5个包含不同截短长度的启动子报告基因载体,利用双荧光素酶报告基因系统鉴定核心启动子,利用AnimalTFDB 3.0预测核心启动子结合转录因子,过表达转录因子后分析其对牛POLB基因的转录调控功能。结果:在牛肌肉原代细胞中,构建的5个截短的启动子报告基因载体均具有转录起始活性,pGL3-151(-151~-1 bp)和pGL3-1351(-1 351~-1 bp)的相对荧光素酶活性显著高于pGL3-551(-551~-1 bp)(P<0.001,P<0.000 1),表明-151~-1 bp和-1 351~-551 bp为牛POLB基因核心启动子区;AnimalTFDB 3.0预测核心启动子区存在转录因子特异性蛋白1(specificity protein 1, SP1)的结合位点;在牛肌肉原代细胞中过表达转录因子SP1,能够显著降低POLB基因的转录活性。本试验结果为进一步研究该基因表达调控机制提供参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(01): 105-110.
    盖塔病毒(Getah virus, GETV)是一种人畜共患的虫媒传播病毒,主要感染养殖动物,遗传多样性高,具有流行风险。本研究基于高通量测序技术,在来自福建省的死亡野生赤腹松鼠中首次发现了GETV,结合一代测序技术进一步鉴定到赤腹松鼠肺组织感染GETV,并成功获得该病毒的全基因组序列,命名为GETV/RS/China/2022毒株。基于GETV全基因组的系统发育分析结果表明,源自野生啮齿目动物的GETV/RS/China/2022毒株属于罕见GETV谱系Ⅱ型衍生株,这提示了GETV宿主谱的扩展以及野生动物对甲病毒进化和传播的重要性。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 147-152.
    <正>(接上期)六、《畜牧与兽医》在国内主要学术评价体系中的成绩(一)《畜牧与兽医》是中国科技核心期刊中国科学技术信息研究所经过严格的定量和定性分析,遴选中国自然科学领域各学科分类重要期刊为“中国科技核心期刊”(中国科技论文统计源期刊)。2005年起《畜牧与兽医》被收录并入选中国科技核心期刊。根据《中国科技期刊引证报告(核心版)》统计报告,畜牧、兽医科学类近几年入选的期刊从最初14种增加至今年的21种。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 88-92.
    旨在探究中原地区牛肠道病毒(BEV)的生物学特性及其5′-UTR序列遗传特征。采用RT-PCR方法对2023—2024年从四川、河南和河北地区收集的77份腹泻牛粪便样品进行BEV检测,对阳性样本的BEV 5′-UTR序列进行克隆及遗传变异分析,通过接种Madin-Darby牛肾细胞(MDBK)进行病毒分离与鉴定。结果:77份牛粪便样品中有20份(25.97%)检测为BEV阳性,获得20株BEV 5′-UTR核苷酸序列;20株BEV与13株BEV参考毒株5′-UTR序列同源性为77.2%~94.1%;遗传变异分析显示,获得的20株BEV序列中17株属于BEV-F种,余下3株属于BEV-E种;分离到2株BEV,命名为HB002、HN004-8,均为BEV-F种,病毒滴度均在48 h时达到高峰,分别为105.49 TCID50/μL和105.67 TCID50/μL;电子显微镜观察病毒粒子呈球形,直径20~30 nm。本研究为BEV感染的防控提供了参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 15-23.
    为研究鸡性别决定区域Y盒蛋白转录因子6(SOX6)基因时序表达和在成肌细胞分化中的作用,采用荧光定量PCR方法检测鸡不同组织以及胚胎期(E11~E19)和出壳早期(D0、D3、D6)骨骼肌中SOX6 mRNA的表达;通过RT-PCR扩增并克隆鸡SOX6基因的编码序列区(CDS),经测序分析并利用生物信息学工具预测鸡SOX6蛋白的理化性质和结构功能;构建鸡SOX6基因的真核表达载体并转染至鸡原代成肌细胞,Western blot技术检测重组蛋白的表达;利用荧光定量PCR检测过表达和敲低SOX6基因对成肌分化相关基因表达的影响。结果显示:SOX6 mRNA在鸡12种不同组织中均有表达,其中在胸肌、腿肌较高,而在肌胃和脾脏较低;SOX6 mRNA在胚胎期E11~E19表达量逐渐增加,D6期显著高于其他时期(P<0.05);获得鸡SOX6基因编码区全长2 367 bp,共编码789个氨基酸;生物信息学分析鸡SOX6蛋白为中性、亲水性蛋白,分子量为87.533 kDa,等电点为6.99,不稳定系数为60.95,脂肪系数为62.51;构建SOX6过表达载体并转染至鸡原代成肌细胞中,成功表达出SOX6-MYC融合蛋白;在成肌细胞中过表达SOX6后,肌肉分化标志基因生肌分化因子(MyoD)和肌细胞生成素(MyoG) mRNA表达显著上升(P<0.05),而敲降SOX6后MyoD和MyoG mRNA表达显著下降(P<0.05)。结果表明:SOX6基因对成肌细胞分化发育具有调控作用,为进一步分析SOX6基因功能奠定基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 1-5.
    目前食品安全问题越来越受到重视,市面上常见的肉源检测方法存在自身的局限性,本研究探索基于线粒体基因ATP酶8亚基(ATP8)和NADH脱氢酶亚基1(ND1)基因检测不同肉源种属,旨在为肉类掺假鉴别新技术的开发提供技术支撑。以猪、牛、羊、鸡、鸭、兔、大鼠和小鼠共8种肉源的DNA作为检测靶标,根据ATP8和ND1基因中种间特异性强的序列来设计引物,采用PCR技术对目标DNA片段进行扩增,利用琼脂糖凝胶电泳对PCR扩增产物进行检测。结果:成功构建了引物组合分别为小鼠+鸡+羊,猪+牛+兔,鸭+大鼠的复合检测体系,能准确鉴别以上8种肉源种属;随机在市场采集里脊肉、开花肠、飘香牛肉、肉肠和肥牛卷共5种样本进行测试,其中里脊肉、开花肠、肉肠与配料表成分一致,飘香牛肉、肥牛卷与配料表成分不一致,证实该方法可应用于市场肉制品检测;该方法有效识别浓度达1 ng/μL。综上,本研究建立了8种肉源的低成本、高效的复合PCR检测体系,可以为食品安全中的肉类掺假鉴别提供帮助。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 115-124.
    为探明新疆白斑狗鱼(Esox lucius)发生细菌性败血症的原因,本研究调查了新疆呼图壁、乌鲁木齐米东区5个养殖鱼塘白斑狗鱼发病情况。通过对病鱼的临床症状与病理变化观察、高通量测序分析,以及病原的分离鉴定、毒力基因检测和回归感染试验,明确病原的种类及致病特点;采用Kirby-Bauer纸片扩散法分析病原菌对16种抗生素的敏感性,检测养殖场常用的氟苯尼考、恩诺沙星和多西环素最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果:在患病白斑狗鱼的脏器中分离出4个优势菌株,分别是3株维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和1株温和气单胞菌(Aeromonas sobria),携带黏附素(ahal)、细胞毒性肠毒素(act)、丝氨酸蛋白酶(ahp)3种毒力基因。人工回归感染后,2种病原菌混合感染对鱼的致病性损伤更严重,半数致死量(LD50)为1.5×10~5 CFU/mL。维氏气单胞菌对麦迪霉素、头孢噻吩以及喹诺酮类、氯霉素类、四环素类等12种抗生素敏感,对复方新诺明、万古霉素、青霉素和新霉素4种抗生素耐药;温和气单胞菌对万古霉素以及喹诺酮类、氯霉素类、四环素类等13种抗生素敏感,对头孢噻吩、青霉素和新霉素3种耐药。恩诺沙星、多西环素和氟苯尼考对维氏气单胞菌菌株抑菌效果最好,多西环素对温和气单胞菌菌株抑菌效果最好。综上,本研究首次报道了维氏气单胞菌和温和气单胞菌在新疆地区白斑狗鱼中的致病性及对不同抗生素的敏感性,为新疆地区白斑狗鱼细菌性败血症的诊断与防控提供了重要参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 43-48.
    旨在探究来源于枯草芽胞杆菌细胞壁的肽聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)β-防御素-1(SBD-1)表达的信号通路情况。使用20μg/mL肽聚糖刺激ORECs 2 h,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法,检测SBD-1表达的信号通路因子mRNA和蛋白的表达量;使用特异性抑制剂抑制各信号通路因子,再使用20μg/mL肽聚糖刺激ORECs 2 h,通过RT-qPCR和ELISA方法检测SBD-1 mRNA和蛋白的表达量,确定介导SBD-1表达的主要信号通路。结果:20μg/mL肽聚糖显著提升了Toll样受体2(TLR-2)、髓样分化因子88(MyD88)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核因子κB(NF-κB)mRNA和蛋白的表达量(P<0.001,P<0.05),对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK,P38)的mRNA表达量没有显著影响;使用信号通路抑制剂抑制了ERK1/2、JNK和NF-κB信号通路,极显著降低肽聚糖诱导ORECs中SBD-1的mRNA和蛋白表达量(P<0.001,P<0.01)。结论:枯草芽胞杆菌肽聚糖诱导SBD-1表达由TLR-2-MyD88-NF-κB和TLR-2-MyD88-MAPK(JNK、ERK1/2)共同介导。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 107-113.
    为了探究规模化猪场伪狂犬病净化的可行性,选择某大型父母代养猪场,通过“检测-隔离/淘汰-免疫”手段净化猪伪狂犬病。采集所有公猪、经产母猪、后备母猪,以及部分仔猪和保育猪的血清样品,根据抗体检测结果,对PRV-gE抗体阴性猪进行隔离饲养,淘汰PRV-gE抗体阳性猪及其同栏猪只;针对不同猪群调整免疫方案,增加产前母猪、初生仔猪和保育猪的免疫次数,解决免疫空窗期问题。加强后备猪监测,严格实行“全进全出”,及时隔离病猪,加大淘汰力度,加强人员、物品和环境消毒;严格执行上述净化措施,每6个月进行PRV抗体检测。结果显示:随着净化工作的开展,gB抗体阳性率逐渐升高,gE抗体阳性率逐渐降低;持续采取净化措施2年后,经产母猪和后备母猪群体的gB抗体阳性率均达到97%以上,且各阶段猪只gE抗体均为阴性,表明该猪场已达到伪狂犬病净化标准;经统计分析,伪狂犬病净化后,该场每头母猪每年断奶仔猪数(PSY)平均增加4.96头,每头母猪每年收益平均增加1 636元。结论:通过科学的净化技术方案和严格的生物安全措施,可以实现规模化猪场的伪狂犬病净化,提高猪场经济效益。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 39-47.
    近期研究发现,14.5%的猫过敏患者血清中存在针对新型猫过敏原蛋白——尼曼匹克C2型蛋白(Niemann-Pick type C2,NPC2)的高特异性免疫球蛋白E(IgE)。为了深入解析该蛋白的致敏机制,并开发高效、精准的多表位疫苗,本研究针对猫的新型过敏原NPC2进行了疏水性分析、磷酸化位点预测、糖基化位点预测以及信号肽预测分析;通过NCBI数据库的蛋白质序列比对后建立猫过敏原蛋白NPC2的系统进化发育树;使用SOPMA软件对NPC2蛋白进行二级结构的预测分析,利用Swiss-Model进行了3D结构的同源建模,并与犬过敏原蛋白Can f7的抗原表位进行了比较。结果:猫过敏原蛋白NPC2与美洲狮NPC2蛋白的序列同源率最高,达到99.33%;猫过敏原蛋白NPC2的B细胞线性抗原表位序列为85FPIPEADGCKSG9622VIFKDCG28100PIQQGKTYSY10965VSSQG69132GDKEQ136115VKNEYPS121,T细胞表位为26DCGSGFGVI34129QLLGDKEQN1376VAFVLLALSASGLAE2071KALVYGILMGVAVPF85116KNEYPSIKVMVKWQL130;猫过敏原蛋白NPC2的构象性表位主要位于无规卷曲区域;此外,猫过敏原蛋白NPC2与犬过敏原蛋白Can f7的抗原表位序列具有一定的相似性,可能具有免疫交叉反应性和交叉保护性。综上,本研究通过生物信息分析获得了猫过敏原蛋白NPC2的B细胞、T细胞优势抗原表位,其结果可为宠物过敏原蛋白的多表位疫苗研究提供理论基础,并为对猫过敏的免疫治疗提供新的干预靶点和策略。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 80-88.
    猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染可引起仔猪急性腹泻和脱水,死亡率高。为了明确山东地区PEDV的流行趋势与遗传进化情况,本研究于2022—2023年对山东省的13个地级市进行了流行病学调查。通过对PEDV N基因的RT-PCR检测,结果在228份疑似腹泻样本中,PEDV阳性率达48.68%;同时,在PEDV感染的样本中,发现PEDV与猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)共感染的现象。对PEDV阳性样本进行S1基因的扩增测序,通过MEGA6软件对PEDV阳性样本进行S1基因的遗传进化分析,发现扩增的4株流行毒株属于GⅡc型,1株流行毒株属于GⅡa型。进一步对流行毒株进行分离,通过PEDV N基因的检测和间接免疫荧光染色,证实成功分离到1株PEDV(命名为SDQD20230628)。对分离株进行S基因的遗传进化分析,发现分离株S基因与GⅡc亚型毒株同源性较近。本研究发现PEDV仍是引起山东地区猪场腹泻猪主要病毒,且呈现出GⅡc亚型毒株趋于流行的趋势,研究结果丰富了山东地区PEDV分子流行病学数据,也为PEDV感染的防控提供了理论依据。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 139-143.
    旨在评价一种犬用复合益生菌膏剂的稳定性、安全性和适口性。将复合益生菌膏剂于4℃和常温干燥处保存,并于第0、7、14、21、28、35、42、49和56天分别取样,测定该复合益生菌膏剂的活菌数、pH值以及外观、色泽、质地等指标,评价该犬用复合益生菌膏剂的稳定性;通过给兔连续饲喂复合益生菌膏剂,测定兔的体况以及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)等生化指标,评估复合益生菌膏剂的安全性;通过双盆试验来测定犬对食物的可接受性或偏好,评价该犬用复合益生菌膏剂的适口性。结果:在4℃保存的复合益生菌膏剂在56 d时仍有较高的活菌数(1.0×10~8 CFU/g),感官评定指标良好,pH值变化较小,表明该复合益生菌膏剂具有较强的稳定性;口服复合益生菌膏剂后健康兔体况正常、肝肾功能指标正常,表明该复合益生菌膏剂具有较高的安全性;添加了复合益生菌膏剂的犬粮,其适口性和耐口性显著高于未添加复合益生菌膏剂的犬粮。综上,该复合益生菌膏剂具有较强的稳定性,较高的安全性,且适口性良好。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(03): 103-110.
    旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株,荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化,同时选取LSDV保守基因ORF077建立检测LSDV ORF077的标准曲线,检测LSDV ORF140缺失株与野毒株在不同时间点的拷贝数变化,然后通过蛋白质谱技术和免疫共沉淀技术分析140蛋白与宿主细胞内存在相互作用的蛋白,最后敲低此蛋白的基因转录水平检测宿主细胞内细胞因子转录水平的变化。结果:LSDV ORF140缺失株会引起宿主细胞β-catenin基因转录水平显著下调(P<0.000 1)且缺失株拷贝数始终比野毒株高,推测LSDV ORF140基因的存在能激活宿主细胞的Wnt/β-catenin(Wnt/β-连环蛋白信号通路)信号通路,并且该通路的激活会影响LSDV的复制,宿主细胞中的连接斑珠蛋白(JUP)与LSDV 140蛋白存在相互作用,敲低宿主细胞JUP基因转录水平,发现β-catenin基因转录水平下调(P<0.05),感染LSDV后,β-catenin基因转录水平仍处于下调状态,并且检测到此时病毒拷贝数比野毒株高(P<0.05),以此推测LSDV ORF140是通过与JUP结合激活Wnt/β-catenin信号通路,从而影响LSDV的复制。综上,本研究证实LSDV 140蛋白能够与宿主细胞中的JUP蛋白结合,激活Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制LSDV的复制,为揭示LSDV与宿主之间的相互作用及LSDV的致病机制提供参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(02): 14-21.
    旨在以杜洛克公猪精液为研究对象,通过N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)抑制剂体外处理精液,经12.5%SDS-PAGE对处理好的精子样品进行双向电泳分离,筛选NAGase作用互作点蛋白表达差异;表达丰度差异的蛋白经酶消化后进行质谱分析。结果:银染筛选获得57个差异表达蛋白点在凝胶中,蛋白点主要分布在pH值3~10和相对分子质量14.4~116 kDa的范围内;经NCBI和Mascot数据库进行差异表达蛋白匹配搜索,成功鉴定与精子功能相关的上调差异表达蛋白8个,分别是磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(PEBP4)、精卵融合蛋白4(IZUMO4)、精浆糖蛋白1(PSP-1)、猪精子黏附蛋白(AWN)、糖结合蛋白(SPMI)、细胞色素c氧化酶Ⅵα亚基多肽1(COX6A1)、二氢硫辛酸脱氢酶蛋白(DLD)和伴侣蛋白1(TCP1);8个上调差异表达蛋白主要涉及精子成熟、精子运动、精卵识别等生理功能。通过STRING工具分析蛋白质互作关系表明IZUMO蛋白可能是NAGase调节精子功能的一个重要靶点并形成了可能的蛋白质调控网络。研究结果为提高公猪生产性能研究奠定了基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(04): 113-120.
    为调查造成阿勒泰部分地区双峰驼乳房炎的3种主要致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌)及其毒力基因、耐药情况,本研究通过临床检查及加州乳房炎检测(CMT)法调查阿勒泰地区双峰驼乳房炎的流行情况,采集388份乳样进行致病菌的分离鉴定,通过PCR及药敏检测其毒力及耐药情况。调查结果显示,双峰驼乳房炎总感染率为15.98%,其中散养驼临床型和隐型乳房炎平均感染率分别为4.40%、21.30%,集约化养殖场分别为20.00%、17.19%。从25份病乳中共分离鉴定出154株菌,其中粪肠球菌33株,占21.43%;大肠杆菌11株,占7.14%;金黄色葡萄球菌4株,占2.60%。毒力基因检测结果显示,随机选择的4株大肠杆菌分离株中检测出irp2(75%)、fyuA(75%) 2种毒力因子;4株金黄色葡萄球菌分离株中检出clfa(100%)、sea(75%)、fnbB(75%)、hla(50%)、hlb(50%) 5种毒力因子;随机选择的12株粪肠球菌中检出gelE(83.30%)、ace(83.30%)、efaA(75%)、agg(50%)、esp(25%)5种毒力因子。药敏结果显示,大肠杆菌分离株对阿米卡星耐药率高达100%,对哌啦西啉与氨苄西林耐药率为75%,对头孢唑啉、头孢噻吩、头孢呋辛、头孢哌酮、氧氟沙星、卡那霉素的耐药率为50%,对链霉素、妥布霉素和庆大霉素的耐药率为25%。金黄色葡萄球菌分离株对青霉素G耐药率100%,对克林霉素耐药率为50%,对苯唑西林、红霉素、万古霉素、氯霉素、四环素、诺氟沙星、环丙沙星和左氟沙星的耐药率为25%,对米诺环素和呋喃妥因全部敏感。粪肠球菌分离株对青霉素和呋喃妥因较为敏感,而对万古霉素、四环素、诺氟沙星、环丙沙星敏感的菌株占比均低于41.70%,对氯霉素与四环素的耐药菌株占33.30%,诺氟沙星和左氟沙星的耐药菌株均占25%,耐万古霉素和环丙沙星的菌株均占16.70%。本研究结果可为双峰驼养殖企业提供帮助,助力双峰驼养殖业发展。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(04): 19.
    <正>《2024年版中国科技期刊引证报告(核心版)自然科学卷》以《中国科技论文与引文数据库》(CSTPCD)为基础,采用科学客观的研究方法与评价方式,遴选中国自然科学领域各学科分类重要期刊作为统计来源期刊。2024年版引证报告共收录了在中国(不含港澳台地区)正式出版的1 998种中文期刊和167种英文期刊,其中畜牧、兽医科学类期刊共收录21种,包括19本中文期刊和2本英文期刊,《畜牧与兽医》综合评价总分排名第九位。21种期刊主要指标详见附表。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 64-74.
    旨在探究圆锥节丛孢菌几丁质酶的生物学功能。在圆锥节丛孢菌新疆株AC-XJ全基因组测序基础上,选取几丁质酶基因AC-chi6195为研究对象,对其进行克隆与分子特征分析并原核表达获得重组蛋白,采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定该重组蛋白的酶活性,分析该重组蛋白在不同pH值、温度、底物、金属离子及化学试剂条件下的酶学特性,将其作用于秀丽隐杆线虫及马圆形线虫三期幼虫并分析其生物学功能。结果:AC-chi6195基因全长1 453 bp,有2个内含子序列,共编码398个氨基酸,AC-chi6195属于糖基水解酶18家族且三级结构为典型的几丁质酶三磷酸异构酶桶形结构;遗传进化分析显示其与少孢节丛孢菌XJ-A1株几丁质酶AO-379亲缘关系相对最近;SDS-PAGE分析显示,重组蛋白AC-chi6195分子质量约为42 kDa;采用Ni柱层析法结合Western blot检测显示,获得了纯化的目的蛋白;DNS还原糖法检测显示,该重组几丁质酶活性为102 U/mg;酶学特性分析显示,该酶的最适反应条件为pH=7,40℃,1,4-二硫代苏糖醇(DTT)、SDS、Cu2+对其有抑制作用,该酶可降解胶体几丁质和少量壳聚糖;用重组几丁质酶AC-chi6195分别处理秀丽隐杆线虫和马圆形线虫三期幼虫12、24、36 h后,秀丽隐杆线虫死亡率分别为65%、93%、100%,马圆形线虫三期幼虫死亡率分别为75%、97%、100%。本研究结果为捕食性真菌高效杀线虫酶制剂的研发提供了依据。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 75-83.
    旨在调查华中地区(湖北、河南、湖南)规模化猪场猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的流行感染情况。2019—2022年,采集湖北、河南、湖南等省份的45个规模化猪场中具有呼吸道症状猪的口鼻拭子及肺脏、气管、淋巴结组织等临床病料1 895份,对其进行呼吸道病原菌的检测、分离培养、染色镜检、血清型分型鉴定和药敏试验。结果:呼吸道病原菌阳性样品总检出率为39.68%(752/1 895),其中猪链球菌(Streptococcus suis,SS)为20.11%(391/1 895),多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)为7.39%(140/1 895),副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)为6.65%(126/1 895),胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)为14.35%(272/1 895);在保育阶段,SS和GPS的阳性样品检出率较高,在生长育肥阶段,APP和SS的检出率较高;混合感染结果显示,单一感染占比达75.66%(569/752),以SS感染为主,双重感染占比达23.80%(179/752),以SS+GPS和SS+APP为主,三重感染类型占比为0.53%(4/752),只有SS+GPS+APP一种类型;从病料中分离鉴定到218株呼吸道病原菌,其中包括157株SS、15株Pm、20株GPS和26株APP;血清分型鉴定结果显示,SS流行血清型为2型,Pm流行血清型为A和D型,GPS流行血清型为5和4型,APP流行血清型为1型;药敏结果显示,大多数呼吸道分离菌株对于头孢噻呋和氟苯尼考表现敏感,而对于链霉素和庆大霉素则表现耐药。结论:研究结果为华中地区猪呼吸道疾病综合征细菌性病原感染的防控提供了参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 122-131.
    为探究中药复方片剂制备方法及对猫腹泻的治疗效果,采用单因素试验挑选片剂所需辅料并确定处方,所制成片通过《2020版兽药典》片剂检测标准,同时加入适口性检测;临床筛选出具有腹泻疾病的宠物猫21只,随机分为低剂量、高剂量和腹泻组,每组7只,另设7只健康猫为健康组,其中腹泻组和健康组猫不予治疗,低剂量组和高剂量组分别给药2片/d和3片/d,使用上述制备的中药复方片剂进行7 d治疗,在第7天收集健康组、腹泻组和高剂量组猫的新鲜粪便用于16S rRNA测序,统计分析猫腹泻的治愈率、治愈后的腹泻分数以及肠道菌群的改变情况。结果显示:中药复方片剂制备所需辅料为微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、30%乙醇、硬脂酸镁,矫味剂采用牛肉香精,制备成品为0.45 g/片,其原料药含药量达到63.5%,按《2020版兽药典》要求检测中药复方片剂的重量差异、脆碎度、崩解时间均满足要求;对筛选的21只腹泻猫进行为期7 d的临床治疗,发现腹泻组猫未恢复到健康标准,低剂量组猫在第6天全部恢复,治愈率为85.7%,高剂量组的猫在第4天全部恢复,治愈率为100%;同时使用中药复方片剂组在门水平上拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteriota)和放线菌门(Actinobacteriota)增多,厚壁菌门(Firmicutes)减少,在属水平上经黏液真杆菌(Blautia)升高。结论:中药复方片剂能有效防治猫腹泻,调节猫的肠道菌群,增加菌群的丰富度和菌群量,为开发治疗猫腹泻的新药物提供临床依据。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 131-138.
    为了解福建地区致猪腹泻病病毒的流行现状和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的变异情况,2023—2024年从福州市某疑似感染腹泻病毒的规模化猪场采集发病仔猪样品,经RT-PCR进行PEDV、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)核酸检测,并对PEDV阳性病料进行纤突蛋白(S)基因序列扩增和测序,进行遗传演化分析。结果:PEDV、TGEV和PoRV检出率分别为32.29%(31/96)、30.21%(29/96)和4.17%(4/96),其中PEDV和TGEV混合感染17份(17.71%),TGEV和PoRV混合感染1份(1.04%),PEDV、TGEV和PoRV三重混合感染1份(1.04%)。从10份PEDV阳性猪肠道组织样品中获得10株PEDV的S基因序列,全长3 753~4 179 bp,编码1 250~1 392 aa, 10株PEDV的S基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为94.9%~99.8%和83.8%~99.7%。S基因系统发育进化树结果表明,6株属于GⅠb亚型,4株属于GⅡb亚型,且4株PEDV的S基因为独立的一小分支。与经典毒株CV777的S基因序列相比,10株PEDV的S基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为93.6%~96.9%和83.9%~95.9%,存在23个保守氨基酸位点突变,在162 aa处缺失1个氨基酸(R),GⅠb亚型的6株PEDV S蛋白存在10个保守氨基酸位点突变;GⅡb亚型的4株PEDV S蛋白存在45个保守氨基酸位点突变,在59~62 aa处有4个氨基酸(QGVN)插入,163 aa处缺失1个氨基酸(D)。综上,福建某规模化猪场PEDV流行率较高,流行毒株基因型呈现多样性,说明流行株持续变异,临床上应予以高度重视。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(02): 32-37.
    旨在研究不同光色对雏鹅生长性能、血液生理及行为的影响。选取200只初生雏鹅作为研究对象,在自然光(对照)和4种不同LED光照(白光、红光、蓝光、绿光)条件下,采用16L:8D饲养模式饲喂30 d,期间对雏鹅的行为活动进行录像观察,并采集血清样本。结果:在单色光处理下,绿光雏鹅平均日增重、平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05),蓝光组雏鹅平均日增重、平均日采食量显著低于对照组(P<0.05);蓝光、绿光组雏鹅血清免疫球蛋白(Ig)A、IgM含量显著低于对照组(P<0.05),各组IgG含量无显著差异(P>0.05);蓝光、绿光组雏鹅血清中肌酸激酶(CK)含量显著低于对照组(P<0.05),且绿光组显著高于蓝光组(P<0.05);蓝光组雏鹅血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量显著低于其他组(P<0.05);绿光、红光组雏鹅血清褪黑素(MT)含量显著低于其他组(P<0.05);不同光色对雏鹅修饰行为、啄物行为无显著影响,白光、红光可显著增加雏鹅采食和站立行为时长(P<0.05),白光、红光、蓝光、绿光可显著减少雏鹅趴卧行为时长(P<0.05)。综上,不同光色能够促进雏鹅采食行为,增加血液免疫能力,提高雏鹅生长性能,本试验条件下建议雏鹅育雏期使用LED绿光。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(03): 38-46.
    旨在探究宠物源大肠杆菌对抗菌药物的耐药情况及携带的质粒介导喹诺酮(PMQR)和超光谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因的检测。采集营口市307份宠物犬、猫肛拭子样品,分离获得282株大肠杆菌,通过K-B药敏纸片法对分离菌株进行药敏试验;在头孢他啶和头孢噻肟药敏纸片中加入克拉维酸来确定分离菌株是否为ESBLs表型耐药菌株;应用PCR测定大肠杆菌菌株携带的ESBLs和PMQR耐药基因型。结果:宠物犬源、猫源大肠杆菌对β-内酰胺类药物耐药率分别为21.15%~60.00%和22.22%~37.50%;对喹诺酮类药物耐药率分别为25.85%~52.73%和43.75%~57.50%;对氨基糖苷类药物的耐药率分别为7.69%~69.09%和16.67%~57.50%;对四环素类药物的耐药率分别为5.77%~39.13%和18.75%~37.50%;对多肽类药物的耐药率分别为6.52%~20.91%和12.50%~27.78%;对磺胺类药物的耐药率分别为17.31%~29.09%和22.22%~33.78%;经测定,148株大肠杆菌检测为多重耐药菌株,三重耐药菌株检出率最多,共有56株大肠杆菌为产ESBLs表型;在产ESBLs表型大肠杆菌中,blaCTX-M耐药基因检出率最高为28.57%(16/56),其次为blaTEM耐药基因,检出率为17.86%(10/56);共有74株大肠杆菌携带PMQR耐药基因,其中qnrS耐药基因检出率最高为44.59%(33/74),其次为aac(6′)-Ib-cr,检出率为18.92%(14/74)。综上,营口地区宠物犬源、猫源大肠杆菌耐药较为严重,携带多种耐药基因,菌株携带的ESBLs耐药基因以blaCTX-M为主;携带的PMQR耐药基因以qnrS为主。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(01): 74-78.
    旨在建立犬冠状病毒(CCoV)和犬细小病毒(CPV)双重TaqMan荧光定量PCR检测方法。针对CCoV的3′UTR与CPV的VP2设计引物与探针,通过对反应体系与条件进行优化,建立了CCoV与CPV的双重荧光定量PCR检测方法,并对该方法进行敏感性、特异性、重复性验证与临床样品检验。结果:CCoV与CPV阳性参考质粒浓度在10~2~10~7 copies/μL,CCoV与CPV的标准曲线R2分别为0.999与0.996,线性关系良好,CCoV与CPV的最低检测限均为5 copies/μL,与其他病原无交叉反应,组内与组间的变异系数均小于1.38%,说明该方法灵敏度高、特异性强、重复性良好;对113份临床样本进行检测,与普通PCR比较,该方法对CCoV和CPV的检出率较高,分别为37.2%和40.7%。研究表明,本试验建立的CCoV和CPV双重荧光定量PCR方法检测效果良好,为相关疾病的临床诊断、流行病调查等提供了有力工具。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(01): 138-146.
    泛素化是所有真核生物中蛋白质翻译后修饰(protein post-translational modifications, PTMs)之一,可调节数千种蛋白,其中,泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system, UPS)可诱导蛋白酶体降解靶蛋白,随后激活多种信号通路,在多种细胞生命周期中发挥调节作用,并在细胞生命过程中的许多方面发挥至关重要的作用。三结构域蛋白(tripartite motif-containing proteins, TRIMs)是一类可以在胞内信号转导、细胞发育及凋亡、蛋白质质量控制、固有免疫反应、自噬、癌症中发挥重要调节作用的E3泛素连接酶。本文着重阐述了TRIMs在抗流感病毒感染中发挥的作用,包括对流感病毒蛋白的直接作用,对模式识别受体(pathogen recognition receptor, PRR)介导的固有免疫反应的调节以及对病毒自噬的诱导,为流感的防治提供更多新的思路,并为进一步深入研究TRIM家族成员介导的抗流感病毒感染机制奠定理论基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(05): 99-106.
    为制备伪狂犬病病毒(PRV)VHS蛋白单克隆抗体,通过原核表达系统将目的基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),获得pET-32a-VHS重组质粒,成功制备了PRV VHS重组蛋白,将纯化后的蛋白作为免疫原接种BALB/c雌鼠,经过细胞融合、间接ELISA筛选和3轮亚克隆获得了2株PRV VHS蛋白的单克隆抗体,分别命名为1H8和4C3。使用间接ELISA方法检测,2株VHS单抗细胞均能稳定分泌抗体,且腹水抗体效价均达到1∶409 600。1H8和4C3的轻链均属于Kappa型,重链皆为IgG1亚类。Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)显示,2株杂交瘤细胞株分泌的单抗均能与PRV病毒蛋白发生特异性反应。通过VHS蛋白的截短表达和Western blot鉴定出1H8单抗可以识别抗原表位241VAPEDVKLKY250,单抗4C3可以识别抗原表位103RADGDGAADAPP114。本研究制备出2株VHS的单克隆抗体,鉴定出2个新的抗原表位,为后续研究PRV VHS蛋白功能及其在病毒感染和免疫应答中的作用提供了重要依据。