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  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 39-47.
    近期研究发现,14.5%的猫过敏患者血清中存在针对新型猫过敏原蛋白——尼曼匹克C2型蛋白(Niemann-Pick type C2,NPC2)的高特异性免疫球蛋白E(IgE)。为了深入解析该蛋白的致敏机制,并开发高效、精准的多表位疫苗,本研究针对猫的新型过敏原NPC2进行了疏水性分析、磷酸化位点预测、糖基化位点预测以及信号肽预测分析;通过NCBI数据库的蛋白质序列比对后建立猫过敏原蛋白NPC2的系统进化发育树;使用SOPMA软件对NPC2蛋白进行二级结构的预测分析,利用Swiss-Model进行了3D结构的同源建模,并与犬过敏原蛋白Can f7的抗原表位进行了比较。结果:猫过敏原蛋白NPC2与美洲狮NPC2蛋白的序列同源率最高,达到99.33%;猫过敏原蛋白NPC2的B细胞线性抗原表位序列为85FPIPEADGCKSG9622VIFKDCG28100PIQQGKTYSY10965VSSQG69132GDKEQ136115VKNEYPS121,T细胞表位为26DCGSGFGVI34129QLLGDKEQN1376VAFVLLALSASGLAE2071KALVYGILMGVAVPF85116KNEYPSIKVMVKWQL130;猫过敏原蛋白NPC2的构象性表位主要位于无规卷曲区域;此外,猫过敏原蛋白NPC2与犬过敏原蛋白Can f7的抗原表位序列具有一定的相似性,可能具有免疫交叉反应性和交叉保护性。综上,本研究通过生物信息分析获得了猫过敏原蛋白NPC2的B细胞、T细胞优势抗原表位,其结果可为宠物过敏原蛋白的多表位疫苗研究提供理论基础,并为对猫过敏的免疫治疗提供新的干预靶点和策略。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 80-88.
    猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染可引起仔猪急性腹泻和脱水,死亡率高。为了明确山东地区PEDV的流行趋势与遗传进化情况,本研究于2022—2023年对山东省的13个地级市进行了流行病学调查。通过对PEDV N基因的RT-PCR检测,结果在228份疑似腹泻样本中,PEDV阳性率达48.68%;同时,在PEDV感染的样本中,发现PEDV与猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)共感染的现象。对PEDV阳性样本进行S1基因的扩增测序,通过MEGA6软件对PEDV阳性样本进行S1基因的遗传进化分析,发现扩增的4株流行毒株属于GⅡc型,1株流行毒株属于GⅡa型。进一步对流行毒株进行分离,通过PEDV N基因的检测和间接免疫荧光染色,证实成功分离到1株PEDV(命名为SDQD20230628)。对分离株进行S基因的遗传进化分析,发现分离株S基因与GⅡc亚型毒株同源性较近。本研究发现PEDV仍是引起山东地区猪场腹泻猪主要病毒,且呈现出GⅡc亚型毒株趋于流行的趋势,研究结果丰富了山东地区PEDV分子流行病学数据,也为PEDV感染的防控提供了理论依据。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 144-150.
    猪精液质量检测是影响人工授精技术应用效果的重要环节,目前常用的猪精液保存方式有:常温液态保存(15~20℃)、低温液态保存(4~6℃)和超低温冷冻固态保存(-196℃),这3种方式会对精液质量产生不同程度的影响,尤其是后2种。由于猪精子膜上抗冻胆固醇的含量较其他动物低,所以猪精细胞对低温比较敏感,容易产生低温休克,因此低温对猪精子影响不同于其他物种。一般认为精子运动、形态与分娩率和产仔数直接相关,这也是种猪场常规的精子质量检测项目。本文对近几年国内外养殖场猪精子运动、形态检查项目和实验室猪精子代谢、抗氧化功能、DNA完整性、精子基因、蛋白生物标记等检测项目和参数研究进展以及之间的关联性进行综述,以期为猪精液质量检测评价研究和生产推广提供理论、方法及技术上的支持,更好地推动人工授精技术的发展。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 121-127.
    副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)是一种常见于猪上呼吸道的共生菌,在一定条件下可侵入宿主并引发严重的全身性疾病,表现为多发性纤维素性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等。GPS常与其他病原菌如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒等混合感染,严重危害生猪特别是保育期仔猪的健康。在现代化猪场中,该病频繁发生,对养猪行业造成了严重的经济损失。本文综述了GPS感染的临床病理特征、流行病学、诊断、预防和治疗等方面的最新研究进展,旨在为副猪格拉瑟病的临床诊治及科学研究提供参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 131-138.
    为了解福建地区致猪腹泻病病毒的流行现状和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的变异情况,2023—2024年从福州市某疑似感染腹泻病毒的规模化猪场采集发病仔猪样品,经RT-PCR进行PEDV、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)核酸检测,并对PEDV阳性病料进行纤突蛋白(S)基因序列扩增和测序,进行遗传演化分析。结果:PEDV、TGEV和PoRV检出率分别为32.29%(31/96)、30.21%(29/96)和4.17%(4/96),其中PEDV和TGEV混合感染17份(17.71%),TGEV和PoRV混合感染1份(1.04%),PEDV、TGEV和PoRV三重混合感染1份(1.04%)。从10份PEDV阳性猪肠道组织样品中获得10株PEDV的S基因序列,全长3 753~4 179 bp,编码1 250~1 392 aa, 10株PEDV的S基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为94.9%~99.8%和83.8%~99.7%。S基因系统发育进化树结果表明,6株属于GⅠb亚型,4株属于GⅡb亚型,且4株PEDV的S基因为独立的一小分支。与经典毒株CV777的S基因序列相比,10株PEDV的S基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为93.6%~96.9%和83.9%~95.9%,存在23个保守氨基酸位点突变,在162 aa处缺失1个氨基酸(R),GⅠb亚型的6株PEDV S蛋白存在10个保守氨基酸位点突变;GⅡb亚型的4株PEDV S蛋白存在45个保守氨基酸位点突变,在59~62 aa处有4个氨基酸(QGVN)插入,163 aa处缺失1个氨基酸(D)。综上,福建某规模化猪场PEDV流行率较高,流行毒株基因型呈现多样性,说明流行株持续变异,临床上应予以高度重视。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 139-143.
    旨在评价一种犬用复合益生菌膏剂的稳定性、安全性和适口性。将复合益生菌膏剂于4℃和常温干燥处保存,并于第0、7、14、21、28、35、42、49和56天分别取样,测定该复合益生菌膏剂的活菌数、pH值以及外观、色泽、质地等指标,评价该犬用复合益生菌膏剂的稳定性;通过给兔连续饲喂复合益生菌膏剂,测定兔的体况以及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)等生化指标,评估复合益生菌膏剂的安全性;通过双盆试验来测定犬对食物的可接受性或偏好,评价该犬用复合益生菌膏剂的适口性。结果:在4℃保存的复合益生菌膏剂在56 d时仍有较高的活菌数(1.0×10~8 CFU/g),感官评定指标良好,pH值变化较小,表明该复合益生菌膏剂具有较强的稳定性;口服复合益生菌膏剂后健康兔体况正常、肝肾功能指标正常,表明该复合益生菌膏剂具有较高的安全性;添加了复合益生菌膏剂的犬粮,其适口性和耐口性显著高于未添加复合益生菌膏剂的犬粮。综上,该复合益生菌膏剂具有较强的稳定性,较高的安全性,且适口性良好。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 103-114.
    为了解信阳地方土鸡中J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的遗传进化情况,对疑似感染ALV的鸡进行了核酸检测、病理组织学观察,并采集肝脏组织接种鸡胚成纤维细胞DF-1进行病毒分离;对分离到的ALV-J全基因组进行PCR扩增并测序;使用MegAlign软件对病毒全序列进行核苷酸相似性比对,同时对gp85、3′UTR和U3区进行序列分析,并使用MEGA 11.0软件构建遗传进化树。结果:PCR扩增出ALV-J特异性条带;病理组织学观察结果显示,病鸡肝脏、脾脏组织结构紊乱,可见大量髓样瘤细胞增生;肝脏组织处理液接种DF-1细胞后,细胞上清液经ELISA检测P27抗原呈阳性,将分离株命名为HN24XY03。全基因组序列分析表明,HN24XY03株全长7 609 bp,符合典型禽反转录病毒基因组结构特点,与25株ALV-J参考毒株全基因组核苷酸序列的同源性为94.3%~95.8%,其中与广西分离株GX14NN01和GX16YL02株同源性最高,亲缘关系最近;gp85基因及推导氨基酸序列分析显示,HN24XY03株与ALV-J广西分离株GX14NN01、GX17NN05亲缘关系较近,处于同一分支;与ALV-J原型株HPRS103相比,HN24XY03 gp85蛋白存在34个氨基酸变异位点和1个位点(D61-)缺失,其中9个位于hr1区,9个位于hr2区;3′UTR序列分析结果显示,分离株HN24XY03为UTR-Δr-TM毒株;利用SoftBerry NSITE在线分析程序分析发现,与英国分离株HPRS103相比,HN24XY03 U3区转录调控元件相对保守。本研究结果丰富了信阳地方土鸡ALV-J的分子流行病学资料,为进一步研究ALV-J在我国地方品种鸡群中的遗传进化和致病性奠定了基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 55-64.
    乳腺癌是雌性犬中发病率最高的癌症,有极高的转移率、复发率,治疗手段有限且难以完全治愈,本研究旨在探究泊沙康唑对干扰素基因刺激器(STING)激动剂cGAMP抗4T1乳腺肿瘤效应的增效作用。将BALB/c小鼠皮下注射4T1细胞建立乳腺癌移植瘤模型,然后分为Control组、cGAMP单独治疗组、泊沙康唑单独治疗组以及泊沙康唑+cGAMP联用组,观察并记录治疗过程中4T1乳腺肿瘤的体积、小鼠的体重以及生存率;通过流式细胞术评估各组小鼠脾脏和肿瘤引流淋巴结中CD69+T细胞的比例;通过高通量转录组测序探究肿瘤内免疫相关基因表达谱的变化。结果:与cGAMP单独治疗组相比,泊沙康唑+cGAMP联用组中小鼠肿瘤体积显著下降,生存率显著提高,且小鼠脾脏和肿瘤附近引流淋巴结中CD69+T细胞比例显著升高;在转录组测序中,与cGAMP单独治疗组相比,泊沙康唑+cGAMP组中cGAS-STING通路相关基因、细胞毒性相关基因及T细胞特征基因的富集程度更高。以上结果表明,泊沙康唑增强了cGAMP的体内抗肿瘤效应,改变了肿瘤免疫相关基因表达谱,并促进了cGAS-STING通路及其下游通路相关细胞因子反应的激活,可作为有效的STING通路激活增效剂,增强机体抗肿瘤免疫反应。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 115-124.
    为探明新疆白斑狗鱼(Esox lucius)发生细菌性败血症的原因,本研究调查了新疆呼图壁、乌鲁木齐米东区5个养殖鱼塘白斑狗鱼发病情况。通过对病鱼的临床症状与病理变化观察、高通量测序分析,以及病原的分离鉴定、毒力基因检测和回归感染试验,明确病原的种类及致病特点;采用Kirby-Bauer纸片扩散法分析病原菌对16种抗生素的敏感性,检测养殖场常用的氟苯尼考、恩诺沙星和多西环素最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果:在患病白斑狗鱼的脏器中分离出4个优势菌株,分别是3株维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和1株温和气单胞菌(Aeromonas sobria),携带黏附素(ahal)、细胞毒性肠毒素(act)、丝氨酸蛋白酶(ahp)3种毒力基因。人工回归感染后,2种病原菌混合感染对鱼的致病性损伤更严重,半数致死量(LD50)为1.5×10~5 CFU/mL。维氏气单胞菌对麦迪霉素、头孢噻吩以及喹诺酮类、氯霉素类、四环素类等12种抗生素敏感,对复方新诺明、万古霉素、青霉素和新霉素4种抗生素耐药;温和气单胞菌对万古霉素以及喹诺酮类、氯霉素类、四环素类等13种抗生素敏感,对头孢噻吩、青霉素和新霉素3种耐药。恩诺沙星、多西环素和氟苯尼考对维氏气单胞菌菌株抑菌效果最好,多西环素对温和气单胞菌菌株抑菌效果最好。综上,本研究首次报道了维氏气单胞菌和温和气单胞菌在新疆地区白斑狗鱼中的致病性及对不同抗生素的敏感性,为新疆地区白斑狗鱼细菌性败血症的诊断与防控提供了重要参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 98-104.
    旨在构建猪三基序蛋白(TRIM)56 E3泛素连接酶活性突变体并验证其在干扰素刺激蛋白(STING)介导的Ⅰ型干扰素信号通路中的作用。对猪源、人源TRIM56进行同源性比对、氨基酸序列分析,确定猪TRIM56 E3泛素连接酶活性位点;设计猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体引物,定点突变猪TRIM56 E3泛素连接酶活性位点,构建猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体质粒并通过蛋白质免疫印迹(Western blot)验证表达;通过双荧光素酶报告基因(Luciferase)试验、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)试验及免疫共沉淀(Co-IP)试验研究猪TRIM56及其E3泛素连接酶活性突变体在STING介导的Ⅰ型干扰素信号通路中的作用。结果:猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体构建成功;猪TRIM56促进STING介导的干扰素β(IFN-β)mRNA水平和启动子活性,促进STING K63连接的多聚泛素化修饰,而猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体没有显著促进作用。本研究为后续开展猪TRIM56在抗病毒天然免疫中的作用提供了有效工具。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 31-38.
    旨在研究夏季遮阳管理对绒山羊血清、胃和小肠抗氧化功能的影响。选取18只体重(15.48±1.65)kg的内蒙古绒山羊随机均分为3组,即对照组(CT)、围栏遮阳组(ES)和围栏+水槽遮阳组(ETS),于试验第1、7、14、21和28天分别采集绒山羊血液测定抗氧化指标,于试验第28天屠宰,采集瘤胃液、胃和小肠组织用于抗氧化指标的测定。结果:在试验期第7、14和28天,ETS组绒山羊血清过氧化氢酶(CAT)活性均显著高于ES组和CT组(P<0.05);在第14天,ETS组绒山羊血清丙二醛(MDA)含量显著低于ES组和CT组(P<0.05);在第21天,ES组和ETS组绒山羊血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于CT组(P<0.05)。ETS组绒山羊瘤胃液CAT活性显著高于ES组和CT组(P<0.05),ES组和ETS组SOD活性显著高于CT组(P<0.05);ETS组绒山羊瘤胃和网胃组织的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均显著高于CT组和ES组(P<0.05),且总抗氧化能力(T-AOC)也均较CT组显著升高(P<0.05);ES组和ETS组绒山羊网胃MDA含量较CT组显著降低(P<0.05);ETS组和ES组绒山羊皱胃T-AOC和SOD活性较CT组显著升高(P<0.05)。ETS组和ES组绒山羊十二指肠和回肠SOD活性和空肠GSH-Px活性较CT组均显著升高(P<0.05),十二指肠MDA含量显著降低(P<0.05);ETS组空肠SOD活性较ES组和CT组显著升高(P<0.05)。综上,在夏季高温环境下对围栏和水槽进行遮阳处理,能够增加绒山羊抗氧化酶活性,缓解高温环境导致的氧化应激。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 1-5.
    目前食品安全问题越来越受到重视,市面上常见的肉源检测方法存在自身的局限性,本研究探索基于线粒体基因ATP酶8亚基(ATP8)和NADH脱氢酶亚基1(ND1)基因检测不同肉源种属,旨在为肉类掺假鉴别新技术的开发提供技术支撑。以猪、牛、羊、鸡、鸭、兔、大鼠和小鼠共8种肉源的DNA作为检测靶标,根据ATP8和ND1基因中种间特异性强的序列来设计引物,采用PCR技术对目标DNA片段进行扩增,利用琼脂糖凝胶电泳对PCR扩增产物进行检测。结果:成功构建了引物组合分别为小鼠+鸡+羊,猪+牛+兔,鸭+大鼠的复合检测体系,能准确鉴别以上8种肉源种属;随机在市场采集里脊肉、开花肠、飘香牛肉、肉肠和肥牛卷共5种样本进行测试,其中里脊肉、开花肠、肉肠与配料表成分一致,飘香牛肉、肥牛卷与配料表成分不一致,证实该方法可应用于市场肉制品检测;该方法有效识别浓度达1 ng/μL。综上,本研究建立了8种肉源的低成本、高效的复合PCR检测体系,可以为食品安全中的肉类掺假鉴别提供帮助。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 6-21.
    旨在研究母猪受孕的过程中胚胎的附植点与非附植点的蛋白质表达变化。通过采集配种后15 d的妊娠猪子宫内膜胚胎附植点、非附植点与未妊娠猪子宫内膜样品,利用4D-Lable free技术筛选差异表达蛋白,并进行生物信息学分析,从中筛选出目标蛋白白细胞活化黏附因子(ALCAM)进行验证。结果:妊娠猪子宫内膜非附植点与未妊娠猪相比,差异表达蛋白有229个,其中表达量上调的有103个,下调的有126个;妊娠猪子宫内膜附植点与非附植点的差异表达蛋白有129个,其中上调54个,下调75个;妊娠猪子宫内膜附植点与未妊娠猪相比,差异表达蛋白有198个,其中上调119个,下调79个。差异蛋白的基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)注释结果表明,胚胎附植过程中,免疫反应过程细胞-细胞黏附反应均从附植15 d开始出现,其中在胚胎附植点还存在血管形成发生等过程,反映这些蛋白在母猪早期妊娠建立过程中可能发挥重要的调控作用。Western blot结果表明,ALCAM蛋白在妊娠猪子宫内膜附植点蛋白水平表达量极显著高于非附植点(P<0.01),在妊娠猪子宫内膜非附植点蛋白表达量极显著高于未妊娠猪(P<0.01)。综上,本研究找到了部分在妊娠猪子宫内膜胚胎附植点、非附植点及未妊娠母猪子宫内膜中的差异表达蛋白,并验证了其中的ALCAM蛋白在胚胎附植过程中可能具有重要的生物学功能,其表达水平的变化与胚胎附植点的形成和妊娠的建立密切相关。研究结果为深入理解母猪胚胎附植的分子机制提供了新的视角和潜在的生物标志物,为未来的生殖生理研究和临床应用奠定了基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 27-30.
    为探究蛋鸡肝脏脂肪沉积规律,将180只同日龄、体重相近的海兰褐蛋鸡随机分为3组,每组6个重复,每个重复10只,分别饲养至165日龄(产蛋前期)、307日龄(产蛋高峰期)、475日龄(产蛋后期),饲养期结束时每组随机挑选12只进行肝指数、血清和肝脏的生化指标测定并制作肝脏切片。结果:不同产蛋阶段蛋鸡的肝指数及肝脏粗脂肪含量无显著差异(P>0.05),产蛋高峰期蛋鸡血清甘油三酯含量显著高于产蛋前期,产蛋后期蛋鸡肝脏总胆固醇含量显著高于前期(P<0.05);肝脏切片显示,产蛋后期蛋鸡肝脏细胞中存在大块脂肪颗粒,肝板界限模糊不清。本研究表明,海兰褐蛋鸡在不同产蛋阶段,肝脏脂肪随日龄增长而不断沉积。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 22-26.
    旨在研究开口料中添加蛹虫草菌糠对山羊羔羊生长性能和血清生化指标的影响。测定蛹虫草菌糠活性物质、霉菌毒素含量和抑菌特性,选取23日龄、体重(6.78±1.68)kg的徐淮白山羊羔羊21只,随机分为对照组(基础开口料)、0.5%菌糠组(添加0.5%蛹虫草菌糠的开口料)、1.0%菌糠组(添加1.0%蛹虫草菌糠的开口料),每组7只,预试期7 d,正试期60 d,试验期第31天断奶。结果:试验所用蛹虫草菌糠中虫草素含量为1 127.07 mg/kg,腺苷含量为389.40 mg/kg,对霉菌毒素检测结果表明,伏马毒素含量为0.21 mg/kg,黄曲霉素B1含量为0.01μg/kg,玉米赤霉烯酮含量为0.02 mg/kg,呕吐毒素为0.68 mg/kg,远低于《饲料卫生标准》中羔羊精料补充料的最高限量;添加0.5%菌糠组31~60 d平均日增重显著高于对照组(P<0.05);添加0.5%和1%菌糠组31~60 d料重比均极显著低于对照组(P<0.01);饲喂添加0.5%蛹虫草菌糠的开口料未影响羔羊血清生化指标。综上,蛹虫草菌糠中生物活性物质含量较高,添加0.5%蛹虫草菌糠到开口料中可以提高断奶后羔羊平均日增重,降低料重比。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 72-79.
    旨在分析兽用中药新药博普总碱散中主要活性成分在肉鸡体内的药代动力学及残留消除规律。将200只1日龄隐性白羽肉鸡分为4组,即空白组和50(推荐剂量)、200和800 mg/kg博普总碱散添加组,连续给药36 d后,随机挑选各剂量组8只肉鸡在不同时间点静脉采血,使用超高效液相色谱-串联质谱技术(UPLC-MS)对肉鸡血浆中博普总碱散主要成分别隐品碱(ALL)和原阿片碱(PRO)进行定量分析;连续给药43 d后,在停药第1、3、5和7天分别随机宰杀8只肉鸡,采集肝脏、肾脏、胸肌、腿肌、心脏样品,使用UPLC-MS的多反应监测(MRM)模式测定肉鸡各组织中PRO和ALL残留量。药代动力学结果显示:50、200和800 mg/kg组的PRO在肉鸡体内峰浓度(Cmax)分别为(4.26±2.96)、(18.33±9.72)和(35.04±27.77)μg/L;外推药时曲线下面积(AUC0-∞)分别为(3.60±1.81)、(50.48±51.07)和(87.89±15.17)μg·h/L;50、200和800 mg/kg组的ALL在肉鸡体内达峰时间(Tmax)分别为(0.37±0.40)、(0.68±2.52)和(0.84±0.27) h,AUC0-∞分别为0、(47.51±15.57)和(72.94±92.04)μg·h/L,表明PRO和ALL在肉鸡体内代谢迅速。在给药10 h后血药浓度即低于定量限(0.78 ng/mL),PRO和ALL的Tmax、AUC、Cmax均呈现剂量相关性,随给药剂量增加而增大。残留检测结果显示,3个剂量组均在停药第1天的组织残留浓度最高,50 mg/kg组PRO最高残留量在胸肌组织中(1.90μg/kg),200 mg/kg组仅在肝脏、肾脏中有微量残留;200 mg/kg组停药第7天,在肝脏、肾脏、胸肌、腿肌和心脏均未检测到PRO和ALL,而800 mg/kg组仅在心脏和肾脏中仍有少量残留(0.6~1.16μg/kg)。综上,博普总碱散活性成分在肉鸡体内吸收较为迅速,残留消除快速,残留量极低,高剂量长期添加使用有一定的蓄积性,在按照50 mg/kg推荐剂量使用时显示出无残留和高安全性的优势,同时在肉鸡饲料中长期添加使用相对安全。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 105-113.
    旨在评价伪狂犬病病毒(PRV)三基因缺失疫苗株和Bartha-K61株对绵羊的安全性及其对变异毒株vPRV/XJ5攻毒的保护作用。使用实验室构建的vPRV-XJ5 gI-/gE-/TK-三基因缺失疫苗株和Bartha-K61疫苗株以不同剂量免疫6月龄的绵羊,再以变异株vPRV/XJ5攻毒,检测免疫后的抗体水平、攻毒后的体温变化、临床症状、排毒情况及各组织带毒量等指标,探究其安全性和保护作用。结果:1×10~5TCID50/头份或1×10~6TCID50/头份的Bartha-K61和1×10~6 TCID50/头份的vPRV-XJ5 gI-/gE-/TK-三基因缺失疫苗株免疫绵羊后无不良反应,攻毒后2周内体重保持增加,而10~5 TCID50 vPRV-XJ5 gI-/gE-/TK-免疫组和攻毒对照组攻毒后体重下降;肛拭子和咽拭子的抗原检测表明,10~6 TCID50vPRV-XJ5 gI-/gE-/TK-或Bartha-K61免疫组攻毒后排毒量均低于10~5 TCID50vPRV-XJ5 gI-/gE-/TK-和Bartha-K61免疫组。综上,对于目前流行的PRV变异毒株,1×10~5TCID50/头份的Bartha-K61疫苗或vPRV-XJ5 gI-/gE-/TK-基因缺失疫苗均不能为羊提供抵抗PRV变异毒株致死性攻击的临床保护,而1×10~6TCID50/头份的Bartha-K61疫苗和vPRV-XJ5 gI-/gE-/TK-基因缺失疫苗均能提供部分临床保护。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 128-134.
    无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是一种重要的人兽共患病原菌,不仅能引发新生儿的脑膜炎、败血症等疾病,还能感染孕妇、老年人及免疫功能不全者,对公众健康构成严重威胁。此外,该菌是罗非鱼链球菌病和奶牛乳房炎的重要致病菌,给水产养殖业和养牛业带来了重大的经济损失。因此,建立快速、敏感、准确的无乳链球菌检测方法对该类疫病的防控具有重要意义。目前,国内外已开发出多种方法检测不同群体中的无乳链球菌。本文总结了近年来的无乳链球菌检测技术研究进展,涵盖了微生物学、分子生物学、免疫学等传统检测技术,同时也介绍了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、生物传感器等新型检测方法,并对各种技术的优缺点进行了分析,旨在为无乳链球菌感染的诊断和防控工作提供重要参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 69-76.
    为了解我国广州地区犬流感病毒(canine influenza virus, CIV)的流行特征及其潜在的公共卫生风险,本研究采集具有流感样症状的宠物犬鼻拭子,利用犬肾细胞(MDCK)培养分离病毒,并采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对分离株进行鉴定;试验动物为4周龄BALB/c小鼠,分为对照组和感染组,分别滴鼻接种相同剂量的DMEM液和甲型流感病毒(IAV)病毒液,观察其临床症状并检测各脏器病毒载量,同时通过温度敏感性试验测定病毒的体外复制特性。结果:成功分离到一株H3N8亚型犬流感病毒(命名为IAV-2022-GZ),小鼠感染后表现为行动迟缓、被毛粗乱、体重降低,对照组(经DMEM处理)体重增长正常;感染组的小鼠肺脏和气管中病毒载量较高,提示该分离株在小鼠肺脏中可有效复制并对小鼠产生一定的致病潜力;细胞敏感性试验显示,该毒株对温度敏感,符合热敏感性毒株特征。综上,本研究对H3N8亚型犬流感病毒的部分生物学特性进行探究,为流感病毒跨物种传播风险评估及综合防控提供了参考数据。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 65-71.
    旨在探讨胆碱缺乏和补充胆碱对奶牛肝细胞脂滴形成的影响及其机制。试验用50μmol/L的非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids, NEFA)处理奶牛肝细胞24 h,建立肝细胞脂滴积聚模型;在缺乏胆碱时及使用不同浓度胆碱对细胞进行处理,采用油红O染色观察细胞脂滴的大小和数量的变化,薄层色谱法测定磷脂含量,Western blot检测细胞自噬相关蛋白表达水平。结果:在胆碱缺乏培养基中,肝细胞的脂滴含量和直径显著增大,添加15、30和60μmol/L胆碱后,脂滴的大小随着胆碱浓度的增加而逐渐减小,脂滴平均直径分别为1.98、1.68和1.54μm;与对照组相比,磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的含量随胆碱浓度的增加而显著升高(P<0.05);补充胆碱可激活奶牛肝细胞自噬,自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比例显著升高,P62蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。综上,缺乏胆碱可引起奶牛肝细胞脂滴直径增大,而补充胆碱可逆转脂滴的这一表型,细胞磷脂和自噬可能在其中发挥调控作用。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 125-130.
    为建立鸭星状病毒2型(DAstV-2)核酸现场快速检测方法,基于CRISPR/Casl2a切割原理,联合重组酶聚合酶等温扩增(recombinase ploymerase amplification, RPA),设计用于DAstV-2核酸RPA扩增的引物和基于CRISPR/Cas12a反应的向导RNA(crRNA),优化反应条件确立最佳检测体系,并用胶体金横向流动试纸条(lateral flow dipstick, LFD)报告检测结果。结果:该检测体系对DAstV-2重组质粒的检出下限为10 copies/μL,灵敏性强且重复性好;用此检测体系检测鸭常见病毒,除DAstV-2核酸阳性外,其他均为阴性,特异性强;与普通RT-PCR的检测结果相比较,符合率达到100%,且更加方便快捷。研究结果提示,基于RPA-CRISPR/Cas12a-LFD系统的DAstV-2核酸检测方法灵敏性好、特异性强、操作简单,可在37℃恒温下实现DAstV-2的现场快速可视化检测。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 97-102.
    旨在制备禽致病性大肠杆菌菌蜕,并优化制备条件。将温控型表达质粒pBV221-E通过电击的方式,电转化入12株禽致病性大肠杆菌分离株中,通过改变温度诱导E基因表达来裂解细菌制备菌蜕;同时探究了不同起始诱导A600值(0.4、0.5、0.6)对裂解效率的影响,优化制备条件提高裂解效率,并评估禽致病性大肠杆菌菌蜕的免疫保护力。结果:不同菌株的裂解效率有较大差异,在起始诱导A600值为0.5时,禽致病性大肠杆菌D78菌蜕的裂解效率最高,可达约98.00%;经透射电镜观察发现,制备获得的菌蜕表面有明显孔道,细胞质从孔道溢出,菌体电子密度下降;免疫效力评估试验显示,SPF鸡经肌肉注射D78菌蜕疫苗,二免14 d后,通过气囊注射攻毒,D78菌蜕疫苗的免疫保护率为66.67%,优于D78甲醛灭活疫苗。研究结果为新型禽致病性大肠杆菌疫苗的研发奠定了基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 89-96.
    旨在探讨紫外发光二极管(UV-LED)对猪场水源中重要病原微生物的灭活效率,并分析经UV-LED消杀的饮水对断奶仔猪生长性能与免疫指标的影响。通过菌落计数法测定UV-LED对副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS),猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)和肠产毒素型大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)3种致病菌菌株的杀灭效率;培养非洲绿猴肾细胞(Vero),非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145),猪肾细胞(PK-15)与猪肺泡巨噬细胞(PAM),对其分别接种伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和非洲猪瘟病毒(ASFV),观察细胞病变情况,并计算其病毒滴度,作为UV-LED灭活病毒效果的评价指标;给断奶仔猪饲喂经UV-LED消杀的饮水,测定其对生长性能及血液指标的影响。结果:UV-LED对于水源中的GPS、SS2、ETEC这3种病菌均具有很强的杀灭效果,处理17 s以上时,对以上细菌的杀灭效率可达99.90%以上;对PRV、PCV2、PRRSV、ASFV这4种病毒均具有杀灭作用,但杀灭效果存在一定区别,处理17 s以上可完全灭活PRV、PCV2与PRRSV,而完全灭活ASFV需处理58 s;断奶仔猪饲喂结果表明,给予经UV-LED消杀饮水,可显著减少断奶仔猪腹泻率(P<0.05),改善肠道功能,并且可使断奶仔猪血液中白细胞数、淋巴细胞数与单核细胞数显著下降(P<0.05)。综上,UV-LED消杀处理可以有效消杀水中常见的病原微生物,减少断奶仔猪被病原微生物感染的风险,可应用于水源消毒。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 83-91.
    旨在构建布氏杆菌分泌蛋白BspD基因的真核表达载体,研究其在小鼠巨噬细胞RAW 264.7中的表达情况。根据GenBank公布的牛种布氏杆菌2308 bspD基因序列进行合成和设计特异性引物,通过PCR获得bspD基因片段,并将其克隆至pcDNA3.1-EGFP载体,获得真核表达载体pcDNA3.1-EGFP-bspD;pcDNA3.1-EGFP-bspD经酶切和测序分析鉴定后,用Lipofectamine 3000脂质体转染至小鼠巨噬细胞RAW 264.7,采用Western blot检测BspD蛋白在RAW 264.7细胞的表达,用ELISA试剂盒检测细胞上清中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的分泌水平,利用水溶性四唑盐-1(WST-1)细胞毒性检测试剂盒检测细胞毒性水平,利用细胞活力检测试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖情况,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测细胞凋亡基因Caspase-3和Caspase-8的表达水平。结果:阳性克隆载体经PCR扩增出936 bp的bspD基因片段,经限制性内切酶KpnⅠ和BamHⅠ酶切验证正确,测序分析显示与GenBank公布的序列信息同源性为100%,表明真核表达载体pcDNA3.1-EGFP-bspD构建成功;Western blot检测结果为pcDNA3.1-EGFP-bspD转染组在36 kDa处出现条带,与预期结果相符,表明BspD蛋白能够在RAW 264.7细胞中表达;细胞因子检测结果显示,BspD蛋白可诱导RAW 264.7细胞分泌辅助型T细胞1(Th1)型细胞因子IFN-γ和辅助型T细胞2(Th2)型细胞因子IL-4;细胞毒性检测结果显示,BspD蛋白对细胞无毒性,BspD蛋白对细胞增殖和Caspase-3和Caspase-8的表达无显著影响。综上,布氏杆菌分泌蛋白BspD能够在RAW 264.7细胞中表达,为进一步研究其功能及分子机制提供参考。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 61-68.
    旨在探究光周期对扬州鹅睾丸发育的影响及机制。试验对象为经产扬州鹅(735 d,公母比例为1∶5),饲养于全封闭人工控制光照和温度的棚舍内(1 500只/棚),饲养期间光照程序为短光照(L∶D=6.5 h∶17.5 h)饲养60 d,随后延长光照(L∶D=11.5 h∶12.5 h)饲养,分别于短光照第38天(短光照组)以及长光照第73天(长光照组)采集血液,分离血清并检测相关的生理生化指标和激素水平;采集其左侧睾丸组织进行转录组测序(RNA sequencing, RNA-seq)分析,筛选不同光周期的差异基因,并对差异基因进行富集分析。结果:与短光照组相比,长光照组睾丸体积增大、曲细精管中有大量的成熟精子,且曲细精管直径、上皮高度、管腔直径、精子数量均有显著升高(P<0.05);长光照组血液中睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)浓度均显著高于短光照组(P<0.05);RNA-seq测序结果显示,与短光照组相比,长光照组扬州鹅睾丸组织中表达上调的基因有4 383个,表达下调的基因有2 928个;其差异表达基因主要富集于细胞外基质(ECM)与细胞表面受体之间的相互作用、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路、核糖体等通路。综上,延长光照后PI3K-AKT通路被激活,从而促进扬州鹅睾丸发育,为深入认识光照对动物繁殖的调控作用提供了参考资料。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 38-43.
    旨在筛选潜在高产纤维素酶的益生菌并探究其益生作用以期用于生产实践。从绵羊肠道内容物中,利用羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板筛选产纤维素酶菌株,测定其纤维素酶活性,筛选出目标菌株;采用形态学分析、生化试验和16S rDNA序列分析对目标菌株进行鉴定;进一步探究其生长曲线、产蛋白酶及α-淀粉酶能力、抑制病原菌能力、耐酸耐胆盐能力、药物敏感性和宿主安全性。结果:从样品中筛选获得8株产纤维素酶菌株,根据透明圈和菌落直径比值以及纤维素酶活性筛选获得产纤维素能力最强的菌株ECL1.2,其羧甲基纤维素酶活性为18.61 U/mL,经鉴定为枯草芽胞杆菌;ECL1.2在培养12 h后进入对数生长期,在培养26 h时进入稳定期;其蛋白酶和α-淀粉酶活力分别为2.08 U/mL和19.7 U/mL;可抑制大肠杆菌、肠炎沙门菌和金黄色葡萄球菌的生长;在pH值为2~7培养4 h及胆盐浓度为0.1%~0.3%培养8 h条件下存活率大于60%,具有一定耐酸耐胆盐性;除对林可霉素低敏、对庆大霉素中敏外,对青霉素、头孢唑啉、克拉霉素、诺氟沙星、万古霉素、利福平极其敏感;对小鼠器官和肠道无危害,并能提高小鼠日增重和采食量。综上,枯草芽胞杆菌ECL1.2可作为潜在益生菌。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 26-30.
    旨在研究不同饮水器对肉鸭用水量、饮水行为和体重增长、肌肉品质、器官指数等生长性能的影响。选取1日龄健康且体重相近的樱桃谷肉鸭160只,随机分为2组,每组4个重复,每个重复20只鸭;试验组使用水禽专用饮水器,对照组使用养殖通用乳头式饮水器,养殖环境指标及日粮均保持一致,饲养至42日龄。结果:随着日龄增长,肉鸭用水量总体呈上升趋势,其中采用水禽专用饮水器的肉鸭日均用水量极显著高于采用乳头式饮水器的肉鸭(P<0.01);使用不同饮水器的肉鸭在不同日龄的饮水次数变化呈现先增加后减少的趋势;不同组别肌肉冷藏滴水损失与蒸煮损失无显著差异(P>0.05),肉色差异显著(P<0.05);肉鸭的体重随日龄增长而逐渐增加,但不同组别肉鸭体重增长无显著差异,心脏、肝脏、腿肌、法氏囊、肺脏、全肠的器官指数无显著差异(P>0.05)。综上,本试验所选择的水禽专用饮水器与通用乳头式饮水器相比,肉鸭用水量更多,所选择的水禽专用饮水器相比于养殖通用乳头式饮水器对肉鸭生产性能并无显著影响。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 52-60.
    旨在了解江苏和宁夏回族自治区鸡源金黄色葡萄球菌的流行特征及耐药性差异。本研究通过增菌、金黄色葡萄球菌显色培养、PCR鉴定等方法对样本中的金黄色葡萄球菌进行分离和鉴定,然后采用微量肉汤稀释法检测18种抗菌药物对分离菌株的最小抑菌浓度(MICs),并采用PCR对17种常见的耐药基因进行了检测。结果:从760份鸡泄殖腔拭子、盲肠和粪便样本中共分离出64株金黄色葡萄球菌,其中江苏地区42株,宁夏地区22株,分离率分别为8.24%和8.80%,表明2地区鸡源金黄色葡萄球菌检出率无明显差异;药敏试验表明分离菌株对青霉素(61/64)、阿莫西林-克拉维酸(60/64)、红霉素(58/64)、克林霉素(59/64)、恩诺沙星(56/64)、氧氟沙星(58/64)、复方新诺明(59/64)、氟苯尼考(60/64)、替米考星(52/64)、庆大霉素(56/64)和四环素(59/64)耐药程度较高,耐药率均达80%以上,对头孢西丁(2/64)、磺胺异恶唑(4/64)和苯唑西林(5/64)较为敏感,耐药率低至3.31%,6.25%和7.81%,未分离出头孢噻呋、万古霉素和利奈唑胺的耐药菌株;总体来看,分离菌株的多重耐药率高达93.75%,其中江苏地区90.48%,宁夏地区100%;耐药谱有23种,PEN-ERY-CLI-ENR-OFL-SXT-TET-FFC-TIL-GEN的耐药表型占比最高,共有21株。共检出耐药基因13种,其中,氟喹诺酮类药物的耐药基因grlA检出率96.88%(62/64),环丙沙星的耐药基因norA检出率为95.31%(61/64)。本研究表明,宁夏地区分离的鸡源金黄色葡萄球菌耐药率普遍高于江苏地区分离的鸡源金黄色葡萄球菌,多重耐药情况也较为严重,相关养殖场应基于药敏结果合理、谨慎使用抗菌药物,并在生产各环节加强细菌耐药性的常规监测。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 1-5.
    旨在研究夷陵牛的生长性能、屠宰性能和肉质性状。对56头成年夷陵牛体重和体尺指标进行测定,对91头夷陵牛初生及6、12、18月龄阶段的体重进行测定,并选取育肥后的夷陵牛20头(公母各半)测定其屠宰性能和肉质性状。结果:生长性能方面,夷陵公牛的体重及体尺指标均显著优于母牛个体(P<0.05);屠宰性能方面,夷陵公牛屠宰率为55.56%,净肉率为46.36%,胴体产肉率为83.44%,肉骨比为(5.04±0.85),眼肌面积为68.10 cm2,夷陵母牛屠宰率为49.32%,净肉率为40.23%,胴体产肉率为81.57%,肉骨比为(4.43±0.73),眼肌面积为56.34 cm2,差异均显著(P<0.05);肉质性状方面,夷陵公母牛在大理石花纹、肉色、嫩度等指标方面基本保持一致,鲜肉中氨基酸比例以及多种不饱和脂肪酸比例适当。综上,夷陵牛肉品质较好,夷陵公牛具有良好的产肉性能,可生产高档牛肉,夷陵母牛需通过本品种选育结合导入杂交进一步提高肉用性能。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 6-12.
    为探索适合良种娘亚牦牛高效扩繁技术,本文通过假阴道法采集3头娘亚公牦牛精液,检测精子质量后制作细管冻精;选取3岁左右的未孕、健康娘亚处女牦牛56头,用3种药物组合:氯前列烯醇+氯前列烯醇+血促性素(A组,n=16),孕酮阴道栓+氯前列烯醇+血促性素(B组,n=20)和戈那瑞林+氯前列烯醇+戈那瑞林(C组,n=20)进行同期发情处理,鉴定发情后进行人工授精,以早孕试纸检测卡与便携式B超诊断仪进行妊娠检测。结果:娘亚牦牛平均精液量为(2.03±0.25) mL,精子密度为(14.04±2.52)×10~8个/mL,活率为(83.00±3.46)%,畸形率为(5.33±1.53)%,满足冻精制作标准;制作的细管冻精解冻后平均精子活率为(46.08±2.14)%,畸形率为(10.72±5.81)%,质膜完整率为(47.69±1.42)%,顶体完整率为(55.94±1.75)%,为合格冻精;同期发情结果表明,B组处理发情效果最好,在48 h发情率可达60%,A组在48 h发情率为37.5%,C组发情最慢,在48 h发情率仅20%,96 h发情率才达60%,且B组总发情率最高为90%,与A组87.5%总发情率无显著差异(P>0.05),但与C组60%总发情率差异显著(P<0.05);3组受胎率分别为28.57%、33.33%、33.33%,均无显著差异(P>0.05)。本文为西藏娘亚牦牛细管冻精制作与人工授精提供了实践指导。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 92-97.
    旨在比较火鸡疱疹病毒(HVT)亚克隆对构建活载体疫苗的影响。本研究采用同源重组方法,在HVT Fc126的UL55与UL56基因间的非编码区插入MiniF序列,构建重组病毒;采用细菌人工染色体(BAC)技术,分别提取病毒DNA后转入DH10B感受态细胞中,构建3个对应的BAC;将传染性法氏囊病毒(IBDV)的VP2表达盒分别与3株BAC的DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行重组病毒的拯救;将重组活载体、亲本毒株及商品化重组活载体的生长动力学进行比较;将3株重组活载体接种SPF鸡后,在免疫后第3、4、5、6周等共4个时间点采集血清进行琼脂扩散试验。结果:获得3个纯化的HVT-MiniF亚克隆病毒,然后获得3株对应的HVT BAC,分别命名为HVT BAC-C1、HVT BAC-C2和HVT BAC-C3。限制性片段长度多态性(RFLP)鉴定发现这3个BAC亚克隆的基因组主体序列几乎一致,略有差异;进一步获得3株相对应的VP2重组HVT活载体,分别命名为HVT-VP2-C1、HVT-VP2-C2、HVT-VP2-C3;生长动力学结果表明,3株VP2重组病毒与2株对照病毒的滴度在6、24、36和72 h存在显著性差异(P<0.05),在12和48 h无明显差异(P>0.05);琼脂扩散试验结果发现3个亚克隆的重组病毒均能产生较高抗体,但都没有达到对照商品疫苗的水平;3个亚克隆重组病毒之间产生的抗体存在明显差异,其中HVT-VP2-C2免疫鸡后产生的抗体最高。综上,HVT在传代过程中可能易出现基因变异,提示在构建重组活载体疫苗时,应充分考虑不同亚克隆活载体的免疫效力差异,做好种毒纯化。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 13-19.
    旨在分析猪体外受精(IVF)和孤雌激活(PA)胚胎第一次卵裂前后mRNA的3′UTR组动态变化,为进一步试验揭示3′UTR转录后调控母源mRNAs的降解分子机制提供参考。利用课题组获得的猪IVF和PA来源的1-细胞与2-细胞期胚胎的单细胞RNA-seq (scRNA-seq)数据集,使用DaPars软件分析鉴定3′UTRs有差异的mRNAs并对其参与的信号通路进行富集,筛选差异较大的mRNAs,对其3′UTRs进行整合基因组浏览器(IGV)可视化分析,进一步筛选3′UTRs平均长度在卵裂前后有显著差异的mRNAs,对其3′UTRs中存在的胞质多聚腺苷酸化元件(CPE)、多聚腺苷酸化信号(PAS)、microRNA结合位点和m6A位点等顺式功能元件进行预测。结果:猪IVF和PA胚胎第一次卵裂前后分别有207和117个mRNAs的3′UTRs显著差异(P<0.05),这些mRNAs分别参与不同的基因本体分析(GO)和京都基因与基因组百科全书分析(KEGG)通路;进一步分析表明,猪IVF胚胎第一次卵裂前后的核转运蛋白α3 (KPNA3),猪PA胚胎第一次卵裂前后的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、酪蛋白激酶1 γ3亚型(CSNK1G3)和Ras结合结构域家族成员3(RASSF3)的3′UTRs的平均长度差异大于90 nt;这4个mRNAs 3′UTRs中包含的CPE和PAS,KPNA3和CSNK1G3 3′UTRs中包含的microRNA结合位点,以及CSNK1G3 3′UTRs中包含的m6A位点的位置、个数和种类存在差异。综上,猪IVF和PA胚胎第一次卵裂前后众多mRNAs的3′UTRs发生了显著的变化,猪IVF胚胎组的KPNA3,PA胚胎组的HMGB1、CSNK1G3和RASSF3 3′UTRs的平均长度在第一次卵裂前后差异较大,这些mRNAs的丰度可能受到3′UTRs中包含的功能元件差异的调控。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(07): 48-54.
    旨在探究兔肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)的分子特征及转录特性。本研究首次克隆并鉴定了兔TRAF4基因,采用生物信息学的方法对兔TRAF4的分子特征和转录特性进行分子结构预测分析;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析了兔在感染肠出血性大肠杆菌(EHEC)后TRAF4基因的转录水平变化,并利用间接免疫荧光技术确定了TRAF4的亚细胞定位。结果:兔TRAF4基因编码区长为1 422 bp,编码483个氨基酸残基;通过与系统发育树中其他哺乳动物的氨基酸相似性比对,发现兔TRAF4与其他哺乳动物具有较高的同源性和密切的亲缘关系;亚细胞定位试验显示,TRAF4在细胞质和细胞核中均有表达;在EHEC感染后,脾脏、肾脏和胸腺中TRAF4的转录水平整体呈下调趋势,提示TRAF4基因可能通过负反馈机制参与调控感染后的免疫应答。综上,本研究成功克隆了兔的TRAF4基因并进行了生物信息学分析,阐明了其在细胞中的定位及在细菌感染后的转录水平变化,为进一步研究兔TRAF4在先天免疫中的作用提供了理论基础。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 44-51.
    旨在探究饲粮中添加喷雾干燥猪血浆蛋白粉(SDPP)、牛初乳粉(BCP)和破壁蜂花粉(WBBP)对犬生长性能、粪便评分、血常规指标、血清生化指标和免疫功能的影响。选取16只成年迷你贵宾犬,公母各半,随机分成2组,每组8个重复,分别饲喂基础饲粮(对照组)和基础饲粮+0.1%SDPP+0.05%BCP+0.1%WBBP(试验组),预试期7 d,正试期28 d;正试期前1 d,称取每只犬的空腹初始体重,第14和28天称取空腹体重后,采集血液样本用于检测血清生化、血常规、血清免疫指标;在第1、7、14、21和28天进行粪便评分;试验期间记录每只犬的日采食量。结果:与对照组相比,试验组添加SDPP、BCP和WBBP对成年迷你贵宾犬生长性能和粪便评分无显著影响(P>0.05);试验第28天时,试验组红细胞分布宽度系数显著升高(P<0.05);试验第14天时,试验组肌酐水平显著降低(P<0.05),补体4水平显著升高(P<0.05),补体3水平有升高趋势。综上,添加SDPP、BCP和WBBP可通过影响血液中肌酐、补体4水平从而提升成年迷你贵宾犬的免疫能力,同时不影响成年迷你贵宾犬的日采食量、日增重和消化吸收能力。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 31-37.
    旨在探究lncRNA CUFF.253988.1在T-2毒素诱导猪卵巢颗粒细胞损伤中的作用。本试验分离培养了猪原代卵巢颗粒细胞,通过荧光标记的卵泡刺激素受体(FSHR)抗体对细胞进行鉴定;采用实时荧光定量PCR技术,检测T-2毒素对卵巢颗粒细胞及其线粒体lncRNA CUFF.253988.1转录水平的影响;通过RNA荧光原位杂交技术检测T-2毒素对lncRNA CUFF.253988.1细胞定位的影响;利用流式细胞术检测T-2毒素对卵巢颗粒细胞活性氧(ROS)、线粒体膜电位和细胞凋亡的影响;通过透射电镜观察T-2毒素对细胞超微结构的影响;使用反义寡核苷酸(ASO)特异性敲低lncRNA CUFF.253988.1后观察相关指标的变化。结果:T-2毒素显著上调lncRNA CUFF.253988.1在细胞和线粒体中的表达水平(P<0.01),增加了lncRNA CUFF.253988.1在线粒体的聚集;敲低lncRNA CUFF.253988.1后,缓解了T-2毒素诱导的线粒体结构损伤,显著降低了细胞中ROS的产生(P<0.01),恢复线粒体膜电位(P<0.01)并抑制细胞凋亡(P<0.01)。本研究表明,lncRNA CUFF.253988.1在T-2毒素诱导的卵巢颗粒细胞损伤中具有重要调控作用。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 20-25.
    旨在从健康白羽肉鸡肠道中分离鉴定乳杆菌。采用微生物分离培养技术、16S rRNA测序鉴定,牛津杯扩散法检测抑菌能力,并检测其对酸碱和胆盐的耐受能力,最后通过产酸性能进行菌株筛选;动物试验选取500日龄体重、产蛋率相近的华绿1号绿壳蛋鸡270只,随机分成3组,分别为对照组、低剂量唾液乳杆菌组和高剂量唾液乳杆菌组,探讨了该乳杆菌对产蛋后期蛋鸡产蛋率、蛋品质和血清生化指标的影响,试验期为6周。结果:分离菌是具有较强的产酸性能的革兰阳性菌,结合16S rRNA鉴定结果命名为唾液乳杆菌JQ07,该菌发酵上清液可抑制大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌的生长,该菌具有一定的耐酸、耐胆盐的特性;动物试验表明,与对照组比较,高剂量唾液乳杆菌组产蛋率显著升高(P<0.05),添加唾液乳杆菌改善了蛋品质,表现为蛋壳厚度、强度和哈氏单位均有升高趋势;生化指标分析发现,饲喂唾液乳杆菌提高了血清中白蛋白和总蛋白含量,高剂量唾液乳杆菌组血清碱性磷酸酶活性显著升高。综上,源自健康白羽肉鸡肠道的唾液乳杆菌JQ07,通过改善产蛋后期蛋鸡肠道消化吸收功能,提高产蛋率,提升蛋品质,对产蛋后期蛋鸡生产性能有提升作用,可作为益生菌备选菌株。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 142-146.
    纤维化是指组织器官中细胞外基质过度沉积及结缔组织异常增生的病理过程,其诱因多样且调控机制复杂,目前尚缺乏有效的干预手段。研究证实2型上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)在组织器官纤维化的发生、发展中扮演关键角色,本文阐述其机制作用与影响因素,并总结和展望2型EMT通路抑制剂、天然生物活性物质以及靶向2型EMT的生物材料在干预纤维化中的研究进展,以期对组织器官纤维化的干预治疗提供新思路。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 135-141.
    多脊椎性状描述的是动物的脊椎数量相较于正常个体有所增长的现象,是有益变异。德州驴的胸腰椎数增多能增加其体尺和胴体重,提高产肉、产皮性能,进而提升经济价值。德州驴多脊椎性状显示出较高的遗传力,这为其在遗传优化过程中展现出优良生产性能提供了可能。本文对德州驴的多脊椎数性状、候选基因鉴定的研究方法和德州驴脊椎数性状候选基因三个方面进行了综述,以期为分析德州驴多胸腰椎性状的遗传基础,改善德州驴的经济性状及培育优良品种提供思路。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 77-82.
    旨在制备一种特异性强、灵敏度高的猪A群轮状病毒(porcine rotavirus A,PoRVA)VP4单克隆抗体。本研究通过PCR扩增PoRVA分离株VP4基因的完整片段(2 463 bp),构建原核表达载体pET-28a-VP4表达蛋白后制备单克隆抗体并进行鉴定。结果:重组蛋白大小在98 kDa左右,为不可溶蛋白,存在于包涵体中;经验证,猪轮状病毒阳性血清能够识别该重组蛋白,蛋白条带单一且清晰,具备良好的抗原性;蛋白纯化后,经小鼠免疫流程以及细胞融合筛选,3轮亚克隆后最终获得1株能稳定分泌抗VP4蛋白的阳性杂交瘤细胞株4B10,其轻链类型为Kappa型,重链亚型为IgG1,制备的小鼠腹水效价可达1∶3 000 000;在此基础上制备的单克隆抗体能特异性识别PoRV Pig/NJ/2012,具有良好反应性,可用于靶抗原的直接检测。综上,本研究制备的单克隆抗体特异性强、灵敏度高,为后续蛋白功能及病毒致病机制的研究提供了生物材料。
  • Anim Husb Veter Med. 2025, 57(06): 114-120.
    旨在探究真胃左方变位对奶牛产奶量、反刍及活动量的影响。通过收集山东某牧场2022年12月—2023年12月1 580头泌乳奶牛的疾病发病记录和日产奶量、日反刍时间和日活动量等数据,利用多因素方差法分析胎次、泌乳阶段、测定季节、产犊季节和真胃左方变位与否对奶牛日产奶量、日反刍时间和日活动量的影响。结果:胎次、泌乳阶段、测定季节、产犊季节和真胃左方变位与否对奶牛日产奶量、日反刍时间和日活动量均有影响(P<0.01);不同胎次、泌乳阶段和测定季节下真胃左方变位奶牛的日产奶量、日反刍时间和日活动量均低于健康奶牛(P<0.01);夏季、秋季和冬季产犊真胃左方变位奶牛的日产奶量、日反刍时间和日活动量也低于健康奶牛(P<0.01),但春季产犊奶牛真胃左方变位仅对日产奶量有影响(P<0.01),对日反刍时间和日活动量无影响(P>0.05)。综上,真胃左方变位对奶牛日产奶量、日反刍时间和日活动量均有较大影响,发病牛只日产奶量、日反刍时间和日活动量均显著低于健康奶牛,结果可为真胃左方变位的预防、治疗等方面提供参考。