目的 基于网络药理学、代谢组学和16sr DNA探究加味逍遥丸（JWXYP）改善抑郁样行为的功效物质及作用机制。方法 通过TCMSP、TCMIP等数据库，筛选加味逍遥丸治疗抑郁症的功效物质群、关键靶点及通路。将SD大鼠随机分为空白（Control）组、模型（CUMS）组、阳性组（1.8 mg/kg）组和加味逍遥丸低、中、高(JWXYP,1.44、2.88、4.32 g·kg^-1·d^-1)组（n=6）。通过行为学实验评估大鼠抑郁样行为，HE染色观察肝脏和海马病理变化，ELISA检测血清和脑组织生化指标。血清代谢组学采用OPLS-DA方法筛选差异代谢物并进行通路分析。盲肠内容物进行16sr DNA基因测序分析肠道菌群变化。结果 网络药理学研究发现，加味逍遥丸中的薄荷酮和丹皮酚等关键成分可通过血脑屏障，调节炎症通路保护神经系统。动物实验显示，加味逍遥丸均显著改善模型大鼠的体质量、糖水偏好率及旷场中央区域活动时间（P<0.05）；明显减少肝脏炎性细胞浸润和细胞坏死，改善海马神经元结构；降低血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6水平以及脂多糖结合蛋白，上调外周血和大脑中5-羟色胺、血管活性肠肽的浓度（P<0.05），其中高剂量效果最为显著（P<0.01）。代谢组学分析显示，加味逍遥丸干预的差异代谢物包括吲哚-3-乙酰胺、乙酰左旋肉碱、3-甲基-L-组氨酸等，涉及次级胆汁酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代谢和D-氨基酸代谢等多条通路（P<0.05）。16sr DNA分析发现，加味逍遥丸组的Chao1、Observed和Shannon指数均明显升高，肠道菌群丰富度和均匀度增加，且菌鼠乳杆菌、肠乳酸杆菌的丰度显著提高。结论 加味逍遥丸通过调节神经递质、抗炎抗氧化以及肠道菌群三条途径相互作用，改善情绪和认知功能减轻抑郁样症状。