目的 探讨川续断皂苷VI(AVI)对小鼠克罗恩病（CD）样结肠炎的肠上皮细胞凋亡和肠屏障的影响及其作用机制。方法 将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组（WT组）、2,4,6-三硝基苯磺酸诱导模型组（TNBS组）、AVI药物治疗组（AVI组，150 mg/kg），每组10只。通过监测小鼠体质量、测量结肠长度、疾病活动度（DAI）评分、HE染色、AB-PAS染色、组织炎症评分、ELISA和RT-q PCR实验，验证AVI对小鼠结肠炎的缓解作用。采用TNF-α诱导Caco-2细胞建立体外凋亡模型，分为Control组、TNF-α组、AVI组（250μmol/L）。CCK-8实验检测AVI对Caco-2细胞活力的影响。采用免疫荧光、TUNEL实验和Western blotting检测AVI对小鼠肠上皮细胞和Caco-2细胞屏障损伤与凋亡的改善情况。利用网络药理学预测AVI干预CD的分子机制可能与PI3K/AKT/NF-κB通路有关，Western blotting检测体内外通路的蛋白表达，以及经PI3K/AKT通路激活剂（Recilisib）和AKT1 si RNA转染干预细胞后，通过TUNEL实验和Western blotting验证其对细胞凋亡的调控作用。结果 AVI能明显地缓解小鼠体质量降低、结肠缩短、DAI与组织炎症评分的增加、肠绒毛和杯状细胞的损伤，以及炎症因子的高表达（P<0.05）。AVI浓度在0～250μmol/L时对Caco-2细胞活力无影响。体内外实验证实，AVI可阻断紧密连接蛋白的缺失，减少肠上皮细胞的凋亡（P<0.05）。KEGG富集通路分析发现AVI干预CD可能与抑制PI3K/AKT/NF-κB通路活化有关，在体内外模型证实AVI干预后p-PI3K、p-AKT和p-p65的表达降低（P<0.05）。此外，Recilisib干预后可逆转AVI对通路的抑制作用和抗凋亡作用（P<0.05）,AKT1 si RNA转染细胞后证实PI3K/AKT通路可介导下游NF-κB信号的活化（P<0.05）。结论 AVI可通过拮抗肠上皮细胞的凋亡和减轻肠屏障损伤，达到改善TNBS诱导的CD小鼠结肠炎的目的，其机制可能与AVI负向调控PI3K/AKT/NF-κB有关。