目的 基于网络药理学和实验验证探讨鼠曲草总黄酮对对乙酰氨基酚（APAP）诱导的急性肝损伤（ALI）的保护作用及其机制。方法 通过文献检索获取鼠曲草总黄酮的主要化学成分，使用多重数据库分析预测鼠曲草总黄酮的药理机制。动物实验验证：将36只SPF级小鼠分为空白对照组，APAP模型组，鼠曲草总黄酮低剂量组（100 mg/kg）、中剂量（200 mg/kg）、高剂量（400 mg/kg）组，阳性药物联苯双酯组（150 mg/kg），每组6只。通过大体标本与生化检查、HE染色、普鲁士蓝染色及分子生物学检查，评估鼠曲草总黄酮干预APAP诱导急性肝损伤的药效及药理机制。结果 网络药理学结果显示，鼠曲草总黄酮调控APAP肝损伤的主要活性成分为槲皮素、木樨草素、卡脲酸、山奈酚，GO功能富集分析得到GO条目632个，其中生物过程472个，细胞组成42个，分子功能条目118个。KEGG富集分析显示，鼠曲草总黄酮调节APAP肝损伤的通路主要涉及铁死亡相关信号通路。动物验证实验显示，鼠曲草总黄酮治疗组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶均降低（P<0.05），肝脏组织病理和炎症浸润均有所改善。鼠曲草总黄酮可减轻肝组织内铁沉积（P<0.05），改善脂质过氧化相关指标（P<0.05）；促进Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX-4蛋白表达，抑制keap1蛋白表达（P<0.05）。结论 通过网络药理学和动物实验可推断鼠曲草总黄酮激活Nrf2/SLC7A11/GPX-4信号通路调控肝细胞铁死亡对APAP肝损伤起到预防和治疗的作用。