目的 调查并分析中南地区某市住院腹泻患者艰难梭菌感染情况及相关危险因素。方法 收集2020年10～12月湘南学院附属医院、附属第一医院和附属第三医院的住院腹泻患者粪便标本共306例，厌氧培养法分离艰难梭菌菌株，采用实时荧光定量PCR检测A、B毒素基因tcdA、tcdB及二元毒素基因cdtA、cdtB;16S r DNA确定无杂菌携带的艰难梭菌菌株，进行多位点序列分型（MLST）；使用Etest条进行耐药性检测；以是否感染艰难梭菌为分组依据，比较分析住院腹泻患者艰难梭菌感染的危险因素。结果 住院腹泻患者产毒艰难梭菌感染率为8.17%(25/306)，毒素基因均为tcdA+tcdB+，未检出二元毒素；分离出无杂菌携带艰难梭菌7株，5种ST型，分别为ST54 3株，ST129、ST98、ST53和ST631各1株，均位于clade1群；所有菌株对甲硝唑和万古霉素敏感。半年内住院史（OR=3.675,95%CI:1.405～9.612）、PPI用药史（OR=7.107,95%CI:2.575～19.613）、近1个月抗生素使用≥1周（OR=7.306,95%CI:2.274～23.472）、非甾体类抗炎药用药史（OR=4.754,95%CI:1.504～15.031）、患胃肠疾病（OR=5.050,95%CI:1.826～13.968）是腹泻患者艰难梭菌感染的危险因素。结论 目前该市住院腹泻患者艰难梭菌感染率水平不高，感染毒素类型为A+B+，基因型以clade1群和ST54型为主，对甲硝唑和万古霉素敏感。建议临床重视对有艰难梭菌感染危险因素暴露史的患者加强预防，减少艰难梭菌院内感染。