目的 探究槲皮素对放射抵抗的非小细胞肺癌A549-R细胞放射敏感性的影响及机制。方法 采用梯度增加X射线照射量的方法构建放射抵抗的非小细胞肺癌A549-R细胞，CCK-8法检测不同放射剂量照射对A549和A549-R细胞增殖活性的影响。用5、10和15μmol/L槲皮素处理A549-R细胞并用8 Gy的X射线进行照射，CCK-8法检测细胞的增殖活性，平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力，流式细胞术检测细胞的凋亡率。Western blot法检测不同剂量槲皮素处理对A549-R细胞SPINK6/EGFR信号通路的影响。采用慢病毒建立稳定过表达SPINK6的A549-R细胞，平板克隆形成实验和流式细胞术用于评价槲皮素处理对A549-R细胞放射敏感性的影响。结果 成功建立放射抵抗的A549-R细胞，放射处理后，其增殖活性较亲本A549细胞明显升高。槲皮素处理降低放射处理的A549-R细胞的增殖活性，抑制细胞的克隆形成能力并增加细胞的凋亡率。槲皮素降低A549-R细胞中SPINK6和p-EGFR表达，过表达SPINK6部分逆转槲皮素对放射抵抗的A549-R细胞中p-EGFR表达的下调作用，并部分逆转槲皮素对放射抵抗的A549-R细胞放射敏感性的增敏作用。结论 槲皮素通过下调SPINK6增加放射抵抗的非小细胞肺癌细胞对放射治疗的敏感性，其机制与抑制SPINK6介导的EGFR激活有关。