目的 探讨二甲双胍对肝癌细胞自我更新作用的影响及潜在机制。方法 成球实验和体外细胞培养法检测二甲双胍对体外肝癌细胞自我更新作用的影响。应用索拉非尼处理细胞后，对比二甲双胍和DMSO两组细胞的凋亡情况。二甲双胍处理SMMC-7721细胞后，采用Real-time PCR法检测细胞CD90、CD133和Sox2 mRNA的表达水平，Western blot检测细胞p-Akt和p-mTOR蛋白的表达。应用动物模型探讨二甲双胍对SMMC-7721注射NOD/SCID小鼠的影响。结果 二甲双胍可降低肝癌细胞中肿瘤干细胞的比例。索拉非尼处理细胞后，SMMC-7721-二甲双胍组细胞凋亡的比例显著高于SMMC-771-DMSO组。二甲双胍处理SMMC-7721细胞后，CD90、CD133和Sox2表达显著下调。二甲双胍明显减弱肝癌细胞的成球能力。此外，在二甲双胍处理的SMMC-7721细胞中PI3K/Akt通路下调，阻断PI3K/Akt通路可降低二甲双胍对细胞的抑制能力。结论 二甲双胍通过PI3K/Akt信号通路诱导杀伤肝细胞癌中的肿瘤干细胞，有望成为一种潜在的肝细胞癌治疗药物。