上调miR-378b抑制ALX4甲基化、抑制甲状腺癌细胞上皮-间质转化、侵袭和迁移

宋婷婷, 刘江豪

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解剖科学进展 ›› 2024, Vol. 30 ›› Issue (01) : 90-94. DOI: 10.16695/j.cnki.1006-2947.2024.01.024

上调miR-378b抑制ALX4甲基化、抑制甲状腺癌细胞上皮-间质转化、侵袭和迁移

  • 宋婷婷, 刘江豪
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摘要

目的 探讨miR-378b通过ALX4调节甲状腺癌细胞的上皮-间质转化以及侵袭和迁移能力。方法 MSP法检测甲状腺癌细胞ALX4基因甲基化状态,用去甲基化药物5-aza-dc处理甲状腺癌细胞后,通过MSP法、RT-PCR和Western blot探究ALX4表达与启动子甲基化的关系;将miR-378b mimics/inhibitors转染甲状腺癌细胞后,通过MSP法检测miR-378b对ALX4甲基化的影响,通过RT-PCR、Western blot检测miR-378b对ALX4以及上皮-间质转化相关因子HMGA1、N-cadherin、Vimentin表达的影响,通过TranswellTM实验检测甲状腺癌细胞的侵袭迁移情况;荧光素酶活性分析实验验证ALX4是miR-378b的作用靶点;pcDNA3.1-ALX4质粒过表达甲状腺癌细胞后,检测ALX4对细胞上皮-间质转化以及侵袭迁移能力的影响。结果 与正常的甲状腺细胞比较,甲状腺癌细胞中ALX4基因发生了甲基化,导致ALX4表达受抑制;miR-378b mimics转染甲状腺癌细胞后,抑制ALX4甲基化发生,促进ALX4表达,抑制甲状腺癌细胞上皮-间质转化相关因子HMGA1、N-cadherin、Vimentin的表达,抑制细胞的侵袭迁移能力;miR-378b靶向作用ALX4基因的3′非翻译区(3′UTR);过表达pcDNA3.1-ALX4后,抑制HMGA1、N-cadherin、Vimentin的表达,抑制细胞侵袭迁移能力。结论 miR-378b通过抑制ALX4甲基化的发生从而抑制甲状腺癌细胞上皮-间质的转化以及细胞的侵袭和迁移能力。

关键词

甲状腺癌细胞 / miR-378b / ALX4甲基化 / 细胞上皮-间质的转化 / 侵袭和迁移

中图分类号

R736.1

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宋婷婷, 刘江豪. 上调miR-378b抑制ALX4甲基化、抑制甲状腺癌细胞上皮-间质转化、侵袭和迁移. 解剖科学进展. 2024, 30(01): 90-94 https://doi.org/10.16695/j.cnki.1006-2947.2024.01.024

基金

新疆维吾尔自治区自然科学基金(2019D01C215)

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