三七提取物通过IL-6、CASP3和STAT3调节免疫应激肉鸡炎症反应

杜林, 杨萍瑞, 周翰林, 邱莉娟, 胡卫东, 曹立亭, 毕师诚

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中国兽医学报 ›› 2024, Vol. 44 ›› Issue (08) : 1755-1764. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.08.24

三七提取物通过IL-6、CASP3和STAT3调节免疫应激肉鸡炎症反应

  • 杜林, 杨萍瑞, 周翰林, 邱莉娟, 胡卫东, 曹立亭, 毕师诚
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摘要

旨在观察三七提取物对免疫应激肉鸡炎症反应的影响,并通过网络药理学和分子对接结合体内动物试验对其机理进行探讨。根据TCMSP数据库及GeneCard等疾病数据库寻找三七及肉鸡炎症相关靶点,应用Cytoscape 3.7.1和String数据库分别进行关键化合物和靶点的筛选,并构建中药-关键成分-靶点网络关系图;通过DAVID平台进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,依托于chiplot在线网站进行可视化,最后通过Pymol软件对核心聚类蛋白进行分析得到核心作用靶点,使用分子对接技术预测活性成分与核心靶点匹配程度以及动物试验进一步探索三七提取物的药效机制。动物试验将60只1日龄红羽肉鸡,随机分为3组(LPS组、CON组、PN组),试验周期为35 d。LPS组和PN组在第12、14、33和35天以250μg/kg腹腔注射LPS,CON组腹腔注射等量的无菌生理盐水。采用ELISA法检测三七提取物对血清中炎性细胞因子的影响,同时检测各组血清中的激素含量,荧光定量PCR检测各组对STAT3、IL-6和CASP3的mRNA表达水平的影响。结果表明,在第2和5周,LPS攻毒后,血清中IFN-γ、IL-6、iNOS、TNF-α和TNF-β含量显著增加(P<0.05),而IL-10含量显著下降(P<0.05)。而与LPS组相比,基础日粮中添加三七提取物后血清中IFN-γ、IL-6、iNOS、TNF-α和TNF-β的含量显著下降(P<0.05),IL-10含量显著增加(P<0.05),并且三七提取物显著降低了血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)的水平(P<0.05),提高了生长激素(GH)的水平(P<0.05)。网络药理学共预测了8种有效成分和123个肉鸡炎症的潜在靶点。三七对肉鸡炎症的保护机制可能与C型凝集素受体(CLR)信号通路、Toll样受体(TLR)信号通路、MAPK信号通路、NOD样受体(NLR)信号通路和FoxO信号通路有关。根据预测,三七缓解肉鸡炎症反应可能与作用于12个关键靶点有关。荧光定量PCR显示,三七提取物下调了IL-6和CASP3的mRNA表达(P<0.05),上调了STAT3的mRNA表达(P<0.05)。分子对接结果也显示三七提取物中的有效成分可通过IL-6和CASP3发挥抗炎作用。结果提示,三七提取物可能通过多成分、多靶点、多途径缓解免疫应激肉鸡炎症反应,本研究有利于提出新的治疗策略并为开发以赶黄草提取物为主的饲料添加剂提供理论依据。

关键词

三七 / / 炎症 / 网络药理学 / 分子对接

中图分类号

S853.74

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杜林, 杨萍瑞, 周翰林, 邱莉娟, 胡卫东, 曹立亭, 毕师诚. 三七提取物通过IL-6、CASP3和STAT3调节免疫应激肉鸡炎症反应. 中国兽医学报. 2024, 44(08): 1755-1764 https://doi.org/10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.08.24

基金

国家自然科学基金资助项目(32002325);; 中央高校基本科研业务费基金资助项目(SWU-KT22011);; 重庆市技术创新与应用发展专项基金资助项目(cstc2021jscx-lyjsAX0008)

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