非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起猪的一种高度传染性病毒性疾病。本病传染性强、致病性高，自2018年以来在我国迅速蔓延流行，对我国生猪养殖业造成了巨大的影响。为实现ASFV的快速检测，本研究将环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)与封闭式核酸可视化试纸相结合，建立了一种检测ASFV B646L基因的核酸可视化方法。该方法在65℃条件下，50 min内可检出1.16 copies/μL的重组质粒，且该方法与猪瘟病毒、猪繁殖和呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应。此外该方法无需特殊设备，操作简便，能有效避免传统等温扩增气溶胶污染造成假阳性的缺点。本研究为ASF疑似感染病例的筛选与早期诊断提供了一种快速、便捷、灵敏、可靠的候选方法。