深度覆盖蛋白质组学质谱分析:细胞蛋白提取方法的评估(英文)

许霞, 秦伟达, 李若萌, 王倩倩, 刘宁, 李功玉

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高等学校化学学报 ›› 2024, Vol. 45 ›› Issue (11) : 110-119.

深度覆盖蛋白质组学质谱分析:细胞蛋白提取方法的评估(英文)

  • 许霞, 秦伟达, 李若萌, 王倩倩, 刘宁, 李功玉
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摘要

综合评估了分别基于尿素(Urea)、十二烷基硫酸钠(SDS)、阴离子表面活性剂(BT)和新型总RNA抽提试剂(Trizol)的蛋白质提取方法,旨在优化基于质谱的蛋白质组学的样品制备流程.以HeLa细胞为例,利用与质谱兼容的表面活性剂BT可显著缩短提取蛋白质的总时间,减少样品制备过程中蛋白质的损失.整合了4种蛋白质提取方法,在不依赖柱前分馏技术的前提下,从HeLa细胞中鉴定出超过7000个蛋白质;并采用无标定量的方法定量测定了其中2990个蛋白质.值得注意的是,BT法和SDS法在提取膜蛋白方面具有更高的效率,而Urea法和Trizol法在提取细胞核和细胞质组分方面更有效.研究结果为深度覆盖蛋白质组学提供了蛋白质提取的新型解决方案,尤其在细胞蛋白提取方面,通过整合质谱兼容型表面活性剂与传统提取方法,有效提升了蛋白质鉴定数.

关键词

表面活性剂 / 蛋白提取 / 蛋白质组学 / 质谱

中图分类号

Q503 / O657.63

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许霞, 秦伟达, 李若萌, 王倩倩, 刘宁, 李功玉. 深度覆盖蛋白质组学质谱分析:细胞蛋白提取方法的评估(英文). 高等学校化学学报. 2024, 45(11): 110-119

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