牛单核细胞趋化蛋白-1单克隆抗体的制备及应用

沈若子, 刘泽, 徐正中, 郑成坤, 陈祥, 焦新安

扬州大学学报(农业与生命科学版) ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (02) : 1-8. DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2025.02.001

牛单核细胞趋化蛋白-1单克隆抗体的制备及应用

  • 沈若子, 刘泽, 徐正中, 郑成坤, 陈祥, 焦新安
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摘要

为制备牛单核细胞趋化蛋白-1 (BoMCP-1)的单克隆抗体,构建表达BoMCP-1基因的重组菌,分别构建重组菌pGEX-6p-1-BoMCP-1和重组菌pET-30a-BoMCP-1。以纯化后的原核表达蛋白rHis-BoMCP-1为免疫原,3次免疫小鼠,选择阳性血清效价在1∶150 000以上的小鼠,以rGST-BoMCP-1为筛选抗原,经过细胞融合与单克隆筛选研制单抗。获得6株特异性强的BoMCP-1单抗,分别命名为3D10、4G9、4B6、1D8、3L4和6F5,亲和力常数分别为2.14×10~7、5.12×10~7、6.64×10~8、8.42×10~7、5.86×10~8、3.61×10~7 L·mol-1。流式细胞术显示4G9与天然BoMCP-1具有良好的反应性。综上,该研究成功制备了特异性强、亲和力高、天然反应性良好的BoMCP-1单克隆抗体,可为进一步研究MCP-1在牛疫病的致病机制及诊断应用奠定基础。

关键词

/ 单核细胞趋化蛋白-1 / 单克隆抗体 / 流式细胞术

中图分类号

S852.4

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沈若子, 刘泽, 徐正中, 郑成坤, 陈祥, 焦新安. 牛单核细胞趋化蛋白-1单克隆抗体的制备及应用. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2025, 46(02): 1-8 https://doi.org/10.16872/j.cnki.1671-4652.2025.02.001

基金

国家重点研发计划项目(2021YFD1800403); 江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(21)1004]; 高等学校学科创新引智计划项目(D18007); 江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)

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