为探究氯霉素与胰蛋白酶的相互作用机制，研究氯霉素对胰蛋白酶结构和活性的影响，利用多种光谱技术和分子对接技术在模拟生理条件下研究氯霉素（chloramphenicol）与胰蛋白酶（trypsin）的相互作用。结果表明：胰蛋白酶的荧光强度随氯霉素浓度的增加而降低，且荧光动态猝灭常数(K_sv)随温度的升高而降低，说明氯霉素能有效猝灭胰蛋白酶荧光，且猝灭作用机制为静态猝灭。热力学参数研究表明氯霉素与胰蛋白酶间相互作用力是以静电引力为主。圆二色谱和傅里叶变换红外光谱结果均显示胰蛋白酶二级结构发生变化。酶活性测定表明，在研究的浓度范围内，氯霉素引起胰蛋白酶活性下降。分子对接结果显示氯霉素可与胰蛋白酶中HIS-57、TYR-59、SER-195形成氢键，进一步表明氯霉素存在对胰蛋白酶结构的影响。综上，氯霉素与胰蛋白酶会发生相互作用，且会对胰蛋白酶的结构和活性产生影响，这为抗生素类药物与体内消化酶的相互作用研究提供可靠的参考依据。