钙调通路中CACNA1C(CaV1)表达上调可抑制兰尼碱受体(RYR2)基因表达，促进钙离子转运而影响蛋壳形成。为探究CACNA1C和RYR2基因上游调控序列的核酸多态性与五华鸡蛋壳品质的关系，以及改善地方品种鸡蛋壳品质，选取具有完整产蛋记录的340只35周龄五华鸡，翅静脉采血提取总DNA, PCR扩增、测序用于筛选CACNA1C和RYR2基因启动子区SNP位点；收集3 d种蛋用于蛋壳品质检测，并随机取5只鸡屠宰后取心、肝、脾、肺、肾、胸肌、腿肌、卵巢、膨大部、子宫、峡部等组织检测基因表达量；构建CACNA1C基因过表达和敲低质粒转染DF-1细胞，分析其对RYR2基因的表达调控作用。结果表明：CACNA1C在膨大部表达量显著高于子宫、卵巢、峡部、心、肝、脾、肺、肾、胸肌和腿肌。CACNA1C和RYR2基因上游调控序列-2 000 bp处各筛选出1个SNP位点，CACNA1C基因g.61191372 C>G位点产生3种基因型，CACNA1C基因CC型过表达可抑制RYR2表达；CC型蛋壳强度显著高于CG型。RYR2基因g.29842706 G>A位点产生3种基因型，AG和AA型蛋壳厚度显著高于GG型。综上，CACNA1C基因下调RYR2基因的表达，CACNA1C基因g.61191372位点突变成CC型时蛋壳强度显著提高，RYR2基因g.29842706位点突变成GG型时蛋壳厚度显著降低，在育种工作中可将其作为鸡蛋壳品质选择的遗传标记。