目的 分析徐州医科大学附属医院尿路感染患者尿液标本的病原菌分布及大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药情况，为合理选用抗菌药物提供指导依据。方法 收集2021年8月—2022年7月徐州医科大学附属医院送检的3 882份自行收集或无菌导出的尿液标本，并进行中段尿培养，分析尿培养阳性标本病原菌分布结果、大肠埃希菌检出科室分布情况及其抗菌药物敏感性。结果 3 882份送检尿培养标本中尿培养阳性标本共881份(22.69%),其中由单一菌株引起的有846份，由2种混合菌株引起的有35份；共分离出916株病原菌，其中检出512株革兰阴性菌(55.90%),以大肠埃希菌(306株，33.41%)和肺炎克雷伯菌(75株，8.19%)为主；检出革兰阳性菌188株(20.52%),以屎肠球菌(80株，8.73%)和粪肠球菌(27株，2.95%)为主；检出216株真菌(23.58%),以白假丝酵母菌(77株，8.41%)和热带假丝酵母菌(58株，6.33%)为主。尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)分离株中8.50%(26/306)分离自门诊患者，91.50%(280/306)分离自住院患者，其中泌尿外科、肾脏内科、风湿免疫科、神经内科和重症监护室(ICU)的检出率依次为32.68%、20.92%、8.50%、6.86%、6.21%。UPEC对替卡西林(88.24%)、头孢呋辛(61.49%)、头孢呋辛酯(62.94%)、左氧氟沙星(72.46%)和复方新诺明(58.03%)的耐药性较高，耐药率均高于50%;对其他抗菌药物较为敏感。结论 该院尿路感染标本中病原菌构成复杂、种类多样，其中革兰阴性菌是尿路感染的主要致病菌，以大肠埃希菌占比最多，部分病原菌呈现高水平耐药。患者应积极配合医生开展病原菌鉴定及药物敏感试验，以便合理选用抗菌药物，避免多重耐药菌和新型耐药菌的出现。