目的探讨靶向LIM和SH3蛋白1基因（LASP1）干扰腺病毒（Ad-LASP1-shRNA）对非小细胞肺癌（NSCLC）的抗肿瘤作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）及Western blot检测NSCLC组织中LASP1表达水平;应用Ad-LASP1-shRNA感染A549细胞48h;采用qPCR、Western blot分析转染后A549细胞中mRNA及蛋白的表达水平;划痕实验和Transwell法检测转染后A549的迁移与侵袭能力;建立A549移植瘤模型,瘤体内注射Ad-LASP1-shRNA,定期测量肿瘤体积。结果 NSCLC癌组织和癌旁组织中LASP1的mRNA表达量、蛋白表达水平差异均有统计学意义（P<0.001）。qPCR和Western blot表明Ad-LASP1-shRNA可有效抑制LASP1的表达。Ad-LASP1-shRNA感染A549细胞24h后的A549迁移、侵袭能力显著降低,侵袭和迁移细胞数目显著低于对照组（P<0.05）;接种5周后Ad-LASP1-shRNA组肿瘤体积为（334.5±32.6）mm³明显小于PBS组（833.9±61.3）mm³,Ad-LASP1-shRNA能显著抑制移植瘤的生长。结论 Ad-LASP1-shRNA对NSCLC有显著的抑瘤效果,值得进一步研究。