目的 探讨-80℃短期冻存不同时间对NK细胞功能及杀伤活性的影响。方法 采集和分离健康人外周血单个核细胞,在体外培养扩增NK细胞,扩增12 d后将部分NK细胞于-80℃冻存1、4、12、24周。用流式细胞仪分别检测冻存前后NK细胞的表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B及CD107a的表达;用LDH法检测并比较冻存前后的NK细胞对食管癌细胞株的杀伤活性。结果-80℃冻存1、4、12周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CD107a表达及对食管癌的杀伤活性,差异无统计学意义(P>0.05)。而冻存24周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CD107a表达及对食管癌的杀伤活性,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论-80℃冻存NK细胞12周以内对细胞的功能及杀伤活性没有影响。